除虫菊酯类农药.doc

Keywords: Pyrethrin；colorimetry；fast measure 拟除虫菊酯类农药是20世纪70年代研发成功的一类仿生杀虫剂,具有性质稳定,不易光解,无特殊臭味及安全系数高,使用浓度低,触杀作用强,灭虫速度快,残效时间长等优点,被称为是杀虫剂农药的一个新的突破；是杀虫剂历史上的第三个里程碑。目前,人工合成的拟除虫菊酯类化合物数以万计,新产品相继投产,销售猛增,迄今已商品化的拟除虫菊酯类有50多种，现已占世界农药市场的1/4。拟除虫菊酯类杀虫剂已成为农用及卫生杀虫剂的主要支柱之一。高毒有机磷农药被禁止使用后,拟除虫菊酯类杀虫剂便有了更广泛的使用空间,同时也带来了环境污染和食品安全等问题。氰戊菊酯是中国广为应用的一种拟除虫菊酯类农药。又由于拟除虫菊酯类杀虫剂残留期较长,对某些非目标生物如蜜蜂、家蚕及天敌昆虫毒性较大,对鱼、虾、蟹、贝类等水生生物毒性也很高。随着人们生活水平的不断提高，食品的安全性也越来越受到重视，故对农药最高残留限量的要求也日益严格。因此，建立一套高效、快速、准确的测定食品中的拟除虫菊酯类农药残留速测方法迫在眉睫。目前国内外对常规拟除虫菊酯类农药的残留分析方法包括分光光度法、色谱法、免疫分析法等等。但这几种分析方法各有利弊,都仍需改进和研究。色谱法和免疫分析法具有特异性强,灵敏度高等优点,但其仪器价格昂贵，开发难度大,且只适用于单一化合物或结构相似的化合物,应用具有局限性。分光光度法的主要优点是简便快捷,设备简单便宜,但灵敏度和精确度都较低，因此我们针对此方法，了硫化二钠显色以测定丙烯菊酯等拟除虫菊酯类农药的残留量1和将样品用石油醚提取后加85 %磷酸和醋酸乙酯（41）加热显色测定拟除虫菊酯类农药的残留量2两篇论文，开发出了一种能够简单快速准确检测食品中拟除虫菊酯类农药残留量的速测方法。1 试验部分1.1 仪器和试剂仪器：YN-CLVI农药残留检测仪（河南农大迅捷测试技术有限公司）、KQ2200E型超声波振荡器（昆山市超声波仪器有限公司）、恒温水浴槽（YN-CLVI农药残留检测仪配带）。试剂（主要药剂均为分析纯）：硫化钠、硫酸钠、氢氧化钾、硅藻土、四氯化碳、乙醇、石油醚、乙腈；显色剂：准确称量5.6gKOH溶于适量无水乙醇中，加入0.25gNa2S，用无水乙醇定容至100mL刻度线。氰戊菊酯储备液（1000ppm）:吸取20%氰戊菊酯0.5ml于100ml容量瓶中，用石油醚（沸程60-90）定容至100ml刻度线。氰戊菊酯标准液（10ppm）:吸取0.25ml氰戊菊酯储备液于25ml的容量瓶中，用石油醚（沸程60-90）定容至25ml刻度线。1.2 样品前处理将蔬菜洗净，用剪刀剪成碎块，称取40g样品，置于250ml三角瓶中, 同时做空白和标准，其中，标准中加入10ppm氰戊菊酯标准液1ml。四个三角瓶中各加5060ml丙酮，加入40g无水硫酸钠脱水，同时加入1g左右活性炭脱色（空白与标准中可适量少加一些）。用保鲜膜封住瓶口，充分摇匀后用超声波振荡器振蒎提取20min,拿出三角瓶浸泡在凉水中冷却至蔬菜与硫酸钠结晶成块后用滤纸过滤溶液于100 ml小烧杯中，将烧杯放入6070水浴锅中加热，蒸发近干、无溶液存在后冷却至室温，然后加入1ml石油醚充分溶解后移至25ml带塞比色管中封口待测。1.3试验操作方法分别取20ppm的菊酯农药标准溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1ml于25ml比色管中，不足1ml的用石油醚补足。向每个比色管中分别加入3mlCCl4溶液，摇匀，再加入3ml显色剂试剂，盖盖，充分摇匀15秒。