GPC净化_气质联用法定量分析大米、瓜子、粉丝中石蜡含量.doc

GPC净化_气质联用法定量分析石蜡含量一般论文版面以4页为主，整体内容篇幅偏多，建议标题改为“GPC净化-气质联用法测定瓜子中石蜡含量研究”沈涛收稿日期：年月日；修订日期：年月日基金项目：2009年浙江省质量技术监督系统一般科研计划项目(No.20090228)第一作者简介：沈涛（1979年），男，汉族，工程师，工学学士名字都补全 后面我来帮你翻译。，（嘉兴市农产品监测中心，浙江 嘉兴 314050）摘要： 提出了凝胶渗透色谱（GPC）净化样品气相色谱质谱联用法（GC-MS）定量分析大米、瓜子、粉丝中石蜡的含量。样品经索氏萃取后，利用凝胶渗透色谱技术去除样品中的油脂，净化液浓缩干后用乙酸乙酯环己烷（11）溶解，通过DB-5ms石英毛细管色谱柱（30 m0.25 mm0.25 m）分离，采用电子轰击离子源选择离子检测模式进行质谱测定。结果显示，该方法的相对标准偏差（RSD）为2.34.7%，检测回收率为90107%。关键词：凝胶渗透色谱；气相色谱质谱联用法；大米、瓜子、粉丝；石蜡中图分类号： 文献标识码：1 引言石蜡为一种矿物油，是石油分馏所得的产品，属非食用油脂，主要由正构烷烃n2n+2组成。石蜡经过长时间烧煮，会分解成更小的低分子化合物，对人体呼吸道造成不良影响，降低其免疫功能，使人容易患上气管炎、肺炎等疾病，或者通过呼吸道感染，引发体内各种脏器疾病。这些物质如果在人体内长期积蓄，还会引起人体细胞变异疾病，严重危害健康。长期服用石蜡还可导致食欲减退，对脂溶性维生素的吸收减少，并发生消化系统障碍。由于目前国内学者对于食品中石蜡检测方法的研究大多集中在定性检测方法上，定量检测方法的研究报道不多。如廖怀平等1研究傅里叶红外光谱法定性检测火锅底料中非法掺入工业用固体石蜡的方法。毕艳兰等2 根据石蜡与食用油脂性质的差异，采用了薄层色谱法、皂化法、溶剂溶解法等对火锅底料中提取出来的油样进行定性分析比较。范璐等3采用索氏抽提法从整粒或粉碎大米中抽提粗脂肪，采用测定皂化值和不皂化物含量法确定大米表面的石蜡含量。郑卫东等4采用乙醚提取皂化的方式，分离出不皂化物，通过对不皂化物的红外光谱鉴别，建立了火锅底料中石蜡的定性检验方法。因此研究食品中石蜡含量的定量检测方法对于打击部分生产企业和不法分子非法使用石蜡作为食品添加剂具有重要意义。本实验以大米、瓜子、粉丝为研究对象，利用气相色谱质谱联用仪建立了食品中石蜡含量定性与定量检测方法。2 实验部分2.1仪器与试剂Agilent 6890N-5973N气相色谱质谱联用仪；LC-Tech凝胶渗透色谱仪；Heidolph 4003旋转蒸发仪；梅特勒XS205十万分之一电子分析天平。石油醚（分析纯）、乙酸乙酯、环己烷为色谱纯；市售石蜡（纯度大于98%），用乙酸乙酯-环己烷（50+50，V/V）配成1mg/mL标准储备液。2.2色谱质谱条件色谱条件：色谱柱：DB-5ms 30m0.25mm0.25m；进样口温度：280；程序升温：初始温度50，保持1min，以20/min升至180，保持1min，以15/min升至280，保持20min；柱流速：1.0mL/min；接口温度：280。质谱条件：电离能：70Ev；采集方式：选择离子扫描（SIM法），定量离子：366，定性离子：85、99、113；溶剂延迟：5min。2.3样品处理2.3.1提取称取5.00g粉碎后的样品，加入100mL石油醚，50索氏提取4小时，转移至蒸发瓶中，50旋转蒸发干，用10mL乙酸乙酯-环己烷（50+50）溶解残渣，待GPC净化。2.3.2净化GPC净化条件：流动相乙酸乙酯-环己烷（50+50，V/V），流速5.0 mL/min，丢弃时间800秒，收集时间400秒。将收集到的溶液在50旋转蒸发干，用1.0mL乙酸乙酯-环己烷（50+50）溶解，旋涡混匀，待气相色谱质谱联用仪分析。结果与讨论中GPC条件作为考察因素，这里就不要明确予以说明。3 结果与讨论3.1色谱质谱条件的确定实验部分GC-MS条件已确定，这里不要重复，直接写定性、定量分析定性与定量化合物的选择气相色谱质谱联用分析方法的主要目的是目标化合物能在尽可能短的时间内得到完全分离，目标峰的理论塔板数能尽可能高，同时要明确目标碎片离子。因此，只有选择最佳的色谱和质谱条件，增加分离度，将分析物与干扰组分良好的分离，并且选择出合适的碎片离子才能准确地进行定量分析。由于石蜡是由正构烷烃n2n+2组成，目标化合物均为非极性物质，我们采用非极性的DB-5ms 30m0.25mm0.25m色谱柱，通过对程序升温条件、流速、进样口温度、接口温度等参数进行优化，由标准溶液色谱图（图1）可见，在35分钟内石蜡中的各种正构烷烃能全部出峰并且得到很好分离。图中将TIC:STD-1.D字样删掉，这种图建议转化为相对丰度，并把保留时间能标上图1 石蜡标准溶液总离子流图Figure 1 Standard Solution Total Ion Chromatogram of Paraffin wax由图1可以看出正二十五烷、正二十六烷、正二十七烷、正二十八烷响应值最高，且未添加石蜡的大米、瓜子、粉丝样品的色谱图中上述四种化合物无响应，因此选择正二十五烷、正二十六烷、正二十七烷、正二十八烷四种化合物作为判断是否添加石蜡的定性依据。定量化合物选择理论塔板数最高的正二十六烷，并选择366的分子离子作为定量碎片离子。3.2 GPC净化条件的确定GPC又称为体积排阻色谱，它是按溶质分子的大小进行分离的一种色谱技术。通过多孔性凝胶固定相，使得样品中的大分子先被洗脱出来，小分子后被洗脱出来。表1为本次实验中确定的石蜡中四种代表性烷烃的分子量和分子式。