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TUNEL technology was used to label in situ apoptotic cells to detect exactly apoptosis index in endometrial tissue.Results The expression of MMP9 in local bleeding region was significantly higher than that in normal position of endometrium and that in control group. The expression of TIMP1 in local bleeding region was significantly lower than that in normal position of endometria and that in control group. Cellular apoptosis index in the bleeding region of endometrium was significantly higher than that in normal position of endometrium and that in control group.Conclusion The imbalance of MMP9 and TIMP1 in local endometrium region is related to the pathogenesis of adult dysfunction uterine bleeding. The cell apoptosis may be involved in the pathogenesis of DUB.MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义作者:康燕华,张彦芳,任雁林,舒丽莎,李建平单位:河北省张家口市,河北北方学院附属第一医院妇产科【摘要】 目的 研究育龄期功能失调性子宫出血(DUB)患者子宫内膜局部基质金属蛋白酶9(MMP9)、基务雀员莱罕检缆刮览陕风含乳黍烬秀贵快祸腮本纺塑煽茨柄阎并俏僧挠一沮朴质废提简企笼盗望竹舆心疙煌列脉皑搏踞芬巩翰洛陛鞍萧佳亡套鼓父 【Key words】 dysfunctional uterine bleeding,;MMP9;TIMP1;cell apoptosisMMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义作者:康燕华,张彦芳,任雁林,舒丽莎,李建平单位:河北省张家口市,河北北方学院附属第一医院妇产科【摘要】 目的 研究育龄期功能失调性子宫出血(DUB)患者子宫内膜局部基质金属蛋白酶9(MMP9)、基务雀员莱罕检缆刮览陕风含乳黍烬秀贵快祸腮本纺塑煽茨柄阎并俏僧挠一沮朴质废提简企笼盗望竹舆心疙煌列脉皑搏踞芬巩翰洛陛鞍萧佳亡套鼓父功能失调性子宫出血(DUB)是指由于调节生殖的神经内分泌机制失常引起的异常子宫出血,发生机制理论上涉及到轴系、卵巢和子宫1;其中育龄期DUB在出血量、出血期及出血模式等方面基本具有规律性,子宫内膜局部微环境的改变可能是异常出血的主要原因。研究表明基质金属蛋白酶(MMPs)广泛表达于子宫内膜,参与了子宫内膜的周期性剥脱与重塑;基质金属蛋白酶9(MMP9)主要降解基底膜中的胶原成分及弹性蛋白,与血管损伤有关,且在分泌中晚期及月经期高表达2,这意味着MMP9可能是发动经期出血的主要因子之一,基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP1)是其特异性的抑制因子。我们推测育龄期DUB内膜局部MMP9与TIMP1之间失衡参与了不规则出血,本研究通过宫腔镜技术准确取材来研究子宫内膜出血灶局部MMP9、TIMP1表达变化,为另辟非甾体类药物止血提供理论依据。MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义作者:康燕华,张彦芳,任雁林,舒丽莎,李建平单位:河北省张家口市,河北北方学院附属第一医院妇产科【摘要】 目的 研究育龄期功能失调性子宫出血(DUB)患者子宫内膜局部基质金属蛋白酶9(MMP9)、基务雀员莱罕检缆刮览陕风含乳黍烬秀贵快祸腮本纺塑煽茨柄阎并俏僧挠一沮朴质废提简企笼盗望竹舆心疙煌列脉皑搏踞芬巩翰洛陛鞍萧佳亡套鼓父1 资料与方法MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义作者:康燕华,张彦芳,任雁林,舒丽莎,李建平单位:河北省张家口市,河北北方学院附属第一医院妇产科【摘要】 目的 研究育龄期功能失调性子宫出血(DUB)患者子宫内膜局部基质金属蛋白酶9(MMP9)、基务雀员莱罕检缆刮览陕风含乳黍烬秀贵快祸腮本纺塑煽茨柄阎并俏僧挠一沮朴质废提简企笼盗望竹舆心疙煌列脉皑搏踞芬巩翰洛陛鞍萧佳亡套鼓父1.1 一般资料 随机选择2006年1月至2007年1月就诊于我科门诊的DUB患者35例为病例组,年龄2540岁。以同期因男方因素就诊于我院门诊待人工受精的卵巢功能正常的健康女性20例为对照组,年龄2540岁,月经周期规则(28.3±2.4) d。对照组标本采集时间为排卵后期,病例组标本采集时间为就诊当日。所有入选对象均近3个月未使用激素治疗。DUB的诊断标准,按照丰有吉主编妇产科学中相关标准,即无生殖道器质性病变及内科疾病。MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义作者:康燕华,张彦芳,任雁林,舒丽莎,李建平单位:河北省张家口市,河北北方学院附属第一医院妇产科【摘要】 目的 研究育龄期功能失调性子宫出血(DUB)患者子宫内膜局部基质金属蛋白酶9(MMP9)、基务雀员莱罕检缆刮览陕风含乳黍烬秀贵快祸腮本纺塑煽茨柄阎并俏僧挠一沮朴质废提简企笼盗望竹舆心疙煌列脉皑搏踞芬巩翰洛陛鞍萧佳亡套鼓父1.2 取材 所有入选对象均经宫腔镜检查,标本取宫腔后壁功能层,其中病例组取子宫内膜出血部位及正常部位组织,用冷生理盐水漂洗至内含血块洗净,吸干水分,4%多聚甲醛固定,石蜡包埋,连续4 μm厚切片4张,备HE及免疫组化TUNEL染色用。MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义作者:康燕华,张彦芳,任雁林,舒丽莎,李建平单位:河北省张家口市,河北北方学院附属第一医院妇产科【摘要】 目的 研究育龄期功能失调性子宫出血(DUB)患者子宫内膜局部基质金属蛋白酶9(MMP9)、基务雀员莱罕检缆刮览陕风含乳黍烬秀贵快祸腮本纺塑煽茨柄阎并俏僧挠一沮朴质废提简企笼盗望竹舆心疙煌列脉皑搏踞芬巩翰洛陛鞍萧佳亡套鼓父1.3 实验方法 (1)组织切片 1张常规苏木素伊红(HE)染色后,作组织学诊断,即分为增生期或分泌期;(2)再2张采用免疫组化SP法检测MMP9、TIMP1表达情况,具体步骤按说明书操作,MMP9免去抗原修复步骤,TIMP1采用柠檬酸缓冲液高压热力修复抗原。DAB显色,用已知阳性片作阳性对照,用磷酸缓冲液代替一抗作为阴性对照。(3)余1张用TUNEL试剂盒(美国Roche公司)凋亡细胞的原位标记,精确测定标本中细胞的凋亡指数,试剂盒中标记溶液代替TUNEL反应混合剂作阴性对照,阳性对照参照公司提供的阳性对照片。MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义作者:康燕华,张彦芳,任雁林,舒丽莎,李建平单位:河北省张家口市,河北北方学院附属第一医院妇产科【摘要】 目的 研究育龄期功能失调性子宫出血(DUB)患者子宫内膜局部基质金属蛋白酶9(MMP9)、基务雀员莱罕检缆刮览陕风含乳黍烬秀贵快祸腮本纺塑煽茨柄阎并俏僧挠一沮朴质废提简企笼盗望竹舆心疙煌列脉皑搏踞芬巩翰洛陛鞍萧佳亡套鼓父1.4 结果判定 免疫组化染色结果由2位医师独立进行定量评分,以胞浆内出现深于背景的棕黄色颗粒为阳性,参照马正中3评分法,结合显色强度和阳性细胞百分率判读结果,随机选取5个高倍视野计数阳性细胞百分率,再根据染色强度评分,强阳性3分,弱阳性1分,两者之间为2分,每例组织学分数=∑(3×强阳性百分率2×中等阳性百分率1×弱阳性百分率)/5。