CN101766251A从猪血中提取改性血浆蛋白粉、补血活性肽的方法

CN101766251A从猪血中提取改性血浆蛋白粉、补血活性肽的方法 (10)申请公布号101766251A (43)申请公布日xx.07.07101766251A*101766251A* (21)申请号xx10154691.5 (22)申请日xx.12.30A23J1/06(xx.01)A23J3/12(xx.01)A23J3/34(xx.01)A23L1/312(xx.01)A23L1/305(xx.01) (71)申请人天津市食品工业生产力促进中心地址300381天津市南开区卫津南路36号 (72)发明人赵丽陈树生杨萍刘元 (74)专利代理机构天津盛理知识产权代理有限公司12209代理人董一宁 (54)发明名称从猪血中提取改性血浆蛋白粉、补血活性肽的方法 (57)摘要一种从猪血中提取改性血浆蛋白粉、补血活性肽的方法，以新鲜健康猪血为原料，经抗凝处理后进行离心分离，得到血细胞和血浆；血细胞经高压剪切破壁、复合酶水解、闪蒸脱臭工艺处理后得到的酶解液，再经粗滤、精滤及浓缩处理，喷雾干燥制成补血活性肽；经过分离后的血浆则经改性处理制成改性血浆蛋白粉。 本发明具有如下的优点和积极效果 1、生产成本、对环境无污染。 2、生产的补血活性肽小肽平均分子量10000Dalton，游离氨基酸含量15.0。 血蛋白粉的蛋白质90.0。 3、生产的改性血浆蛋白水分5.0、粘度(5溶液)2.0毫帕秒、蛋白质90.0。 4、工艺方法省时、省能量、操作简单、充分利用了猪血资源。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请权利要求书1页说明书3页附图1页101766251A1/1页21.一种从猪血中提取改性血浆蛋白粉、补血活性肽的方法，其特征在于以新鲜健康猪血为原料，经抗凝处理后进行离心分离，得到血细胞和血浆；血细胞经高压剪切破壁、复合酶水解、闪蒸脱臭工艺处理后得到的酶解液，再经粗滤、精滤及浓缩处理，喷雾干燥制成补血活性肽；经过分离后的血浆则经改性处理制成改性血浆蛋白粉。 2.根据权利要求1所述的从猪血中提取改性血浆蛋白粉、补血活性肽的方法，其特征在于上述抗凝处理和离心分离的工艺过程是在新鲜血液中加人柠檬酸钠0.33(w/v)，然后将其在5，3000g离心分离20min，分离上清液后得到血红细胞，随即采用均质机在60MPa压力下破碎血红细胞，使血红蛋白溶出并匀浆，冷冻备用，上清液即血浆，血浆约占全血的60，冷却至12保存。 3.根据权利要求1所述的从猪血中提取改性血浆蛋白粉、补血活性肽的方法，其特征在于上述分离后的血浆经改性处理制成改性血浆蛋白粉的工艺过程是 (1)在血浆中加入转谷氨酰胺酶来提高血浆蛋白的凝胶性；提高血浆蛋白的凝胶性的条件是转谷氨酰胺酶的加入量在1-5u/g之间、pH7.0-9. 0、反应温度为45-55、底物蛋白浓度为12； (2)将改性后的血浆蛋白进行浓缩，其浓缩条件为真空度0.13MPa，温度不高于55，使固形物含量浓缩至为40； (3)将上述浓缩液进行喷雾干燥，得到血浆蛋白粉；喷雾干燥的进风温度为160170，排风温度为4850，进料浓度为40左右。 4.根据权利要求1所述的从猪血中提取改性血浆蛋白粉、补血活性肽的方法，其特征在于上述通过血红细胞制成补血活性肽的工艺过程是将处理后的血红蛋白调其浓度为8，加热至40-55保温水解，加入0.2的复合蛋白酶进行水解血红蛋白，pH值在7-8之间，水解后加入脱色剂，在室温下处理30min后3000g离心10min，得到酶解上清液，下层液为红细胞；下层的红细胞经清洗后，使用超声波匀浆技术，使血细胞破坏，制备出变性血红蛋白，再经离心分离，沉淀物经浓缩及喷雾干燥制成血红蛋白粉；酶解的上清液经过粗滤后，进行精滤、浓缩后经过喷雾干燥制得补血活性肽。 5.根据权利要求4所述的从猪血中提取改性血浆蛋白粉、补血活性肽的方法，其特征在于上述复合酶采用AS1.39中性蛋白酶和木瓜蛋白酶按照55的比例混合制得。 