高中生物 专题2 课题1 微生物的实验室培养同步辅导与检测课件 新人教版选修1.ppt

课题1微生物的实验室培养 微生物的培养与应用 手提式灭菌锅结构示意图 高压蒸汽灭菌法是微生物学研究和教学中应用最广 效果最好的湿热灭菌方法 多数细菌和真菌的营养细胞在60 左右处理15min后即可被杀死 酵母菌和真菌的孢子更加耐热 需在80 以上处理才能被杀死 而细菌的芽孢更耐热 一般要121 处理15min以上才能被杀死 高压蒸汽灭菌是在密闭的高压蒸汽灭菌器 锅 中进行的 知识清单 培养基 1 概念 人们按照微生物对 的不同需求 配制出供其 的营养基质 2 种类 按照培养基的 划分为 培养基和 培养基 3 营养要素 各种培养基一般都含有水 此外还要满足微生物生长对 以及 的要求 1 营养物质生长繁殖2 物理状态液体固体3 碳源氮源无机盐ph特殊营养物质氧气 尝试应用 1 自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别在于 a 碳源b 氮源c 无机盐d 生长因子 解析 自养型微生物主要包括进行光合作用或进行化能合成作用的微生物 他们能够利用co2来合成自身所需的有机物 而异养型微生物主要是直接利用外界的有机物来合成自生所需的有机物 所以他们培养基的主要差别就在于自养型微生物主要是利用无机物中的碳 而异养型微生物主要是利用有机物中的碳 答案 a 2 关于微生物的营养 说法正确的是 a 同一种物质不可能既作碳源又作氮源b 凡是碳源都能提供能量c 除水以外的无机物仅提供无机盐d 无机氮源也可能提供能量解析 此题考查我们对微生物的营养和能源的理解 对一些微生物来说 含c h o n的化合物既是碳源 又是氮源 co2是光能自养细菌的碳源 但不能提供能量 co2和n2是无机物 也是微生物的碳源和氮源 硝化细菌所利用的氮源是无机氮源氨 同时氨也为硝化细菌提供用以化能合成作用的能源 答案 d 知识清单 无菌技术 1 获得纯净培养物的关键是防止 的入侵 具体操作如下 1 对实验操作的 操作者的衣着和手进行 和 2 将用于微生物培养的 和 等器具进行灭菌 3 为避免周围环境中 的污染 实验操作应在 进行 4 实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 相接触 1 外来杂菌 1 空间清洁消毒 2 器皿接种用具培养基 3 微生物酒精灯火焰附近 4 周围的物品 2 消毒和灭菌 1 消毒是指使用较为 的物理或化学方法仅杀死物体表面或 对人体有害的微生物 不包括芽孢和孢子 常用的方法有 消毒法和 消毒法 2 灭菌是指使用 的理化因素杀死物体内外 的微生物 包括芽孢和孢子 常见的方法有 灭菌 灭菌 灭菌 2 1 温和内部一部分煮沸化学药剂 2 强烈所有灼烧干热高压蒸汽 尝试应用 1 微生物的培养中 要严格消毒 灭菌 对实验操作者采取的措施一般为 a 紫外线消毒b 化学消毒c 化学灭菌d 干热灭菌 b 2 无菌技术包括以下几个方面的叙述 其中错误的是 a 对实验操作的空间 操作者的衣着和手进行灭菌b 将用于微生物培养的器皿 接种用具和培养基等进行灭菌c 为避免周围环境中微生物的污染 实验操作应在酒精灯火焰附近进行d 实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触 解析 在实验室无菌操作中 对实验操作空间 操作者的衣着和手 进行清洁和消毒 将用于微生物培养的器皿 接种用具和培养基等进行灭菌 答案 a 知识清单 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 步骤 计算 称量 溶化 倒平板 灭菌 尝试应用 1 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是 