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专题二十六克隆技术 植物细胞工程 1 植物细胞的全能性 1 原理 细胞内含有本物种的 2 全能性表达条件 具有完整的细胞结构 处于状态 提供一定的和其他适宜外界条件 全部遗传信息 离体 营养物质 激素 2 植物组织培养技术 1 原理 植物细胞具有 2 过程 全能性 人工种子 再分化 3 植物体细胞杂交技术 1 概念将不同种的植物体细胞 在一定条件下融合成 并将其培育成的技术 2 原理 原生质体融合 利用了细胞膜的 杂种细胞发育成杂种植株 利用了细胞的 杂种细胞 新的植物体 流动性 全能性 过程 纤维素酶和果胶酶 原生质体 聚乙二醇 细胞壁 杂种植株 4 植物细胞工程的应用 1 应用举例 植物繁殖新途径 作物新品种的培育 2 人工种子的获取方法及解决的问题 获取方法 以植物组织培养得到的 不定芽 顶芽和等为材料 用人工薄膜包装 胚状体 腋芽 解决的问题 a 一些植物繁殖周期长 数年后才能结出种子 b 有些作物优良杂种的后代因发生性状分离而丧失其优良特性 c 常规种子的生产受季节 气候和地域的限制 并且占用大量的土地 动物细胞工程 1 动物细胞培养 动物细胞工程技术的基础 1 动物细胞的培养过程 胰蛋白酶 原代培养 胰蛋白酶 传代培养 2 动物细胞培养的原理 条件及应用 细胞增植 促生长因子 7 2 7 4 维持ph 更换培养液 有毒物质 医学研究等 2 动物体细胞核移植技术和克隆动物 1 动物体细胞核移植技术的过程 细胞培养 中期 去核 重组细胞 胚胎移植 2 原理 具有全能性 3 结果 动物体细胞核 产生新个体 遗传改良 濒危物种 供体 移植 3 动物细胞融合与单克隆抗体 1 动物细胞融合 原理 融合方法 聚乙二醇 peg 电激等 意义 突破了的局限 使成为可能 为制造开辟了新途径 细胞膜的流动性 灭活的病毒 有性杂交方法 远缘杂交 单克隆抗体 2 单克隆抗体 制备过程 优点 特异性强 可大量制备 用途 作为 用于治疗疾病和 杂交瘤细胞 能产生所需抗体 灵敏度高 诊断试剂 运载药物 植物组织培养和植物体细胞杂交的比较 植物细胞工程 典例1 2015 河南省洛阳市统考 如图表示通过二倍体植株甲 自花受粉植物 和植株乙培育植株a b c d e的过程 其中植株甲的基因型为aabb 两对等位基因分别位于两对同源染色体上 请据图回答 1 植株a是 倍体 经秋水仙素处理后获得的植株b的基因型为 2 植株c与植株甲表现型相同的概率为 3 培养植株d的过程中 由离体细胞形成愈伤组织的过程称为 若要制备人工种子 则需诱导愈伤组织形成 结构 再包裹上人工种皮 4 获得植株e的过程称为 其中两个原生质体融合时常用的诱导剂是 5 植株a d e的培育过程中都需要采用的生物技术是 其理论基础是 其培养过程一定要保证 条件 防止培养失败 植株a b c d e中可能与植株甲的基因型相同的是植株 解析 1 将二倍体植株甲的花粉粒进行花药离体培养得到的植株就是单倍体植株a 其基因型可能是ab ab ab ab 因此秋水仙素处理之后染色体加倍 其基因型是aabb或aabb或aabb或aabb 2 植株c是植株甲自花受粉的后代 因此植株c与植株甲表现型相同的概率是 3 4 3 4 9 16 3 由离体细胞形成愈伤组织的过程是脱分化 再经过再分化形成胚状体 进一步分化形成新植物体 如果制备人工种子 则形成胚状体即可 4 