6.根据权利要求4所述的从猪血中提取改性血浆蛋白粉、补血活性肽的方法，其特征在于上述复合酶水解血红蛋白的最优条件为温度55，pH7.5值、E/S为6000-8000u/g、底物浓度为6-8、酶解6-8h。 7.根据权利要求4所述的从猪血中提取改性血浆蛋白粉、补血活性肽的方法，其特征在于上述补血活性肽的膜过滤条件为用UF-3膜截留10000DA以上的肽及大分子物质，膜过滤压力为2.0mPa，膜通量为16.3L/m2.h；补血活性肽的真空浓缩的适宜条件为浓缩温度70，真空度0.090mPa；补血活性肽的喷雾干燥采用离心喷雾干燥器，其进风温度300，排风温度90100，进料流速2L/h的条件下，补血活性肽干燥效率145g/L。 权利要求书101766251A1/3页3从猪血中提取改性血浆蛋白粉、补血活性肽的方法技术领域0001本发明涉及一种从猪血中提取改性血浆蛋白粉、补血活性肽的方法。 背景技术0002据有关文献报道国内外对畜禽血的开发，始于上世纪初。 早期主要用于饲料工业。 随着技术发展，在德国、丹麦等国的食品专家用猪血分离出血浆作为补品，加入香肠、布丁、糕点中；七十年代瑞典、法国开始将新鲜猪血用于香肠和布丁中，并将少量的猪血浆用于糕点、饼干、面包、挂面等产品以代替鸡蛋清，但也仅利用了猪血资源的2530。 猪血还曾被用于家具的黏合剂，酿酒工业中的澄清剂以及用猪血为原料提取许多有生理功能的制品，如血红素、超氧化物歧化酶、凝血酶等。 近年来法国又开始将血浆制成血浆粉和蛋白粉添加到食品中，但这些应用仍很有限。 0003目前我国利用血液的技术程度较低、产品单调，主要是生产干燥血粉、发酵血粉饲料等，近年又开发了血豆腐、补血剂等，但是其消化吸收率仅有3050左右，利用率很低，并且生产环境尚需改进。 国内在猪血资源的利用上虽做了大量的基础工作，但尚处于实验研究阶段，如在猪血蛋白水解采用酸水解方法，且均为单一产品提取。 在食品领域的应用上，目前也有研究报道，技术难点在于有机溶剂的大量使用产生的再污染问题，由于这些原因，猪血资源的综合利用，难以实现产业化。 发明内容0004本发明的目的就在于克服上述现有技术中存在的不足，而提供一种从猪血中提取改性血浆蛋白粉、补血活性肽的方法，该方法用复合酶水解血红蛋白生产补血活性肽，采用转谷氨酰胺酶酶解血浆蛋白生产改性血浆蛋白，具有省时、省能量、操作简单、资源利用率高的优点。 0005本发明的技术方案是一种从猪血中提取改性血浆蛋白粉、补血活性肽的方法，其特征在于以新鲜健康猪血为原料，经抗凝处理后进行离心分离，得到血细胞和血浆；血细胞经高压剪切破壁、复合酶水解、闪蒸脱臭工艺处理后得到的酶解液，再经粗滤、精滤及浓缩处理，喷雾干燥制成补血活性肽；经过分离后的血浆则经改性处理制成改性血浆蛋白粉。 0006上述抗凝处理和离心分离的工艺过程是在新鲜血液中加人柠檬酸钠0.33(w/v)，然后将其在5，3000g离心分离20min，分离上清液后得到血红细胞，随即采用均质机在60MPa压力下破碎血红细胞，使血红蛋白溶出并匀浆，冷冻备用，上清液即血浆，血浆约占全血的60，冷却至12保存。 0007上述分离后的血浆则经改性处理制成改性血浆蛋白粉的工艺过程是 (1)在血浆中加入转谷氨酰胺酶来提高血浆蛋白的凝胶性；提高血浆蛋白的凝胶性的条件是转谷氨酰胺酶的加入量在1-5u/g之间、pH7.0-9. 0、反应温度为45-55、底物蛋白浓度为12； (2)将改性后的血浆蛋白进行浓缩，其浓缩条件为真空度0.13MPa，温度不高于55，使固形物含量浓缩至为40； (3)将上述浓缩液进行喷雾干燥，得到血浆蛋白粉；喷雾干燥的进说明书101766251A2/3页4风温度为160170，排风温度为4850，进料浓度为40左右。 