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文档简介
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b.离心机 c.恒温水浴锅 d.具塞刻度管 e.容量瓶烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄(3).试剂:a.标准麦芽糖溶液(1mg/ml);精确称取100mg麦芽糖,用蒸馏水溶解,定容至100ml。烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄b.3,5-二硝基水杨酸(10mg/ml);精确称取1g3,5-二硝基水杨酸,溶于20ml12mol/L的HONa溶液中,加入50ml蒸馏水,再加30g酒石酸钾钠,待其溶解后用蒸馏水定容至100ml。烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄c.1氯化钠溶液,称取5g氯化钠于500ml容量瓶中定容。烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄 d1淀粉溶液;称取1g淀粉溶于100ml0.1ml/L的柠檬酸钠溶液中。烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄实验步骤烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄(1).仪器药品的准备与配置;按实验需求,将所有实验中用到的器材(大型实验设备应进行检查,做好使用前准备工作)试剂准备好烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄a.器材包括称量用到的分析天平以及电子天平,溶解用到的容量瓶(100ml;1000ml2),烧杯(包括100ml5和500ml1),玻璃棒,量筒等,以及实验用的数支具塞刻度试管,将上述仪器洗净并用蒸馏水浣洗,同时检查分光光度计,离心机,恒温水浴锅等设备烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄b按照要求将所需求的试剂按步骤配制好,贴好标签,待用烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄c冷冻样品提前做好解冻工作烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄(2)标准曲线的制作;取10支具塞刻度试管,分别编号,以1号为空白对照分别按下表加入相应试剂烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄编号试剂123456789标准麦芽糖溶液(ml)0 2468101214163,5-二硝基水杨酸溶液(ml)222222222定容至20m1l00水浴锅反应5min 之后取出用流水冷却,以1号试管为空白调零点,在540nm波长下比色测定210号试管的OD540值,以麦芽糖含量(浓度)为横坐标,各浓度下的OD值为纵坐标,用坐标纸绘制标准曲线,求出回归方程。烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄(3)酶溶液的提取;将样品分别编号,按以下步骤分别操作烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄a称取2g样品于研钵中,加入少许石英砂和2ml氯化钠溶液,研磨成匀浆;烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄b.将匀浆转入离心管中,并用6ml氯化钠溶液分次洗涤研钵,将残渣一并洗入离心管内,于室温下放置1520min,没隔数分钟搅动一次,使其充分提取烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄c然后待全部样品按上述步骤完成后,一次性转入离心机内,以3000r/min的转速离心10min,将上清液到入100ml容量瓶中,定容,摇匀,贴上相对应于样品的编号,即为淀粉酶原液,依据实际情况做好保存工作,防止酶活性退化或酶失活烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄(4)样品淀粉酶活力的测定;对于每个样品进行一下操作烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄取两支具塞刻度试管,编号为1和2,按下表加入以下试剂烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄 试管编号试剂12样品酶原液(ml)20100水浴锅中煮10min样品酶原液(ml)021淀粉溶液(ml)2237水浴锅中反应10min3,5-二硝基水杨酸溶液(ml)22100水浴锅反应5min用蒸馏水定容至20ml,适当稀释后于540nm波长下测定OD值,以1号试管为空白调零分别对每个样品按上述(4)步骤进行检测,记录相关数据并计算结果,将数据汇总后做成表格,烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄 其中样品淀粉酶活力=CVT/(WVsT)(mg/g/min)。式中,C为从标准曲线上查得的麦芽糖含量(mg);VT为淀粉酶原液总体积(ml);Vs为反应所用淀粉酶原液体积(ml);W为样品重量(g);t为反应时间(min)。烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄 对实验结果做出相应的分析和评价。烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄样品编号OD值A=520.00 nm还原糖含量(mg/ml)酶活力(mg/g/min)WB-080.142 0.742 2.373 WB-110.170 0.919 2.941 WB-150.146 0.767 2.454 WB-190.243 1.381 4.420 WB-120.144 0.754 2.414 WB-180.214 1.198 3.832 WB-090.119 0.596 1.907 WB-13(1)0.280 1.616 5.170 WB-160.155 0.824 2.637 WB-170.147 0.773 2.474 WB-13(2)0.202 1.122 3.589 WB-200.257 1.470 4.704 WB-210.292 1.692 5.413 WB-100.154 0.818 2.616 烟草中多酚氧化酶活性的测定烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄原理:多酚氧化酶在有氧条件下会将酚氧化为醌,醌在525nm波长下有较强的吸光值,通过测定525mn下的吸光值变化可测得多酚氧化酶烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄材料,仪器,试剂烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄(1)材料:烟草叶片组织烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄(2)仪器:分光光度计 离心机 匀浆机 试管 吸量管烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄(3)试剂: a. 0.05mol/L PH=5.5的磷酸缓冲溶液烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄 b. 0.1mol/L的儿茶酚溶液烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄 c. 质量分数为20的三氯乙酸烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄 d. 不溶性聚乙烯吡咯烷酮(PVP)烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄 e. 质量分数为30的硫酸铵烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄f.0.1mol/L ph=6.5的磷酸缓冲溶液烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄g.0.01 mol/L ph=6.5的磷酸缓冲溶液烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄实验步骤烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄(1) 实验设备和用品的准备;备齐实验所需器皿,洗净并用蒸馏水浣洗,检查所用设备,做好使用准备工作,备齐实验所用试剂,按要求放置妥当。 烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄(2) 酶液的提取;将所有实验材料进行分组编号,每组样品取2g,置于大研钵中,用 5ml磷酸缓冲溶液,研磨均匀,并用5ml缓冲液洗涤研钵,转入15ml离心管,4000r/min离心5min,取上清液加5ml质量分数为30 的硫酸铵,以4000r/min的速度离心15min,去沉淀,上清液转入40ml离心管再加质量分数为30的硫酸铵10ml, 4000r/min离心15min,收集沉淀,将所得沉淀溶于1ml0.01mol/Lph=6.5的磷酸缓冲溶液中,粗制成酶溶液,将所制酶溶液放于4冰箱中保存,直至所有样品酶制剂都做完成。烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄(3) 酶活性的测定;对于每一组酶制剂,分别做以下操作烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄 试管编号试剂一号试管(设3次重复)二号试管磷酸缓冲液(ml)3.93.9儿茶酚(ml)1137水浴10min100水浴10min粗制酶制剂(ml)0.10.137水浴10min100水浴10min将两支试管迅速放入冰水浴中,立即加入2ml的20三氯乙酸,以5000r/min的转速离心10min,收集上清液,并适当稀释,于525nm波长下测定其吸光值。烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄按上述步骤测定每一组样品,记录OD值烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄(4) 酶活性的计算;以每分钟内OD525值变化0.01为一个酶活力单位计算,有下列公式烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄酶活性=AD/(0.01T)烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄酶的比活力=AD/(0.01TW)烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄式中:A反应时间内吸光值的变化;烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄 W样品鲜重(g);烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原理:根据淀粉酶水解淀粉产生的一系列还原性糖类可将3,5-二硝基水杨酸还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸,通过溶液颜色的深浅可反映出还原性糖类的浓度,也就可以间接反映出淀粉酶的活性,因此,可以用酱峰挺憨桨百倦何悯仆绷捂噪清渡兵妄嘉醋呢雏备柑盂乞谚盐窿了喧靡征穿遗瞄诀奎卡家奶喳方腔垂啪编沃粗爆惮认店镊狂绰琐樟毖桔硷字也歪俄 T反应时间(min);烟草淀粉酶活性与多酚氧化酶活性测定实验方案烟草中淀粉酶活性与多酚氧化酶活性的测定淀粉酶活性的测定原
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