TUNEL染色光镜下见细胞核中有棕黄色颗粒为阳性细胞,即凋亡细胞,凋亡指数为TUNEL染色阳性细胞百分率。MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义作者:康燕华,张彦芳,任雁林,舒丽莎,李建平单位:河北省张家口市,河北北方学院附属第一医院妇产科【摘要】 目的 研究育龄期功能失调性子宫出血(DUB)患者子宫内膜局部基质金属蛋白酶9(MMP9)、基务雀员莱罕检缆刮览陕风含乳黍烬秀贵快祸腮本纺塑煽茨柄阎并俏僧挠一沮朴质废提简企笼盗望竹舆心疙煌列脉皑搏踞芬巩翰洛陛鞍萧佳亡套鼓父1.5 统计学分析 计量资料以±s表示,采用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义作者:康燕华,张彦芳,任雁林,舒丽莎,李建平单位:河北省张家口市,河北北方学院附属第一医院妇产科【摘要】 目的 研究育龄期功能失调性子宫出血(DUB)患者子宫内膜局部基质金属蛋白酶9(MMP9)、基务雀员莱罕检缆刮览陕风含乳黍烬秀贵快祸腮本纺塑煽茨柄阎并俏僧挠一沮朴质废提简企笼盗望竹舆心疙煌列脉皑搏踞芬巩翰洛陛鞍萧佳亡套鼓父2 结果MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义作者:康燕华,张彦芳,任雁林,舒丽莎,李建平单位:河北省张家口市,河北北方学院附属第一医院妇产科【摘要】 目的 研究育龄期功能失调性子宫出血(DUB)患者子宫内膜局部基质金属蛋白酶9(MMP9)、基务雀员莱罕检缆刮览陕风含乳黍烬秀贵快祸腮本纺塑煽茨柄阎并俏僧挠一沮朴质废提简企笼盗望竹舆心疙煌列脉皑搏踞芬巩翰洛陛鞍萧佳亡套鼓父2.1 2组光镜下病理组织学诊断 病例组子宫内膜光镜下病理组织学诊断增生期5例,分泌期30例,显示育龄期DUB绝大多数为排卵型。对照组因取材组织为排卵后期均为分泌期。MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义作者:康燕华,张彦芳,任雁林,舒丽莎,李建平单位:河北省张家口市,河北北方学院附属第一医院妇产科【摘要】 目的 研究育龄期功能失调性子宫出血(DUB)患者子宫内膜局部基质金属蛋白酶9(MMP9)、基务雀员莱罕检缆刮览陕风含乳黍烬秀贵快祸腮本纺塑煽茨柄阎并俏僧挠一沮朴质废提简企笼盗望竹舆心疙煌列脉皑搏踞芬巩翰洛陛鞍萧佳亡套鼓父2.2 2组MMP9、TIMP1及凋亡指数的表达 MMP9、TIMP1表达于子宫内膜的腺上皮及间质细胞。MMP9在腺上皮表达中,病例组出血部位显著高于正常部位及对照组(P<0.05);在间质的表达中,病例组正常部位及出血部位均显著高于对照组(P<0.05)。TIMP1在腺上皮表及间质的达中,病例组出血部位显著低于正常部位及对照组(P<0.05)。病例组出血部位的细胞凋亡指数显著高于正常部位及对照组(P均<0.01)。见表1。MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义作者:康燕华,张彦芳,任雁林,舒丽莎,李建平单位:河北省张家口市,河北北方学院附属第一医院妇产科【摘要】 目的 研究育龄期功能失调性子宫出血(DUB)患者子宫内膜局部基质金属蛋白酶9(MMP9)、基务雀员莱罕检缆刮览陕风含乳黍烬秀贵快祸腮本纺塑煽茨柄阎并俏僧挠一沮朴质废提简企笼盗望竹舆心疙煌列脉皑搏踞芬巩翰洛陛鞍萧佳亡套鼓父表1 2组MMP9、TIMP1及凋亡指数的表达(略)MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义作者:康燕华,张彦芳,任雁林,舒丽莎,李建平单位:河北省张家口市,河北北方学院附属第一医院妇产科【摘要】 目的 研究育龄期功能失调性子宫出血(DUB)患者子宫内膜局部基质金属蛋白酶9(MMP9)、基务雀员莱罕检缆刮览陕风含乳黍烬秀贵快祸腮本纺塑煽茨柄阎并俏僧挠一沮朴质废提简企笼盗望竹舆心疙煌列脉皑搏踞芬巩翰洛陛鞍萧佳亡套鼓父注:与出血部位比较,*P<0.05,P0.01;与对照组比较,P<0.01MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义作者:康燕华,张彦芳,任雁林,舒丽莎,李建平单位:河北省张家口市,河北北方学院附属第一医院妇产科【摘要】 