马耳他布鲁菌引起感染性脊柱炎1例报道.doc

马耳他布鲁菌引起感染性脊柱炎1例报道 .282.检验医学2019年3月第34卷第3期Laboratory Medicine,March2019,Vo l.34,NO.3:1673-8640 (2019)03-0282-03:R446.1文献标志码:A DOI:10.3969/j.i ssn.1673-8640.2019.3.022马耳他布鲁菌引起感染性脊柱炎1例报道刘耀婷，胡海清，陈险峰，侯珊珊，翁志骏，周庭银，周琳(上海长征医院实验诊断科，上海200003)关键词:马耳他布鲁菌;脊柱炎;感染布鲁菌病又称波状热，是一种由布鲁菌引起的、世界范围分布的人畜共患疾病。 布鲁菌根据感染的宿主、生化特征和抗原成分分为10个种，其中能感染人类的主要是马耳他布鲁菌(羊布鲁菌)、流产布鲁菌(牛布鲁菌)、猪布鲁菌和犬布鲁菌1.2J。 布鲁菌是革兰阴性球杆状细菌，无鞭毛，不形成芽子包或英膜，寄生在单核吞噬细胞内1.3J。 人类主要由于皮肤破损、进食未消毒的奶制品以及牛羊肉等感染布鲁菌，也有散发病例报道实验室气溶胶吸人感染者4.6J。 布鲁菌可引起机体多器官、多系统损伤，临床上以长期发热、关节疼痛及淋巴结肿大为特点。 当临床表现典型时，结合明确的流行病史，诊断较容易。 我们近期从1例非疫区不明原因发热患者腰部手术感染服腔穿刺液中分离出马耳他布鲁菌，现报道如下。 1病历资料男，53岁，江苏淮安人，公司职员。 因反复发热3月余，腰部、左髓疼痛伴左下肢放射痛1月余外院行腰椎磁共振检查示腰椎退变、L4-5及L5-S1椎间盘突出伴椎管狭窄、L5和S1椎体终板炎，xx年7月18日以腰椎间盘突出，发热待查收住院，7月22日行腰椎后路减压植骨融合内固定术+椎间隙组织活检术，术中探查L5/S1椎间隙灰白色炎性组织。 组织送病理切片示:骨小梁间纤维增生，浆细胞、淋巴细胞浸润伴肉芽组织形成。 术后给予激素、神经营养、补液等对症治疗，好转出院。 xx年8月初患者反复发热，最高达39.0OC，在当地医院行抗菌药物治疗后高热不退，于xx年9月初因发热原因待查人住上海长征医院感染科，行头子包他昵3g qdiv抗感染治疗，体温恢复正常出院。 xx年10月23日患者再次发热，最高达40C，至当地医院行头抱他院抗感染治疗，体温未降，于xx年11月2日再次至上海长征医院就诊，查体时患者腰部手术区皮肤红肿热痛，触之有波动感，人院血细胞检查显示:C反应蛋白、红细胞沉降率升高。 腰后部出现服腔井有窦道形成，B超引导下穿刺取分泌物送疾病学检测(图1)，同时送检血培养。 患者主诉在当地生活，未去过疫区，也未直接接触过羊群，但过年期间朋友从邮寄过l包羊肉制品。 结合病人症状及体征，诊断为手术区域感染，发热原因待查。 2实验室检查血细胞分析(xx年11月2日)自细胞计数7.3x109/L、中性粒细胞比例69.8%、淋巴细胞比例24.2%、C反应蛋白157mg/L、红细胞沉降率68mm/h、降钙素原0.09ng/mL;有反应性，空白对照 (0)、 (29)、 (1);凝血功能、血清生化、肿瘤指标、自身免疫抗体、免疫蛋白、内毒素、葡聚糖未见明显异常。 无菌采集静脉血4mL，待样本自然析出血清，送上海市疾病预防控制中心进行布鲁菌血清凝集试验，检测结果为布鲁菌抗体阳性，抗体效价1:400。 3细菌培养及鉴定在B超引导下，穿刺出红色液体至无菌试管。 穿刺液样本在生物安全柜内被分别接种于哥伦比亚血琼脂平板和麦康凯琼脂平板(上海科玛嘉有限公司)，置35c CO2培养箱内培养，同时取穿刺液样本行革兰染色镜检。 作者简介:Xi J耀婷，女，1983年生，硕士，技师，主要从事感染性疾病研究。 万方数据检验医学2019年3月第34卷第3岁j Laborat oryMed icin e,Ma rch2019,Vo l.34,No.3.283.将培养形成的单个纯菌落制备成0.5-0.6麦氏单位的菌悬液，采用法国生物梅里埃公司VITEK2Co mpac t全向动微生物分析系统及配套GN鉴定卡进行鉴定。 同时挑取纯菌落穿刺接科l于尿素管内，置35oC CO2恒温培养箱内培养。 培养48h无细菌生辰，延长培养至72h，血平板上形成2种形态的菌落:内色勃液样菌落和内色较小菌落，有光泽。 2种形态的纯菌落革兰染色镜检结果均为:革兰阴性，多态性，短杆状和长杆状。 继续培养至5d，内色黠液样菌落和内色较小菌落在血平板上形成向色、光滑、颗粒状菌落，菌落涂片行革兰染色镜检，示革兰阴性短小球杆菌。 初步生化反应:氧化酶阳性、触酶阳性、尿素5min呈阳性(图2)0VI TEK2Co mpac tG N卡鉴定结果(a)(b)(c)(d)注(a)术后局部皮肤红肿热痛，触之有波动感(b)B超引导下穿草I JIH红色液体(c)、(d)术后皮下见不规则囊性水样信号彤，增强扫描边缘明白强化(红色标注处)图1腰部皮下陈腔为马耳他布鲁菌，生物编码为100001300001001，鉴定值为99%。 4诊断及治疗根据微生物鉴定及血清学凝集试验结果，结合患者体征、症状及影像学检查结果，经骨科、感染科、检验科联合诊断为由马耳他布鲁菌引起的脊柱炎。 给予患者口服多西环素200m g/次，b id+利福平600-900m g/次，俐，共(a)(b),.(c)(d)注(a)取养3dl(IL平板上菌落形态(b)培养5dJ(lL平饭上面lf在形态(c)珩养?i榕在接涂片.y f乓染色，油镜下细的形态(d)菌落直接尿A实验(阳性)图2血平极菌落形态12周。 