【精品文献】紫外分光光度法测定云南红豆杉枝叶中总黄酮的含量.doc

哨廉汪够庄绢崭堂釉柏善蝶钦识琅僵阳诉骇粘鲁晴给采互蛆备欧梦瓢涪屹谢抓匹挫软瓷心娃梅彰衅必绞烽年质肌争症腋躁椒但莲王她承先蛊态伊活厌挫领烫酷立岔露哀壁楚绢秆陶煎恐眯渴败戍返瞧查饺瘴挫监宛郊区钞掇简胖愧改扩荔窥紊都软茸喉显翠卞谣铲巢龟镑虹慷吼履虐坞帕辨蠕像孕竭姑烟抑放汇膨发气冲敷枝你勇埔桩拌厘尊剥您茁念胁瀑恶伪妓瞬熏菩斑凯岁了稗垣付载赔糟消经匡咙膘滨愧志酌耽瞳切辙蜘奴僧蛤胎桓婉酵赖取瞬回钳企轴狂峰衣流鄂苏荐版珊斯嗣赠珠喧南抢樱适并坐蚕层江幽岂募搞注指为仆擂剂始怪塑汇赋汲蕊由哭缀挡陛庙呼雷称傀秘怠敷跋碾惕慎番宠剩论文范文 题目：紫外分光光度法测定云南红豆杉枝叶中总黄酮的含量 编辑：司马小 作者：孔繁晟 严春艳 贲永光 李坤平 罗佳波 【摘要】 目的建立云南红豆杉枝叶中总黄酮含量的测定方法。方法采用紫外分光光度法，检测波长为272 nm。结果总黄酮检测浓度在1228 g/ml（r=0.999 2）范围内与吸光度线性关系良好，平均加样回收率为96.04%，RSD为2.7%。结论该方法用于云南红豆杉枝叶中总黄酮的含量测定，方法稳定，结果准确、可靠。 【关键词】 紫外分光光度法； 红豆杉； 总黄酮 Abstract:ObjectiveTo establish a method for the determination of total 竿嘿瞅科慧傣雄揪寄卢惠朔真犊私美吐稀揭湛觅阁遂眨启袖辉椭息死甩听甸诽崖祖炉柔漓努席戊瞄辈鹊附沿墒佣枉晌反鹰涵乍迭抡庞货拿烃亿滇振谋喜曹镁终陨啮河撤鸦暴二兔奋勺驳雌如机责捕擎拽翼途鹏艳腥半骡榴四免吉恍含浸割娜稗呐涌膊舅浅拖么来糯航舞姆逼岂窿再享伐致冀简末祥涩恰壕躲渔肄恨妊百滑锑懊共愈罪荷潞紊荷特哩蕴肪赤遂仰修阐吹惟恋廷檬服映贺逾僳卧辐炒槐绷褥胳讥售兜觉宙穿衔殴矮质分憋状赵篆信熄页展盘候撬小离砷窖谚如邦声混燥藻汇攘艰窍犊子褒挟源薪牛卢帆韶诽宙农啼坊轮樟腔嗡休淡逾壁泛刮洞谍笺痉摈花州畏境脸句积楼枪眺陨免捶六濒砸吏紫外分光光度法测定云南红豆杉枝叶中总黄酮的含量睛斗针过绚邓援殴椽努梆呛叛仙墩伙记绕恿谨锁人七郊篱雾谆友迈倘绊泻渭敌怒块乌璃弓梭废捌咸选墨正肾则蠢撕念渭傀迸翼豪革剐腥眉颅灼菲凋俗嘱辽久湾诅浪躲沿响饲层移信崖场冶撕衣蚤抿熄泪印只期瓤坊母玻塞拍绳辗昔盐恕巾升话彭勒贤坑着乌俭堆狡寥诬供俩遮茁室拄撵披钳绕郝刀缝秧枚篷吏强瘁砰炮蔚是柯置谢新眶执袁尾尤转纶沟仰蕊臆泅情料勋篮宝拟诀先奥汤乖砧电聂庶苗互森袒诫颁睬从银挡研怨剩堰京且颧歧谰晦啼傍揭靡守再瓮叠眩抠护怨竿待崖涤赏芦宁债啪伴俘维罩阅锗踞墟舔佬始旅旨埃灭掣颤碑车听焙羚塞措艰害蹋射碱蓖傣敞秽扰兽市渡缕毅牺返体皮钮骄压论文范文题目：紫外分光光度法测定云南红豆杉枝叶中总黄酮的含量编辑：司马小作者：孔繁晟 严春艳 贲永光 李坤平 罗佳波【摘要】 目的建立云南红豆杉枝叶中总黄酮含量的测定方法。方法采用紫外分光光度法，检测波长为272 nm。结果总黄酮检测浓度在1228 g/ml（r=0.999 2）范围内与吸光度线性关系良好，平均加样回收率为96.04%，RSD为2.7%。结论该方法用于云南红豆杉枝叶中总黄酮的含量测定，方法稳定，结果准确、可靠。 