a 计算 称量 倒平板 溶化 灭菌b 计算 称量 溶化 倒平板 灭菌c 计算 称量 溶化 灭菌 倒平板d 计算 称量 灭菌 溶化 倒平板 c 2 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基含牛肉膏 蛋白胨 nacl 琼脂的量分别为 a 5 0g10 0g5 0g30 0gb 10 0g5 0g5 0g20 0gc 5 0g10 0g10 0g20 0gd 5 0g10 0g5 0g20 0g d 知识清单 纯化大肠杆菌 方法 微生物接种最常用的是 和 法 1 平板划线法 通过 在琼脂固体培养基表面连续 的操作 将聚集的菌种逐步 分散到培养基的表面 2 稀释涂布平板法 将菌液进行一系列的梯度 然后将不同稀释度的菌液分别 到琼脂固体培养基表面 进行培养 平板划线法稀释涂布平板1 接种环划线稀释2 稀释涂布 尝试应用 1 下列有关平板划线接种法的操作错误的是 a 将接种环放在火焰上灼烧b 将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环液c 蘸取菌液和划线要在火焰旁进行d 划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连 d 2 涂布平板操作需要用到 a 接种环 滴管 酒精灯b 接种环 移液管 酒精灯c 涂布器 移液管 酒精灯d 涂布器 接种环 酒精灯 c 菌种的保藏 知识清单1 临时保藏法 适用于 使用的菌种 2 甘油管藏法 适用于需要 保存的菌种 1 频繁2 长期 1 菌种保藏应该控制的条件是 湿度 低温 干燥 有光 隔绝空气 适当有氧 a b c d 尝试应用 解析 考虑不同类型微生物的保藏条件时 一定要从该微生物的代谢入手考虑 其保藏条件应该是不利于代谢且不影响生存的 微生物具有相对易变异性 在保藏菌种的过程中 必须使微生物的代谢处于最不活跃状态 这样才能在一定时间内使其不发生变异而又保持生活力 答案 d 2 下列有关菌种保藏的叙述错误的是 a 对于频繁使用的菌种可采用临时保藏法b 对于长期保存的菌种可采用甘油管藏的方法c 临时保藏的菌种易被污染或产生变异d 甘油管藏时要将甘油瓶放入4 的冰箱中保藏 解析 对于需要长期保存的菌种 可采用甘油管藏法 即在3ml甘油瓶中加入1ml甘油后灭菌 将1ml培养的菌液转移到甘油瓶中 与甘油充分混匀后 放在 20 的冷冻箱中保存 答案 d 一 常见的消毒灭菌方法归纳 二 微生物培养中要注意的几个问题1 配制培养基根据所培养微生物的营养及功能特点 选择合适的培养基配方进行配制 2 无菌技术 1 实验者 实验室 操作空间 实验器材 培养基等必须严格消毒灭菌 2 整个实验操作过程要严格无菌操作 在酒精灯火焰附近进行 3 操作过程实验者不要讲话 不要吃东西 4 实验结束后接触微生物的实验器材及培养基要灭菌后处理 3 设置对照为排除实验中各种因素的干扰 保证实验结果的可靠性 要设置对照实验 对照实验要遵循单一变量原则 4 做好标记若实验中使用的平板较多 为避免混淆 最好在使用前做好标记 注明培养基种类 培养日期 培养人及样品稀释度等 三 大肠杆菌的纯化培养实验结果分析大肠杆菌的纯化培养分为制备培养基和纯化大肠杆菌两个阶段 实验分为实验组 接种大肠杆菌的培养基 和对照组 未接种大肠杆菌的培养基 整个实验过程一定要严格消毒灭菌 否则就无法得到纯化的大肠杆菌 导致实验失败 下面是可能出现的实验结果及相应的原因分析 1 对照组未长出菌落 实验组长出颜色 形状 大小基本一致的菌落 说明培养基灭菌彻底 接种操作及培养时符合要求 2 对照组未长出菌落 实验组上出现了其他菌落 说明培养基灭菌彻底 培养时符合要求 但接种操作未达到要求 3 对照组长出菌落 说明培养基灭菌不彻底 