紫外分光光度法测氧氟沙星片剂中氧氟沙星的含量

紫外分光光度法测定氧氟沙星片剂中氧氟沙星的含量一、 实验目的1、 掌握紫外分光光度法测定氧氟沙星的原理和方法2、 熟悉绘制工作曲线的一般方法和应用。二、 实验原理 氧氟沙星属第3代喹诺酮类光谱抗菌药物，其抗菌作用强，对厌氧菌、支原体以及肺炎衣原体等也有一定作用。氧氟沙星在三氯甲烷中略溶, 在水或甲醇中微溶或极微溶解, 在冰醋酸或氢氧化钠溶液中易溶,在0.1mol/L盐酸中可溶。考虑到0.1mol/L盐酸溶液较为常用，因此选择0.1mol/L的盐酸溶液为溶剂。氧氟沙星的吸收光谱上的最大吸收峰波长为2941 nm。本实验采用紫外分光光度法测定氧氟沙星片剂中的含量，简洁、快速，可用作生产过程的快速测定。氧氟沙星的结构如下：三、 仪器与试剂仪器：UV2550紫外分光光度计，容量瓶（100ml）,烧杯，具塞刻度试管（10ml），玻璃棒，微量加样器，研钵，布氏漏斗，吸量管。试剂：氧氟沙星标准样品，氧氟沙星片（0.1g/片），0.1 mol/L盐酸溶液。四、 实验步骤1、标准溶液的配制：精密称取105 干燥至恒重的氧氟沙星标准品10mg，置于烧杯中，用0.1 mol/L盐酸溶液溶解，然后转移至100ml容量瓶中，稀释至刻度，定容，摇匀，得100g/ml氧氟沙星标准溶液。2、波长的选择精密量取一定量的上述标准溶液11份，分别取0.02、0.2、0.4、0.6、0.8、1、1.2、1.6、2.4、4、5ml的标准溶液于10ml的刻度试管中，用0.1 mol/L盐酸溶液稀释至刻度线，摇匀。制成浓度分别为0.2、2、4、6、8、10、12、16、24、40、50g/ml的溶液。以0.1mol/L盐酸溶液作为空白溶液，用1cm的比色皿在紫外可见分光光度计上测定每份溶液的吸光度。测定前，选取其中浓度为8g/mL的溶液，以0.1 mol/L盐酸溶液作参比，在200400 nm波长范围扫描，从光谱中找出吸收峰，以吸光度值最大的波长作为测定波长3、标准工作曲线实验 在最大吸光度的波长处，分别测定上述溶液的吸光度，在线性范围内用吸收度(X)对质量浓度(Y)进行回归，得回归方程及相关性系数R。4、检出限的测定：取0.1mol/L盐酸溶液1份于10ml的刻度试管中，在相同条件下于处测定其吸光度11次，按检出限公式：D=3/K计算。5、精密度的测定：分别吸取已配制好的100ug/ml标准溶液1ml于6个10ml的刻度试管中，并用0.1 mol/L盐酸溶液稀释至刻度，制成浓度为10g/ml的溶液。在相同条件下测得各自的吸光度A1、 A2 、A3 、A4 、A5、 A6，求RSD。6、样品的测定取氧氟沙星片10 片, 精密称定, 研细,精密称取（约相当于氧氟沙星0.1g），置100ml容量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液至刻度，摇匀，用布氏漏斗抽滤，精密量取续滤液1ml，置10ml的刻度试管中，加0.1mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。吸取供试品溶液8ml于100ml的容量瓶中用0.1mol/L盐酸溶液稀释至刻度，作为样品。取配制好的样品溶液于吸收池中，在相同条件下于处测定其吸光度，求出氧氟沙星片剂中氧氟沙星的实际含量cx。7、回收率的测定： 分别取上述2g/ml,12g/ml,40g/ml的标准溶液5ml，与5ml的上述8g/ml的样品混合于10ml的刻度试管中，在相同条件下测定吸光度A7、A8、A9在标准曲线上找到其对应的溶度，换算成质量。求出回收率。五、数据记录及处理 1、波长的选择2、标准曲线的绘制标准曲线吸光度标准液C（ug/ml）0.22.04.06.08.0101216244050处吸光度3、检出限的测定测得11份0.1mol/LHCl溶液在最大吸光度值的波长处的吸光度，如下：组数1234567891011吸光度A由标准偏差公式得，求D=3/K4、精密度的测定平行测定的10ug/ml氧氟沙星溶液在最大吸光度值的波长处的吸光度如下：组数A1A2A3A4A5A6平均值吸光度求RSD。根据标准偏差公式