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课题2月季的花药培养 1 被子植物定义 凡是种子有果皮包被着 胚珠有子房壁包被着的植物 就叫做被子植物 被子植物和裸子植物 2 裸子植物定义 凡是胚珠裸露 外面没有子房壁包被 种子外面没有果皮包被的植物称为裸子植物 实例 哈密瓜 杏 桃子 实例 松 紫衫 铁树 被子植物 哈密瓜 桃子 裸子植物 月季 被子植物 花丝 花药 一 被子植物的花粉发育 雄蕊 被子植物的花粉发育 花丝 支撑着花药的结构 花药 囊状结构 内有很多花粉粒 花粉是花粉母细胞经过减数分裂而形成的 因此 花粉是单倍体的生殖细胞 花粉的发育要经历 小孢子四分体时期 单核期 居中 靠边 双核期 雄蕊 花粉粒 小孢子四分体时期 单核居中期 单核靠边期 双核期 小孢子母细胞 1花粉母细胞 4个小孢子 减数分裂 有丝分裂 4个营养细胞核 4个生殖细胞核 有丝分裂 8个精子 4个花粉粒 二 产生花粉植株的两种途径 移栽 花药中的花粉 胚状体 脱分化 愈伤组织 花药中的花粉 脱分化 分化 丛芽 再分化 丛芽 诱导 生根 取决于 培养基中激素种类及其浓度配比 二倍体 单倍体 愈伤组织 在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞 细胞排列疏松 无规则 体细胞胚 在组织培养过程中 某些体细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构 发育过程亦与合子胚类似 被称为体细胞胚 花粉胚 最后发育成单倍体植株 胚状体 植物类型 不同种植物诱导成功率不同 生理状态 花期早期的花药反应能力较好 花粉发育时期 单核靠边期 三 影响花药培养的因素 其他因素 完全未开放的月季花蕾 选 略微开放的月季花蕾 为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难 花瓣松动后 微生物就可能侵入到花药 给材料的消毒带来困难 四 实验操作 一 材料的选取 焙花青 铬矾法蓝黑色 最常用 醋酸洋红法红色 1 方法 醋酸洋红的配置 2 醋酸洋红法 染色操作 3 焙花青 铬钒法 卡诺氏固定液的配制方法 焙花青 铬钒溶液的配制方法 染色操作 二 材料的消毒 1 酒精处理 酒精 70 的酒精浸泡 30秒 无菌水清洗 无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分 2 消毒液处理 放入质量分数为0 1 的氯化汞溶液中2 4分钟 也可质量分数为1 的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液 无菌水冲洗3 5次 三 接种和培养 要彻底去除花丝 1 剥取花药 无菌条件 勿损伤花药 注意 每瓶接种花药7 10个 2 接种 培养条件 温度 25 左右 不需要光照 3 培养 培养 注意 必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开 主要原因 营养核和生殖核融合 4 鉴定和筛选 选材是否恰当选材是否成功是花药培养成功的关键 应学会通过显微镜观察处于适宜发育期的花粉 五 课题成果评价 无菌技术是否过关如果出现了污染现象 说明某些操作步骤 如培养基灭菌 花蕾消毒或接种等有问题 接种是否成功如果接种的花药长出愈伤组织或释放出胚状体
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