培养基及牛肉膏蛋白胨固体培养基的制备 下列关于配制培养基的有关叙述中 正确的是 a 制作固体培养基必须加入琼脂b 发酵工程中一般用液体培养基c 氮源主要是为微生物提供能量d 牛肉膏主要为微生物提供氮元素 解析 本题考查微生物营养的有关知识 制作固体培养时必须加入凝固剂 琼脂是常用的凝固剂 但不是唯一的凝固剂 例如明胶也可作为凝固剂 发酵工程一般都是用液体培养基 原因是液体培养基便于调节ph 温度 溶氧等 而且液体培养基还能有利于微生物充分利用营养物质 氮源主要是作为微生物合成蛋白质和核酸的原料 牛肉膏主要为微生物提供碳源 磷酸盐和维生素 答案 b名师点睛 由于不同的微生物生长对ph的需求不同 如培养霉菌时需将培养基调至酸性 培养细菌时需将培养基调至中性或微碱性 所以在培养基各组分溶化后需要先用酸或碱将ph调至微生物生长的最适宜条件 再进行灭菌处理 变式训练 1 下列制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述 错误的是 a 操作顺序为计算 称量 溶化 倒平板 灭菌b 将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯c 将培养基冷却至50 左右时进行倒平板d 将平板冷却凝固约5 10min后将平板倒过来放置解析 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算 称量 溶化 灭菌 倒平板 顺序不能颠倒 牛肉膏容易吸潮 所以当牛肉膏溶化并与称量纸分离后 用玻棒取出称量纸 将培养基冷却至50 用手触摸锥形瓶感觉刚刚不烫手时倒平板 平板冷却后还需倒置 答案 a 微生物培养中的无菌操作技术 细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽 酒精 火焰灼烧等几种不同的处理 这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌 a 接种针 手 培养基b 高压锅 手 接种针c 培养基 手 接种针d 接种针 手 高压锅 解析 此题考查学生对无菌技术的掌握 高压蒸汽灭菌锅是灭菌的一个设备 通常用于培养基的灭菌 用酒精擦拭双手是消毒的一种方法 火焰灼烧 可以迅速彻底地灭菌 适用于微生物的接种工具 如接种环 答案 c名师点睛 微生物培养过程中的无菌操作包括消毒和灭菌两大类 分别又有各种不同的方法 对实验操作的空间 操作者的衣着和手进行清洁和消毒 将用于微生物培养的器皿 接种用具和培养基等器具进行灭菌 变式训练 2 下列操作与消毒和灭菌无关的是 a 接种前用火焰灼烧接种环b 接种前用酒精擦拭双手c 将平板倒置 放入培养箱中培养d 接种在酒精灯的火焰旁完成解析 要建立 有菌观念 接种用具 器皿 空气中都充满了微生物 都有污染的可能 必须严格地消毒 灭菌 a b d都是实验操作过程中常用的消毒和灭菌方法 将平板倒置 放入培养箱中培养与消毒 灭菌无关 答案 c 水平测试1 产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培养基分别是 a 一个细菌 液体培养基b 许多细菌 液体培养基c 一个细菌 固体培养基d 许多细菌 固体培养基 c 解析 在液体培养基中生活的细菌 无论是一个还是许多 肉眼都是不可见的 在固体培养基上的细菌 当数目较少时也是不可见的 当固体培养基上有许多细菌并且集中在较小范围时 肉眼才可见 菌落就是这样的情况 菌落是一个或少数几个细菌的子细胞群体 形成于固体培养基上 有一定的形态结构 肉眼可见 菌落的形态结构与细菌的种类有关 因而菌落常常作为菌种鉴别的重要依据 依据教材叙述 菌落可由一个细菌形成 也可由少数几个细菌形成 形成的菌落 有一定的形态结构