0008上述通过血红细胞制成补血活性肽的工艺过程是将处理后的血红蛋白调其浓度为8，加热至40-55保温水解，加入0.2的复合蛋白酶进行水解血红蛋白，pH值在7-8之间，水解后加入脱色剂，在室温下处理30min后3000g离心10min，得到酶解上清液，下层液为红细胞；下层的红细胞经清洗后，使用超声波匀浆技术，使血细胞破坏，制备出变性血红蛋白，再经离心分离，沉淀物经浓缩及喷雾干燥制成血红蛋白粉；酶解的上清液经过粗滤后，进行精滤、浓缩后经过喷雾干燥制得补血活性肽。 0009上述复合酶采用AS1.39中性蛋白酶和木瓜蛋白酶按照55的比例混合制得。 0010上述复合酶水解血红蛋白的最优条件为温度55，pH7.5值、E/S为6000-8000u/g、底物浓度为6-8、酶解6-8h。 0011上述补血活性肽的膜过滤条件为用UF-3膜截留10000DA以上的肽及大分子物质，膜过滤压力为2.0mPa，膜通量为16.3L/m2.h；补血活性肽的真空浓缩的适宜条件为浓缩温度70，真空度0.090mPa；补血活性肽的喷雾干燥采用离心喷雾干燥器，其进风温度300，排风温度90100，进料流速2L/h的条件下，补血活性肽干燥效率145g/L。 0012本发明具有如下的优点和积极效果0013 1、由于本工艺未采用有机溶剂，既减少了成本又减轻了排放，对环境无污染。 0014 2、采用复合酶水解血红蛋白生产的补血活性肽品质高、色泽白、质地细腻均匀，小肽平均分子量10000Dalton，游离氨基酸含量15.0。 血蛋白粉蛋白质90.0。 该产品对缺铁性贫血具有良好的防治作用，其吸收率高，是无机补铁剂吸收率的4-5倍，且无任何毒副作用。 0015 3、采用转谷氨酰胺酶酶解血浆蛋白生产的改性血浆蛋白，不吸潮、不结块、无腥味。 其水分5.0、粘度(5溶液)2.0毫帕秒、蛋白质90.0。 这种改性血浆蛋白粉用于肉制品加工，特别是肠类制品的加工，可代替或部分代替磷酸盐起保水增粘的作用，不会影响人体对钙的吸收，同时提高了肉制品的风味及营养价值。 0016 4、工艺方法省时、省能量、操作简单、充分利用了猪血资源。 附图说明0017图1是本发明的工艺流程图。 具体实施方式0018一种从猪血中提取改性血浆蛋白粉、补血活性肽的方法，包括以下步骤0019 1、血红蛋白(HC)和血浆的制备。 0020新鲜猪血液中加人柠檬酸钠0.33(w/v)，以防止血液凝结，然后将其在5，3000g离心分离20min，分离上清液后得到血红细胞其蛋白质含量为(33.12土2.57)g/100g，随即采用均质机在60MPa压力下破碎血红细胞，使血红蛋白溶出并匀浆，冷冻备用。 上清液即血浆，血浆约占全血的60，冷却至12保存。 0021 2、将分离后的血浆经生物改性处理制成改性血浆蛋白粉。 其工艺过程是 (1)在血浆中加入转谷氨酰胺酶来提高血浆蛋白的凝胶性；提高血浆蛋白的凝胶性的条件是转谷氨酰胺酶的加入量5u/g、pH8. 0、反应温度为45、底物蛋白浓度为12； (2)将改性后说明书101766251A3/3页5的血浆蛋白进行浓缩，其浓缩条件为真空度0.13MPa，温度不高于55，使固形物含量浓缩至为40； (3)将上述浓缩液进行喷雾干燥，得到不吸潮、不结块、无腥味的黄色血浆蛋白粉；喷雾干燥的进风温度为160170，排风温度为4850，进料浓度为40左右。 0022 3、通过血红细胞制成补血活性肽。 其工艺过程是将处理后的血红蛋白调其浓度为8，加热至50保温水解，以血红蛋白质量计算，加入0.2的复合蛋白酶进行水解血红蛋白，水解过程中由于氨基氮含量逐渐增加，使反应液中的pH值下降，可通过滴加4N氢氧化钠来维持其pH值，搅拌水解24h后，升温至100水浴5min灭酶，然后加脱色剂(羧甲基淀粉钠)，在室温下处理30min后3000g离心10min，得到酶解上清液，下层液为红细胞。 下层的红细胞经清洗后，使用超声波匀浆技术，使血细胞破坏，制备出变性血红蛋白，再经离心分离，沉淀物经浓缩及喷雾干燥制成血红蛋白粉；酶解的上清液经过粗滤后，进行精滤、浓缩后经过喷雾干燥制得补血活性肽。 0023上述复合酶采用AS1.39中性蛋白酶和木瓜蛋白酶按照55的比例混合制得。 0024上