新鲜血清作为标准品用于国产试剂在AU640的溯源性.doc

新鲜血清作为标准品用于国产试剂在AU640的溯源性作者：左瑞菊,郭爱兰单位：河北省沧州市人民医院检验科【关键词】 溯源性 检测系统 标准品 标准 新鲜血清随着医疗事业发展,各种型号和功能不同的全自动生化分析仪不断涌现，使医院临床生化检验实现了自动化，许多实验室拥有多台全自动生化分析仪1，但是仪器常是品牌不同,而在品牌分析仪上又用非品牌试剂，使多台全自动生化分析仪结果的一致性和溯源性成为我们检验工作者讨论的热点。为此,我们做了用新鲜血清作为临时标准品实现国产试剂在奥林帕斯AU640分析仪上的溯源性。报告如下。1 对象与方法1.1 对象 (1)仪器：罗氏C501全自动生化分析仪奥林巴斯AU640全自动生化分析仪；(2)试剂：罗氏试剂、尿素(3V)、葡萄糖(申能)、总蛋白(科华)、白蛋白(科华)、钙(利德曼)、胆固醇(科华)、三酰甘油 (科华)；(3)校准品：罗氏校准品cfas(批号：180181121)；(4)质控品：罗氏质控品(批号：17646903、17628702)；(5)样本：院门诊及住院患者新鲜血标本。1.2 方法 (1)按照操作规程进行分析前准备,用罗氏校准品cfas校准C501系统, 做2个批号罗氏质控,重复测定患者新鲜混合血清8次,除去可疑值,算出平均值,其值作为临时校准品的值立即校准AU640上的项目。(2)根据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)批准的用患者标本进行方法对比及偏倚评估EP9A2指南文件(EP9A2)2每天选取8份患者新鲜血清(其浓度范围尽可能覆盖检测项目的高、中、低)按常规操作方法分别在罗氏C501全自动生化分析仪和奥林巴斯AU640全自动生化分析仪进行操作。测定顺序1、2、3、4、5、6、7、8、8、7、6、5、4、3、2、1，检测患者新鲜血清的尿素、葡萄糖、总蛋白、白蛋白、钙、胆固醇、三酰甘油，以上步骤连续重复5 d。(3)数据收集与处理：按照NCCLS P9A2文件对2种方法实验结果进行评估。检查实验数据中有无离群点，包括同一仪器内测得结果离群点和2台仪器间测得结果离群点，若检验中有1个离群点，可删去，有两个或以上，检查原因，补充实验数据。若无离群点，则进行统计，应用SPSS 15.0软件进行线性回归统计，可得到线性方程Y=bX+a以及相关系数R。检查X范围是否恰当。若R2≥0.95，认为X范围恰当，即X变量的误差可由数据的范围予以补偿，也说明回归统计的斜率b和截距a可靠，可用它们估计新鲜血清定标带来的系统误差；若R20.95，必须再做实验扩大数据范围。以美国Satland建议的医学决定水平估计的系统误差(SE)判断用新鲜血清作为标准品实现2台生化分析仪结果的一致性。SE=|(b-1)Xc+a|SE%=|(b-1)Xc+a|/Xc×100%以美国临床实验室改进修正法案(CLIA88)对室间质评的允许误差(Enorallowable,Ea)为判断依据，若SE不大于Ea，认为此系统误差可接受3。若将标本检测的随机误差考虑在内，则要判断估计的总误差是否小于允许误差，此时较简便的方法是将CLLA88允许误差的1/2作为2台生化分析仪结果的允许限值，从而判断用新鲜血清作为标准品实现2台生化分析仪结果的一致性是否可行。2 结果2.1 经过2种方法内离群点的检验及方法间配对结果离群点的检验，均未发现离群点。2.2 通过SPSS 15.0软件进行直线回归，得到线性回归方程及相关系数见表1，可见7个比对项目均有良好的相关性(R2均大于0.95)，这说明了回归统计的斜率b 和截距a可靠，可以用它们去估计新鲜血清定标带来的系统误差。2.3 各项目医学决定水平系统误差及1/2Ea(CLIA’88)见表2。3 讨论3.1 EP9A2文件为临床实验室提供了一个评价实验室方法试剂仪器性能的指南，用于评价测定同一被测物的2种方法(试剂或仪器)间的偏倚，它要求(1)操作者有足够的时间熟悉仪器操作及维护步骤；(2)操作者有足够时间熟悉评价方案；(3)在评价过程中，2种方法必须保证适当的质量控制；(4)2种方法必须有足够的数据以保证结果具有代表性。我们严格按照仪器操作规程、试剂参数操作，进行仪器保养，用罗氏试剂及程序罗氏校准品cfas罗氏质控 一系列罗氏系统保证结果可以溯源，参加全国卫生部室间质评，所测7项均优良，保证测量结果准确及与其他实验室间结果的可比性，坚持每天做室内质控，保证仪器状态稳定，结果准确。3.2 罗氏系统结果具有溯源性，用新鲜血清作为标准品去校准奥林巴斯AU640，通过常规测定方法测人的新鲜血清标本的结果，比较两系统间差异无统计学意义，表明奥林巴斯AU640全自动生化分析仪系统检测结果具有溯源性，从而实现2台生化分析仪结果的一致性。3.3 许多实验室拥有多台全自动生化分析仪，品牌不同，所用试剂不同，试剂方法学不一定相同，但是同一实验室所测结果差异必须在临床可接受范围之内,因此实验室要经常进行同一项目不同检测系统间的偏倚评估4，按照EP9A2文件提供的方法，通过对比研究，我们认为用新鲜血清作为标准品可以实现2台不同品牌生化分析仪所用试剂不同，试剂方法学不一定相同所测结果的一致性。表1 线性回归方程及相关系数（略）表2 各项目医学决定水平及系统误差（略）【参考文献】 1 王树辉，杨永红，安任刚，等.病人新鲜血清作为校准液用于7170A全自动生化分析仪的溯源性分析.贵州医药,2006，30：256266.2 National Committee for Clinical Laboratory Standards. Method comparison and bias estimation using patient sampies.Approved Guideline EP 9A2.Pennsylvania,NCCLS.2002.3 叶应妩，王毓三，申子瑜主编.全国临床检验操作规程.第3版.南