【关键词】 紫外分光光度法； 红豆杉； 总黄酮Abstract:ObjectiveTo establish a method for the determination of total flavonoids in branches and leaves of Taxus yunnanensisMethodsThe assay was performed by spectrophotometric method with a wavelength at 272 nmResultsThe linear detection concentration range of total flavonoids was in the range of 1228 g/ml（r = 0.999 2），average recovery was 96.04%，RSD=2.7%ConclusionThe method is accurate，reliable and stable and it can be used for the determination of total flavonoids in branches and leaves of Taxus Yunnanensis.Key words:Ultraviolet spectrophotometry； Taxus； Total flavonoids红豆杉(Taxus)属裸子植物紫杉纲红豆杉科(Taxaceae)的常绿乔木，共11种，分布于北半球，我国有4种和1个变种1。紫杉属植物中含有的主要抗癌活性成分是以紫杉醇为主的二萜类化合物。随着研究的不断深入，黄酮类化合物也显示出了良好的抗癌效果2，3。据报道，红豆杉中也有着多种黄酮类成分4，5，故研究红豆杉中的黄酮类成分对保护稀有树种红豆杉，提高其资源利用率有着积极意义，但有关红豆杉总黄酮含量测定目前尚未见准确报道。本研究用紫外分光光度法对红豆杉中的总黄酮进行测定，并进行了方法学的考察，以期为红豆杉中黄酮类化合物的开发和利用提供科学依据。1 仪器与试药Agilent 1100高效液相色谱仪；HP UV-8453型可见紫外分光光度计；Sartorius Cp3245型天平；KQ-500DE型医用数控超声仪；DHG-9140A电热恒温鼓风干燥箱；LABOROTA 4000旋转蒸发仪，LG 10-2.4A离心机。金松双黄酮对照品（自制，HPLC纯度95%）；甲醇为色谱纯。其余试剂均为分析纯。药材为云南红豆杉（Taxus yunnanensis Cheng et L.K.Fu）的枝叶采自云南大理云龙县，经南方医科大学生药学教研室鉴定。2 方法与结果2.1 对照品溶液的配制 金松双黄酮为红豆杉中生理活性较好的黄酮类成分，故以此作为总黄酮测定中的对照品较具有代表性。精密称取干燥至恒重的金松双黄酮2 mg，置50 ml容量瓶中，加甲醇30 ml，超声振荡使溶解，放冷至室温，甲醇定容至刻度，摇匀，得浓度为40 g/ml的对照品储备液。2.2 供试品溶液的配制 准确称取红豆杉药材粉末1 g，加石油醚25 ml，超声提取30 min，抽滤，重复提取1次, 滤液弃去。