表1 代表性烷烃的分子量和分子式Table 1 Molecular Weight and Molecular Formula of Representative Alkane烷烃名称分子量分子式正二十五烷352.41C25H52正二十六烷366.42C26H54正二十七烷380.44C27H56正二十八烷390.45C28H58GPC净化应用在食品中石蜡含量的检测，根据多孔凝胶对不同大小分子的排阻效应进行分离，大分子的油脂先淋洗出来，烷烃等相对分子质量较小，后淋洗出。本实验选用Bio-Beads S-X3（200400目）作为填料，体积比为11的乙酸乙酯-环己烷溶液作为流动相，流速设定为5mL/min，分5段进行收集，分别为600800s、8001000s、10001200s、12001400s、14001600s。结果显示，瓜子提取液中的油脂完全流出的时间为1000s，石蜡组分集中在8001200s流出。综合考虑净化效果和农药的回收率，GPC净化条件我们设定为丢弃时间800秒，收集400秒，后运行240秒清洗柱子，确保样品之间没有相互干扰这段只讲了瓜子的GPC净化。3.3方法的线性范围和最低检出限准确配制含量分别为0.01、0.02、0.05、0.1、0.2、0.5、1.0、2.0mg/mL的石蜡标准溶液。按2.2的条件进行分析，以各组分的峰面积（y）对质量浓度（x，mg/L）绘制标准曲线。本方法以3倍的信噪比计算得出最低检出限，以10倍的信噪比计算得出定量限。石蜡中4种代表性烷烃的线性范围、最低检出限及定量限见表2。表2 4种代表性烷烃的线性范围、最低检出限及定量限Table 2 Linear Range and Lowest Detection Limit and Quantitative Limit of 4 Representative Alkane序号代表性烷烃线性范围（mg/mL）相关系数最低检出限（g/L）定量限（g/L）1正二十五烷0.012.00.99950.080.282正二十六烷0.012.00.99990.070.243正二十七烷0.012.00.99970.170.604正二十八烷0.012.00.99930.060.213.4方法的回收率和精密度这个应该对照表2来写4种烷烃的回收率和精密度实验数据吧。将石蜡以3种浓度添加于空白的大米、瓜子、粉丝样品中，按实验方法进行提取、净化、检测，重复6次实验，计算平均回收率及相对标准偏差。具体数据见表3。表3 大米中添加石蜡的回收率试验结果和精密度Table 3 The Recoveries and The Precision of Paraffin wax in Rice石蜡组分添加水平（g/kg）平均回收率（%）RSD（%）正二十六烷0.0178.26.20.183.16.00.585.34.4建议删掉表4 瓜子中添加石蜡的回收率试验结果和精密度Table 4 The Recoveries and The Precision of Paraffin wax in Melon seed石蜡组分添加水平（g/kg）平均回收率（%）RSD（%）正二十六烷0.0178.26.20.183.16.00.585.34.4表4 粉丝中添加石蜡的回收率试验结果和精密度建议删掉。Table 4 The Recoveries and The Precision of Paraffin wax in Vermicelli石蜡组分添加水平（g/kg）平均回收率（%）RSD（%）正二十六烷0.0178.26.20.183.16.00.585.34.44 结论本文建立了大米、瓜子、粉丝中石蜡含量的定性和定量检测方法，定量检出限为0.01g/kg，并对市场上所购样品进行了检测。结果表明：所建立的大米、瓜子、粉丝中石蜡含量测定方法的相对标准偏差为2.34.7%，检测回收率为90107%，该方法操作简单，测定结果准确、可靠。参考文献：参考文献我来帮你补充完善，你的标注方法都不对。1 廖怀平，蔡元庠，肖伦。傅里叶红外光谱法检测火锅底料中的固体石蜡，中国卫生检验杂志，2005，15（12）2 毕艳兰，李潇颖，郭兴凤等。火锅底料中固体石蜡的定性检测方法研究，中国粮油学报，2006，21（6）3 范璐，毕艳兰，蔡凤英等。涂石蜡大米的石蜡含量测定方法的研究，中国粮油学报，2006，21（4）4 郑卫东，周燕，钟红霞等。火锅底料中石蜡的定性检验，中国测试技术，2005，31（5）Analysis of paraffin waxes by gel permeation chromatography and gas chromatography-mass spectrometrySHEN Tao(Jiaxing Agriculture Products Supervision & Teting Agency, Zhejiang Jiaxing,314050)Abstract: Establish a method for determination of the paraffin waxes in rice, melon seeds and vermicelli by gel permeation chromatography and gas chromatography-mass spectrometry. Samples were be treated by soxhlet extraction, then the olein in the extract was abandoned by gel permeation chromatography. After that, the purified solution was concentrated and then dissolved by ethyl ethanoate : cyclohexane (1:1). It was analyzed by gas chromatography-mass spectrometry with DB-5ms quartz capillary tube (30 m0