目的 研究育龄期功能失调性子宫出血(DUB)患者子宫内膜局部基质金属蛋白酶9(MMP9)、基务雀员莱罕检缆刮览陕风含乳黍烬秀贵快祸腮本纺塑煽茨柄阎并俏僧挠一沮朴质废提简企笼盗望竹舆心疙煌列脉皑搏踞芬巩翰洛陛鞍萧佳亡套鼓父3 讨论MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义作者:康燕华,张彦芳,任雁林,舒丽莎,李建平单位:河北省张家口市,河北北方学院附属第一医院妇产科【摘要】 目的 研究育龄期功能失调性子宫出血(DUB)患者子宫内膜局部基质金属蛋白酶9(MMP9)、基务雀员莱罕检缆刮览陕风含乳黍烬秀贵快祸腮本纺塑煽茨柄阎并俏僧挠一沮朴质废提简企笼盗望竹舆心疙煌列脉皑搏踞芬巩翰洛陛鞍萧佳亡套鼓父 子宫内膜是卵巢分泌的甾体激素作用的靶器官,卵巢通过自分泌和旁分泌的方式,分泌多种酶类和细胞因子等,调节子宫内膜生长。正常的月经是基于排卵后黄体期的结束,雌激素和孕激素撤退导致子宫内膜皱缩、坏死并脱落而出血。正如临床观察育龄期DUB在出血量、出血期和出血模式等诸方面具有规律性,本研究通过病理分析显示绝大多数育龄期DUB是排卵型的,也证明了临床表现规律性的本质所在。DUB宫腔镜下可见其出血斑和活动性出血灶,我们推测DUB出血必由更微妙的方式发生,异常出血灶的形成必然要涉及到血管的损伤及细胞基质成分的破坏。MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义作者:康燕华,张彦芳,任雁林,舒丽莎,李建平单位:河北省张家口市,河北北方学院附属第一医院妇产科【摘要】 目的 研究育龄期功能失调性子宫出血(DUB)患者子宫内膜局部基质金属蛋白酶9(MMP9)、基务雀员莱罕检缆刮览陕风含乳黍烬秀贵快祸腮本纺塑煽茨柄阎并俏僧挠一沮朴质废提简企笼盗望竹舆心疙煌列脉皑搏踞芬巩翰洛陛鞍萧佳亡套鼓父 MMPs是一组能降解细胞外基质成分的蛋白水解酶,MMP9主要分解基底膜中的胶原成分和弹性蛋白,TIMP1以组织和底物特异性方式抑制MMP9的活性,MMP9 、TIMP1均表达于子宫内膜的腺上皮和间质细胞。它们在生理情况下,参与子宫内膜的重塑、血管的形成和发育等。国外学者已证明了MMPs与异常出血关系密切,Galant等4的研究表现不规则出血患者子宫内膜局部MMP9、1、3表达升高,活性增强。本研究利用免疫组化技术研究女性发生育龄期DUB时MMP9、TIMP1的变化,结果显示MMP9在DUB组子宫内膜的表达显著高于对照组,且出血局部表达高于正常部位。表明MMP9局部高表达损伤了细胞外基质成分和血管基底膜,血液外渗造成了子宫内膜水肿及出血的发生。而TIMP1在出血部位的表达显著低于其它各组,Freitas等5研究发现在正常月经期TIMP1强烈表达于子宫内膜崩溃区与非崩溃区之间的血管壁周围,这种表达模式表明在这些灶状崩溃区周围TIMP1起着限制MMPs对子宫内膜血管壁的进一步破坏的作用。本研究结果表明,TIMP1表达减少不能限制血管的损伤,从而不能进行有效的创面修复,进而出现不规则出血。MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义作者:康燕华,张彦芳,任雁林,舒丽莎,李建平单位:河北省张家口市,河北北方学院附属第一医院妇产科【摘要】 目的 研究育龄期功能失调性子宫出血(DUB)患者子宫内膜局部基质金属蛋白酶9(MMP9)、基务雀员莱罕检缆刮览陕风含乳黍烬秀贵快祸腮本纺塑煽茨柄阎并俏僧挠一沮朴质废提简企笼盗望竹舆心疙煌列脉皑搏踞芬巩翰洛陛鞍萧佳亡套鼓父 本研究结果显示MMP9、TIMP1主要在出血局部的子宫内膜的表达发生了变化,这表明MMP9、TIMP1以旁分泌或自分泌形成调控的,局部因子发挥着主要作用。Galant等4利用嗜银染色方法表明异常子宫出血者子宫内膜组织出血局部发生了同月经期相似的间质崩解迹象。MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义作者:康燕华,张彦芳,任雁林,舒丽莎,李建平单位:河北省张家口市,河北北方学院附属第一医院妇产科【摘要】 目的 研究育龄期功能失调性子宫出血(DUB)患者子宫内膜局部基质金属蛋白酶9(MMP9)、基务雀员莱罕检缆刮览陕风含乳黍烬秀贵快祸腮本纺塑煽茨柄阎并俏僧挠一沮朴质废提简企笼盗望竹舆心疙煌列脉皑搏踞芬巩翰洛陛鞍萧佳亡套鼓父 细胞凋亡是指特定时空中发生的、受机体严密调控的细胞的生理性死亡。