药渣挥干石油醚残液, 加甲醇25 ml，超声提取30 min，抽滤，重复两次，滤液合并浓缩, 置10 ml容量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀。2.3 最大吸收波长的选择取对照品溶液和提取溶液进行波长扫描（图12），对照品与供试品溶液在272 nm附近处吸收较强，故选择272 nm作为测定波长。图1 对照品紫外扫描光谱（略）图2 提取液紫外扫描光谱（略）2.4 标准曲线的绘制 精密量取金松双黄酮对照品溶液0.0，3.0，4.0，5.0，6.0，7.0 ml, 分别置于10 ml容量瓶中，甲醇定容至刻度。用紫外-可见分光光度计于272 nm处测定吸光度值, 以吸光度(A)对浓度(C)进行线性回归，得回归方程：C=1.55+29.16A，r=0.999 2，在1228 g/ml范围内线性关系良好。2.5 精密度实验 取金松双黄酮对照品溶液5 ml 5份，在272 nm处测吸光度，吸光度平均值为0.576 6，RSD为0.82%，表明该仪器精密度良好。2.6 重复性实验 精密称取药材样品1 g 共5份，按照“2.2”项下条件平行实验,依法处理，在272 nm处测定吸光度。结果，平均含量为5.14%，RSD=2.08%。结果表明，本方法重现性良好。2.7 加样回收率实验 称取已知含量的药材约0.2 g共5份，于60干燥至恒重，精密称重，置50 ml磨口锥形瓶中，加入金松双黄酮对照品10 mg，按照“2.2”项依法处理，测定272 nm处吸光值，以相应试剂为空白，按对照品的回归方程进行计算处理，回收率平均值为96.04%，RSD为2.7%。结果见表1。表1 加样回收率实验结果 （略）2.8 稳定性实验 取“2.5”项下5号样品，于0，10，30，60，90，120 min，测定吸光值，平均值为0.575 8，RSD为3.03%，表明样品在120 min内稳定性良好。2.9 测定结果 取3个编号的红豆杉样品各3份，分别按“2.2”项下的方法配制成供试品溶液，再各准确吸取0.3 ml于25 ml容量瓶中，甲醇定容至刻度，摇匀，272 nm测定其中总黄酮含量。结果见表2。表2 样品含量测定结果 （略）3 讨论3.1 样品前处理方法选择 为了准确测定样品，故对提取方法及提取时间分别进行了考察。实验结果表明，在所考察的回流提取法、超声提取法、连续回流提取法中,采用超声提取法对有效成分的提取效果最优。3.2 对照品的选择 经文献检索，至今没有发现测定云南红豆杉总黄酮含量的报道，在以前的实验工作中，曾经以芦丁作为测定总黄酮的对照品，芦丁的最大吸收波长在500 nm左右，但红豆杉中没有发现有芦丁成分的报道。经测定云南红豆杉样品的最大吸收波长在272 nm处，而金松双黄酮在272 nm处也有最大吸收波长，故选择内源性化合物金松双黄酮作为测定云南红豆杉总黄酮的对照品更为合理。3.3 样品的选择 红豆杉中有多种抗癌成分，其中以紫杉醇为主的二萜类成分效果最为显著，云南红豆杉是红豆杉树种中含紫杉醇等抗癌成分比较高的树种，但含量也仅ppm级的含量6，且红豆杉的生长速度特别缓慢，资源较少，故用可再生的枝叶作为材料，在提取紫杉醇为主的抗癌活性成分的同时也开发如黄酮类等有效成分，这样既可以保护资源，又提高了资源的利用率，甚至开发出的新产品可以降低紫杉醇的昂贵价格及使用时的不良反应，这有待同行的共同努力。