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2 1微生物的实验室培养 培养条件 培养基 无菌技术 阅读P14 16 思考 培养基的概念 种类 基本成分 无菌技术的概念 消毒与灭菌的区别 常用方法 一 培养基 概念 种类 按物理性质分 按照微生物对营养物质的不同需求 配制出供其生长繁殖的营养基质 液体培养基 固体培养基 不含琼脂 含琼脂 一 培养基 基本成分 满足微生物对pH 特殊营养物质 氧气的要求 葡萄糖 CO2等含C物质 铵盐 硝酸铵等含N物质 碳源 氮源 无机盐 氮源 二 无菌技术 概念 种类 指培养微生物操作中 所有防止杂菌污染的操作 较为温和 杀死部分 煮沸消毒法 巴氏消毒法 紫外线 药剂等 杀不死 强烈 杀死全部 灼烧灭菌 干热灭菌 高压蒸汽灭菌 杀死 P15旁栏思考题 P16旁栏思考题 灼烧灭菌 干热灭菌 高压蒸汽灭菌 160 170 1 2h 100kPa121 15 30min 适用于 耐高温 保干燥的物品 思考 以下物品 应选用哪种方法来灭菌 用外焰灼烧 实验操作 大肠杆菌的纯化培养 一 制备培养基 称量 溶化 灭菌 计算 倒平板 P17讨论题 实验操作 大肠杆菌的纯化培养 二 纯化大肠杆菌 原理 平板划线法 纯化方法 接种方法 在培养基上 将细菌分散或稀释成单个细胞 使其长成单个菌落 稀释涂布平板法 阅读P18 19 思考 依据的原理 操作的过程 平板划线法 原理 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作 将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面 在数次划线后可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体称菌落 操作过程 灼烧目的 能否划破培养基 Why要冷却接种环 P18讨论3 why总是从上一次划线的末端开始划线 线条末端的细菌数目比前端少 P18讨论题1 每次划线前灼烧接种环 why 划线结束后仍要灼烧接种环 why 杀死上次划线结束后残留在环上的菌种 及时杀死环上残留菌种 避免污染环境和感染操作者 复习 培养基的基本成分 无菌技术的种类 微生物常用的接种方法 碳源 氮源 水 无机盐 消毒 灭菌 平板划线法 稀释涂布平板法 稀释涂布平板法 原理 两大步骤 将菌液进行一系列的梯度稀释 再将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养 在稀释度足够高的菌液里 聚集在一起的微生物将分散成单个细胞 从而能在培养基表面形成单个的菌落 涂布器 1 系列稀释操作 101 102 103 104 105 106 2 涂布平板操作 思考 P18讨论 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行 目的 四 课题延伸 菌种的保藏 临
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