14种肠道菌群选择培养基(大连医科大学版本)

肠道菌群分离培养1、大肠杆菌培养基（EMB） （伊红美兰琼脂成品培养基）：蛋白胨 10g、乳糖5 g、K2HPO4 2g、伊红Y 0.4g、美兰0.065g、水 1000ml、PH 7.2。DHL培养基：成分及调整方法:Meat extrct 3100g，蛋白胨20g，乳糖10g， 蔗糖10g，脱氧胆酸钠1g，Sodium thiosrlfate 2.30g，柠檬酸氨1g， 柠檬酸钠1g，中性红0.03g，琼脂15g，蒸馏水1000ml，pH7.4，将以上成分加温溶解，倒平板。培养基长期放置(3 周以上)，分注前有必要灭菌。2、链球菌培养(TATAC)：蛋白胨15g、胰蛋白胨10g、 酵母浸膏10g、蔗糖 1g、七叶苷1g、 琼脂16g、蒸馏水1000ml，PH 7.67.8，马血清50ml。TATAC 添加液 22m l，TA TAC 添加液 20m l。将马血清及各添加液以外的成分加温溶解， 将其pH 调整至7.6 - 7.8后，121.3 20min 灭菌。待其冷至50左右， 加入马血清及各添加液，充分混合后，分注于平皿中。添加液：叠氮钠0.45g，谷氨酸钠30g，蒸馏水100ml溶解：100 30min煮沸，冷藏添加液：吖啶橙 0.01g、TTC 0.1g、结晶紫（0.65%液）1.0ml、硫酸亚铊1.65g，蒸馏水100ml，溶解后冷藏3、葡萄球菌培养基（BP）： 营养琼脂粉41g、氯化理5g、苯乙醇2.5ml、卵黄液50ml、精制水1000ml。（10%15%NaCl）将卵黄液以外的成分加温溶解后，121.3 20 分钟灭菌。待其冷至50左右，加入卵黄液，充分混合后，分注于平皿中。葡萄球菌选择性培养基（Mannitol salt agar 高盐甘露醇）：牛肉膏 1.0 g、蛋白胨10.0g、NaCl 75.0g、甘露醇 10.0g、酚红0.025g、琼脂15.0g、蒸馏水1000ml、PH 7.5 4、酵母菌选择性培养基：土豆浸出液4.0g、葡萄糖20.0g、琼脂15.0g、蒸馏水1000ml，PH 6.0，制作方法：加热溶解PH调整灭菌、加入10%酒石酸14ml5、Lbs （LC）（乳杆菌培养基）：琼脂 25g，蛋白胨 10g，肉膏10g，酵母浸膏5g，葡萄糖20g，吐温-80 lml，K2HPO4 2g，醋酸钠5g，柠檬酸三氨2g，MgSO47 H2O 200mg，MnSO44 H2O 50mg，醋酸3.7ml，精制水1000ml。 加热溶解修正PH6.0至6.5，121.3，20分钟灭菌。待冷至50左右，加入醋酸。充分混合后，分注于平板。6、优杆菌选择性培养基（CS培养基）：成分及调整方法：基础EG培养基1000ml， CS 添加液50ml，L-半胱氨酸HClH2O 0.5g，马血（羊血）50m l。充分混合后，分注于平皿中。CS 添加液：丙酸钠30g，用约80ml 的灭菌蒸馏水溶解。将硫酸新霉素0.4g、粘菌素0.02g、硫酸链霉素1.0g、蒸馏水100ml溶解后，加入烧瓶中。再用灭菌蒸馏水将液体的总量补至100ml。7、VS（韦荣氏小球菌）：胰胨5g，酵母浸膏 3g，硫乙醇酸钠075g ，煌绿（0.1）lml，吐温-80 1g，50乳酸钠25ml，琼脂20g，夹竹桃霉素（1）3ml，羊血50ml，PH7 5。后两者后加，倒成平板。8、PMS（消化球菌、巨球形菌选择培养基）：EG琼脂培养基1000ml，PMS添加液 10ml。PMS添加液：结晶紫70mg，无色粘菌霉素50mg，溶于100ml精制水内。9、Bds（类杆菌选择性培养基）： 配方一：EG琼脂培养基 1000ml，Bds+添加液 50ml。EG琼脂培养基：牛心浸液930ml，胰胨10g，酵母浸膏5 g，Na2HPO4 4g，葡萄糖0.5g，可溶性淀粉0.5g，L-半胱氨酸0.2g（预先用 110N HCl溶解），琼脂20g，L一半胱氨酸HCIH2O 0.5g，羊血50ml，pH7.6至7.8。除L一半胱氨酸及羊血以外的成份，加热溶解修正PH，121.320分钟灭菌，冷至 50C时，加 L-半胱氨酸及血。Bds添加液：牛磺胆酸钠 5g，加入 80ml温水中使之溶解，然后加 0.5煌绿水溶液 l ml和新霉素1g，再以10NaOH调PH使液体呈透明的绿色为止。最后用精制水加至100ml。配方二：10、梭状芽孢杆菌选择性培养基（NN培养基）：蛋白胨40g、Na2HPO4g、KH2PO4 1.0g、NaCl 2.0g、MgSO4 0.1g、葡萄糖2.0g、琼脂25g、蒸馏水1000ml。PH 7.6制作：加热溶解PH调整灭菌添加液：纯卵黄液50ml、硫酸新霉素(2%)10ml混匀11、梭菌选择性培养基（Clostrisel琼脂）？Cd（RCN）（梭菌选择性培养基）：EG琼脂 1000ml，吐温80 0.5g，1利福平（RifamPicin）0.5ml，1粘杆菌素（Colimycin） l ml， 1新霉素 20 ml， pH7.6。除血、抗菌素外，加热溶解，冷至 50时，再加血及抗菌素。制备：水浴中加热溶解，调PH7.0，121.3灭菌15分钟12、EC（肠球菌培养基）：胰胨2g，酵母浸膏0 05g ，葡萄糖0.2g ，Na2HPO4 004g，KH2PO4 0.04g，琼脂2g，精制水100ml，PH74。加热溶解修正PH，8磅15分钟灭菌，冷至4550时加NaN3，TTC。NaN3 40mg（04mgml）和TTC10mg（0.1mgml）。13、BS（改良法）双歧杆菌选择培养基：西红柿汁（500g西红柿加1000ml水，熬成粘稠汁，纱布过滤，而后滤纸过滤，高压灭菌，4保存）200ml，蛋白胨15g，酵母浸膏6g，葡萄糖20g，NaCl 5g，吐温80 1g，可溶性淀粉0.5g，琼脂20g，精制水800ml。 溶解后，冷至 50C左右时，加 BS添加液 50ml，倒平板，PH6.8。BS添加液：丙酸钠 30g 加 90ml水，充分溶解，然后加新霉素400mg，巴龙霉素100mg，氯化理6g，最后加精制水至100ml，冰箱内保存。14、FS（梭杆菌选择性培养基）：EG 1000ml，FS 添加液 10ml。FS添加