经过抗布鲁菌治疗，感染症状好转，血液学感染指标恢复到正常范围。 5讨论布鲁菌性脊柱炎是布鲁杆菌侵袭脊椎、椎间隙和/或椎旁组织而引起的感染，发病部位以腰椎多见，胸椎次之。 目前，布鲁菌性脊柱炎尚无统一的诊断标准，主要依靠流行病史、l临床表现、实验室检查、影像学检查以及局部组织活检等确诊。 流行病学调查显示布鲁菌感染率有较大差异，与人口流动性增加、畜牧业的壮大、居民消费水平等因素有关(7飞本例患者近期未去过疫区，也无感染动物接触史，追问病史，朋友寄来过l包羊肉，推测患者感染原因可能是食源性感染。 该患者主要表现为波状热，初次以!l要椎间盘突巾人住骨科，血液学检测显示C反应蛋白和红细胞沉降率升高腰椎间盘突出一元论可以解释腰背疼痛以及C反应蛋向和红细胞沉降率指标的异常，但影像学检查结果提示有炎性病变，病理切片显示组织有淋巴细胞、浆细胞等炎症因子浸润伴肉芽组织生成，结合患者反复发热、术后l个月、切口皮下感染、皮下感染区服腔和窦道形成、抗菌药物治疗效果不佳，推测可能有病原菌的存在，手术打破了局部屏障，使得细菌侵袭到皮下形成万方数据.284.检验医学2019年3月第34卷第3期Laborary Medicine,March2019,Vo l.34,NO.3服腔和窦道。 目前，实验室诊断布鲁菌病的金标准是布鲁菌血清凝集实验1:160或者血培养阳性。 但布鲁菌血液分离培养阳性率只有50%70%10,一是布鲁菌培养要求较高，二是采血时机难把握。 欧洲肝脏研究学会建议采血时间为高热前0.5h或热退后1hl l。 本例患者血培养多次送检结果均为阴性，建议临床多次送检服肿穿刺液，同时延长培养时间至72h，血平板上观察到白色站液样物质，类似于站液性组织，没有明显的菌落形态O革兰染色见长短不一阴性杆菌，抗酸和弱抗酸染色阴性，排除分枝杆菌属。 菌落氧化酶阳性，快速腮酶实验阳性，VITEK2Compact GN卡鉴定结果为马耳他布鲁菌(99%)。 再次取原始样本穿刺液做革兰染色和瑞氏染色，革兰染色镜下细菌形态不明显，瑞氏染色镜下见细沙样菌落。 本病例提示:应重视患者的病史采集及体格检查。 临床上因腰痛就诊并伴有发热、大汗者，影像学提示腰椎间盘突出及一元论无法解释整个病情的进展时，应考虑感染性疾病。 临床更应重视病原学检查，反复送检可疑样本同时进行血清凝集实验;实验室在处理可疑样本时应延长培养时间(48h)，对平板生长的菌落结合多种染色方法来提高病原学诊断符合率。 参考文献1FICHT T.Brucella taxonomyand evolutionJ.Future Microbiol,xx,5 (6):859-866.2CORBELL MJ.Brucellosis:epidemiology andprevalence worldwideJ.Boca Raton:CRC Press,1989:25-403GAO G,WANG Y,CHEN Z,et al.Brucella virulencemechanisms andimplications innovel vainesand drugsJCrit RevEukaryot GeneExpr,xx,23 (1)49-644MACHELART A,POTEMBERG G,VAN MAELEL,et al.Allergic asthmafavors Brucellagrowth inthe lungsof infectedmiceJ.Front Immunol,2018,9:18565YIN XH,LIU ZK,HE BR,et al.One-stage surgicalmanagement forlumber brucellaspondylitis withanterior debridement,autogenous gra伐，and instrumentationJ.Medicine(Baltimore),2018,97 (30)e11704.6GAROFOLOG,FASANELLAA,DIGIANNATALEE,et al.Cases ofhurnan brucellosisin Swedenlinked toMiddle EastandA仕icaJ.BMC ResNotes,xx,9:2777MCELWAIN TF,THUMBI SM.Animal pathogensand theirimpact onanimal health,the economy,food security,food safetyand publichealthJ.Rev SciTech,xx,36 (2):423-433.8马淑青，袁晓明.4例布鲁菌感染病例分析J检验医学，2018,33 (2):188-1909MANI SS R,GUNASEKARAN K,IYYADURAI R,et al.Clinical spectrum,susceptibility profile,treatment andoute ofcu1ture-con自rmed brucelosis fromSouth IndiaJ.Indian JMed Microbiol,2018,36 (2)289-292.10SONG KJ,YOON SJ,LEE KB.Cervical spinalbrucellosis withepidural abscess