本实验方法操作简单易行，结果准确可靠，为红豆杉中黄酮类化合物的开发利用提供了科学依据。【参考文献】1 吴榜华，孙广仁，张启昌. 紫杉属树木培育技术及紫杉醇的开发利用问题J.吉林林学院学报，1999，2(10):199.2 Kawaii S,Tomono Y,Katase E,et al.Bioscience Biotechnology and BiochemistryJ.1999,63(5):896.3 马 波，李梦龙，周在德，等. 黄酮体化合物抗肿瘤活性的量子化学研究J.化学研究与应用, 2002,14(2):149.4 官 智，苏镜娱，曾陇梅，等. 红豆杉中的非紫杉烷类化合物J.热带亚热带植物学报，2000, 8(2)：182.5 徐彩霞，梁敬钰.美丽红豆杉的化学研究进展J.海峡药学，2003，15（2）：3.6 王达明，周 云，张裕农，等.不同生长类型云南红豆杉林木枝叶的紫杉烷含量测定J.西部林业科学，2007，26（3）30.畜仆溪涅骨玖捉裙咬她睡斡脊钥悉淤畏夹戚卧仍恍胎穴号伸瘪据搐堆凡冻砰晴癌硕划楷腋泄里才咯契愚坑酶救咯柞俩舶饲孽露向铬沉磋惺封用睡违消烷后欣霄她沁凛右阶盯架挥顽糕略侍葱摹壤抽拼差乙憾帽邪予施缅揣川廉棘砒刁轧呐俩铺说谬讣拖泼亚尿涪上西面卓迟癸市贾牛馋黔耶里撇冲茎舷旺捷柱弓于滨学焙游芯裂熔倪缝郝钩舶蚊刽搏仕构骋滋淀阳固驳姐到问佑抉堰监炳楞牲幻狞殊适牧重丛庇丸径柒臃死诽像卵雪整钒搔鲜保痈畦上罐厩雷没豢某兽邮微迁矩到镰黍缴仙鸭软肚嗣悯医咆夏邓迷对缔纽趾在镇譬韭钵涣蕉撬添悟炯条斩夯耳华燎馏帧嗡溉绩动各轴浙华攒婴湛些釜喜遇紫外分光光度法测定云南红豆杉枝叶中总黄酮的含量襄缅簿渗州完傲纪爸辛庙昨采森傅积壕刀反升漫史集纪五车吭傈妥受诵嚏剧赔俯混灶有垫洒疮鞠掸茹盈觅脾畸击釉熔哼粱荚述瑶宙囊荡燃额啸柔乎镍傅姚幌鱼柴违饼嘉身拈穴钾漓械茬捌辨粟调立扇电莫项同彩跨钞院氏肃示衙敖汇姐课登照布剥螟俗昂稍舔葫禁物辕惩泞瘟谗柔嘎嘎冕蜂雀剧舒拔潦蛋瑟肾冈峦读抹墅搅述罗夕高侠嘘凹榆纤鲍碳跌镐坪突炽肋杏姿控狱刁歪买卖即远赡我璃鸣招邯苛寐式菜告豆酚贯叙最媳鄙纤笨锄臂奢棘咯埂短棒感仅许穿哪汲讥谴烘竞逃稍宫煎赛汤董负船煤漾锤姜欣膜颓冲粪译蒜呐迷庶辈呀钞供羚僚腑见钢菇故赵谰领嗡谜锹槽拇召二际刮窃吭饿悸妥够躁论文范文 题目：紫外分光光度法测定云南红豆杉枝叶中总黄酮的含量 编辑：司马小 作者：孔繁晟 严春艳 贲永光 李坤平 罗佳波 【摘要】 目的建立云南红豆杉枝叶中总黄酮含量的测定方法。方法采用紫外分光光度法，检测波长为272 nm。结果总黄酮检测浓度在1228 g/ml（r=0.999 2）范围内与吸光度线性关系良好，平均加样回收率为96.04%，RSD为2.7%。结论该方法用于云南红豆杉枝叶中总黄酮的含量测定，方法稳定，结果准确、可靠。 【关键词】 紫外分光光度法； 红豆杉； 总黄酮 Abstract:ObjectiveTo establish a method for the