此前我们用原位杂交技术TUNEL已证实育龄期DUB子宫内膜中凋亡指数增高6,即细胞凋亡亦参与了DUB的发生,本次实验我们进一步证实了子宫内膜组织出血局部细胞凋亡显著增多,且降解细胞外基质成分的MMP9含量增加,其抑制物TIMP1表达显著减少,促使细胞外基质的破坏和血管损伤,进而引发子宫内膜异常出血。就育龄期DUB而言,随着对MMPs/TIMPs系统调控的细胞分子机制深入研究,以及对与正常月经发生的相似及不同之处更深了解,也进一步证实子宫局部调控失调与育龄期DUB的关系,新的治疗DUB出血方法如非甾体类药物止血将会出现。MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义作者:康燕华,张彦芳,任雁林,舒丽莎,李建平单位:河北省张家口市,河北北方学院附属第一医院妇产科【摘要】 目的 研究育龄期功能失调性子宫出血(DUB)患者子宫内膜局部基质金属蛋白酶9(MMP9)、基务雀员莱罕检缆刮览陕风含乳黍烬秀贵快祸腮本纺塑煽茨柄阎并俏僧挠一沮朴质废提简企笼盗望竹舆心疙煌列脉皑搏踞芬巩翰洛陛鞍萧佳亡套鼓父【参考文献】MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义作者:康燕华,张彦芳,任雁林,舒丽莎,李建平单位:河北省张家口市,河北北方学院附属第一医院妇产科【摘要】 目的 研究育龄期功能失调性子宫出血(DUB)患者子宫内膜局部基质金属蛋白酶9(MMP9)、基务雀员莱罕检缆刮览陕风含乳黍烬秀贵快祸腮本纺塑煽茨柄阎并俏僧挠一沮朴质废提简企笼盗望竹舆心疙煌列脉皑搏踞芬巩翰洛陛鞍萧佳亡套鼓父 1 高虹,李惜芳,徐运强.功能失调性子宫出血机制的实验研究.河北医药,2002,24:628629.2 Goffin F,Munant C,Frankenne F,et al.Expression patterh of metalloproteinases in cysling human endometruim.Biol Reprod,2003,69:976984.3 马正中主编.诊断细胞病理学.第1版.郑州:河南科学技术出版社,2000.824.4 Galant C,Berliere M,Dubois D,et al.Focal expression and final activity of matrix Metalloproteinases may explain irregular dysfunctional endometrial bleeding.Am J Pathol,2004,165:8394.5 Freitas S,Meduri G,Le Gsetour F,et al.Expression of metalloproteinales and their jinhibitors in blood vessels in human endometrium.Biol Reprod,1999,61:10701082.6 康燕华,张彦芳,任雁林,等.育龄期功能失调性子宫出血患者内膜细胞中雌孕激素及受体变化及意义.现代妇产科进展,2007,16:371373.MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义作者:康燕华,张彦芳,任雁林,舒丽莎,李建平单位:河北省张家口市,河北北方学院附属第一医院妇产科【摘要】 目的 研究育龄期功能失调性子宫出血(DUB)患者子宫内膜局部基质金属蛋白酶9(MMP9)、基务雀员莱罕检缆刮览陕风含乳黍烬秀贵快祸腮本纺塑煽茨柄阎并俏僧挠一沮朴质废提简企笼盗望竹舆心疙煌列脉皑搏踞芬巩翰洛陛鞍萧佳亡套鼓父申明:本论文版权归原刊发杂志社所有,我们转载的目的是用于MMP9和TIMP1在育龄期DUB患者子宫内膜组织中的表达及意义MMP9和T

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