于70水浴中加热3分钟，至溶液显橙红色时取出比色管，加入少量硅藻土沉淀悬浮物，摇匀，静置10分钟。溶液过滤于25ml比色管中，在YN-CLVI农药残留检测仪505nm波长处测吸光度。样品经过前处理后，测定方法与标准曲线方法相同。2 结果与讨论2.1样品前处理中浸提液的选择拟除虫菊酯类农药是亲酯性化合物,用有机溶剂提取比较容易。目前常用的提取菊酯类农药的溶剂有乙腈、丙酮、丙酮石油醚、丙酮正己烷等溶剂。经过实验研究，结果表明对于粮谷类样品用乙腈浸提效果较好,对于水果样品而言,用丙酮或乙腈浸提效果相近。2.2反应条件的选择2.1.1反应温度的确定本方法中要使用水浴加热提高反应温度促使反应加快进行，分别升高反应温度到55、60、70、75，比较低浓度的线性显色试验结果可知，在70、75都能出现线性显色，但在75反应时线性显色的重现性较差、结果不稳定，因此选择最佳水浴温度为70。2.1.2反应时间的确定本方法使用水浴加热会使反应加剧，显色速度加快，因此必须选取最佳的反应时间。反应时间过短会使显色不充分，增加反应时间虽可增加显色强度但精确性降低。经实验测定当反应时间超过5min会使空白的吸光度大于1，当反应时间为3min时空白的吸光度在0.50.7之间，可以正常测定。2.1.3测定时间的确定因为有机溶剂显色有递变性，使用本方法在经过水浴之后分别取不同时间点测量样品吸光度值，结果在3050分钟内样品回收率为122%81%。经过多次试验，结果都基本相近，由此可知经过水浴之后3050分钟内为最佳检测时间。为了提高速测时间，在不影响测定结果的前提下，我们将测定点定为30min。2.3方法的线性范围本试验方法在020ppm的线性范围内符合比尔定律，其回归方程为y=0.014x-0.0551 （r=0.9897）,方法检出限为0.7mg/kg。2.4 试验数据表1 样品结果分析Tab.1 Analytical results of samples 样品空白标准样品样品添加回收率（%）100.0520.0660.128119200.0550.0530.116115300.0540.0120.068104400.0540.0420.098104500.0600.0860.14090600.0490.0410.0961122.5注意事项（1）由于硫化钠对光和温度敏感、吸水性强，性质非常不稳定，配制显色剂时应尽量快速称量，避光保存。（2）显色剂配制后使用的最佳时间为配制半天后至第八天，使用前应先检查试剂是否变质，变为深黄色时不能使用。（3）配制好显色剂后要尽量避免摇晃容量瓶，使沉淀物沉淀，吸取时要取上清液使用。（4）由于有机溶解挥发性强，四氯化碳又有毒性，在实验中比色管要随时盖盖，避免吸入有害气体，做好防护措施。3 总结本方法的开发，我们找到了一种能够快速准确的测定蔬菜中拟除虫菊酯类农药含量的方法，整个测定时间不超过4小时，加标回收率能控制在80%120%之间。另外，将测定的标准改变，方法略作调整应该可用于茶叶中的拟除虫菊酯类农药残量的测定。本方法的不足之处是加热程度不同影响结果较大、较难控制，如果这一点能够改善将会提高测定的稳定性。原分光光度法的方法检出限为200mg/kg,本方法检出限降低为0.7 mg/kg。文献1 Cuets C, Dale WE. Rapid Colorimetric determination of total Pyrethrin by Reaction with sulfur, allethrin and furethrin J . Anal Chem,1953, 25 （8）: 13671369.2 W