植株e是两种不同的植物经过植物体细胞杂交形成的新物种 两个原生质体融合时常用的诱导剂是聚乙二醇 5 植株a d e的培育过程中都是由细胞培养得到植株 都需要采用的生物技术是植物组织培养 其理论基础是细胞的全能性 培养过程中一定要注意保证无菌条件 防止杂菌污染而导致培养失败 植株d与植株甲的基因型一定是相同的 植株c中有部分与植株甲的基因型相同 答案 1 单aabb或aabb或aabb或aabb 2 9 16 3 脱分化胚状 体 4 植物体细胞杂交聚乙二醇 5 植物组织培养细胞的全能性无菌c d 1 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 动物细胞工程 特别提醒 植物体细胞融合获得的杂交细胞可形成杂种植株 而动物细胞融合获得的杂交细胞不会发育成个体 2 动物细胞培养与动物体细胞核移植 特别提醒 1 卵母细胞选择时期及原因 选取处于减 中期的卵母细胞 其具备受精能力 2 选卵细胞作为受体细胞的原因 细胞体积大 易于操作 卵黄多 营养丰富 为发育提供充足的营养 能激发重组细胞分裂分化 典例2 2015 四川达州质检 如图所示为细胞融合技术的一些过程 1 若a b细胞为植物细胞 那么这样的细胞已经用酶降解去掉了 这种酶可能是 由此生成的a和b细胞称为 2 从a和b细胞到c细胞的过程中 必须用 处理 3 若a细胞为骨髓瘤细胞 b细胞为已免疫的b淋巴细胞 那么d细胞称为 细胞 由d细胞连续分裂产生大量细胞的过程 称为 这种细胞既能无限增殖 又能产生 4 若a细胞为人细胞 b细胞为鼠细胞 并分别用红 绿荧光染料标记细胞膜上的蛋白质 在c细胞阶段 细胞一半发红色荧光 一半发绿色荧光 到d细胞阶段 两种颜色的荧光均匀分布 请解释原因 5 下图表示利用细胞工程技术治疗肝病患者的流程图 图中的甲细胞应是取自 患者父母 患者 患者的兄弟姐妹 的正常体细胞 早期胚胎细胞的分裂方式是 图中a b所涉及的生物工程技术分别有 解析本题考查动植物细胞融合与单克隆抗体制备的有关知识 1 植物细胞外有细胞壁 阻碍了植物体细胞的杂交 因此要用纤维素酶和果胶酶分解植物细胞的细胞壁 分离出有活力的原生质体 2 细胞之间必须用诱导剂 促融剂 处理才能实现融合 3 在单克隆抗体的制备过程中 首先将已免疫的b淋巴细胞与骨髓瘤细胞在灭活的病毒等因素诱导下融合 再筛选出杂交瘤细胞 杂交瘤细胞具有既能产生特异性抗体 又能迅速大量增殖的特点 4 依题意 用荧光标记的蛋白质能在杂交细胞的细胞膜上均匀分布 说明细胞膜上的蛋白质是可以移动的 从而体现了细胞膜具有一定的流动性 5 在细胞培养过程中细胞只进行有丝分裂 a b过程分别表示核移植 早期胚胎培养 答案 1 细胞壁纤维素酶和果胶酶原生质体 2 诱导剂 3 杂交瘤克隆特异性抗体 4 细胞膜上的蛋白质是可以移动的 5 患者有丝分裂 核移植 早期胚胎培养 题后归纳 关注细胞工程技术中的六个 两 1 植物体细胞杂交中 两种工具酶 纤维素酶 果胶酶两种细胞融合方法 物理法 化学诱导法2 动物细胞培养中的两次使用胰蛋白酶第一次在原代培养前 用胰蛋白酶处理剪碎的组织块 目的是使之分散成单个细胞 第二次是在原代培养过程中 目的是使贴壁生长的细胞从瓶壁上脱离下来 3 动物细胞的两种培养 原代培养与传代培养原代培养与传代培养的分界点 贴满瓶壁的细胞脱离瓶壁后的分瓶培养 分瓶前的

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