2013秋病毒学备考.doc

第一章绪论1.科赫法则的四点（重）。2.plaque assay（细胞培养蚀斑实验）：用病毒的稀释液感染单层培养细胞，然后用软琼脂覆盖以限制病毒的扩散，从而杀死局部的细胞，被病毒感染的单层细胞上出现蚀斑。对蚀斑进行计数，就可以知道铺到平板上的具有感染能力的病毒粒子的数量。3.癌基因（oncogene）：是指一类可能导致细胞癌变的基因。癌基因最早在病毒中发现，称之为病毒癌基因。事实上在人体细胞内同样存在癌基因，不过正常细胞内的这类基因是一种没有癌变作用的正常基因，称之为原癌基因。在正常情况下，原癌基因是处于关闭状态的不表达或低表达基因。这些原癌基因如果在某些因素的激活下由关闭状态转为开放（表达）状态，便会促使细胞癌变，这类可促使细胞癌变的基因就称之为细胞癌基因。4.反义RNA（antisense RNA）和反义技术的概念。5.核酶的概念。6. RNA interference (RNAi) is a phenomenon in which the introduction of double-stranded RNA (dsRNA) into certain organisms and cell types causes degradation of the homologous mRNA。 RNA干扰：是一种将双链RNA（dsRNA）导入特定的有机体或细胞类型中会引发同源mRNA降解的现象。（重）7.RNA干扰的步骤：1.双链RNA（dsRNA）被导入特定的有机体或细胞类型；2.在细胞里，长的dsRNAs被一种叫Dicer的核酶切割成短的21-25核苷酸长的小干扰RNA（siRNA）；3.siRNAs随后与一些蛋白质成分组装成RNA诱导沉默复合物（RISC）。siRNA解链消耗ATP，并激活RISC；4.RISC与通过碱基互补配对与同源的转录本结合并切割mRNA；5.这种序列特异性的mRNA的降解导致了基因沉默。（重）8.国际病毒分类委员会(International Committee on Taxonomy of Viruses,ICTV)已提出和多次修订了病毒的命名和分类原则，并且建立了由目、科(亚科)、属和种分类阶元构成的病毒分类系统。9.病毒及亚病毒的定义。（重）10.病毒分类的主要依据。11.同一病毒属的不同病毒种鉴别，主要依据7个特征。（重）12.2012年第九次国际病毒学会议新增的三个病毒目是小RNA病毒目、芜菁黄花叶病毒目和疱疹病毒目（应该不会考）。13.卫星（satellites）：是由核酸分子组成的亚病毒感染因子，需要与其辅助病毒共感染宿主细胞才能大量复制。包括卫星核酸和卫星病毒。卫星核酸（satellite nucleic acids）的核苷酸序列与它的辅助病毒和宿主的基因组有很大不同。当一个卫星编码衣壳蛋白包裹住它的核酸的时候，它就是卫星病毒（satellite virus）。 第二章病毒的结构及其基因组病毒的结构组成（PPT上的一个框架图）。病毒包膜来源于宿主细胞的细胞膜或内膜如内质网或高尔基体膜。包膜突起的化学本质大多为糖蛋白。病毒包膜的功能（5个）。衣壳或壳体（capsid）的概念。衣壳蛋白的功能（5点）。流感病毒分为三型的依据及三型对人危害程度的差别。病毒吸附蛋白（VAP）的概念（重）。有包膜病毒的核心是核衣壳，无包膜病毒的核心是核酸。准等价结合构成的二十面体对称壳体表现为一些蛋白亚基排列成五邻体，另一些亚基排列成六邻体，不同的亚基所处的环境是准等价的。病毒核酸的四种基本存在类型及单链DNA和RNA的极性、分不分节段、环状及线状。（重）分段基因组的概念（重）。花椰菜花叶病毒科和嗜肝DNA病毒科的DNA聚合酶具有逆转录酶活性，被称为DNA逆转录病毒。它们的DNA都是不完全环状双链DNA分子。原病毒或前病毒DNA的概念及逆转录病毒科的复制过程（重）。二组分基因组及二倍体基因组的概念；双义RNA（以沙粒病毒科的sRNA的图为例说明）（重）。病毒基因组结构的复杂性（这一部分考察概念）：粘性末端、末端冗余（重）、循环排列、回文序列（重）、末端反向重复序列（ITR）、重叠基因（重）、分段基因组、多分体病毒（重）。 第三章病毒的吸附、侵入和脱壳病毒感染过程的五步吸附、侵入和脱壳、生物大分子的合成（蛋白质、DNA或RNA）、装配、释放。VAP的概念。（重）病毒的细胞受体（病毒受体）、细胞受体单位、细胞受体位点的概念。病毒的吸附过程分两个阶段：可逆性吸附是由静电引力引起的，是不稳定、可逆的；不可逆性吸附是牢固的化学键反应，是稳定的、不可逆的。病毒侵入的四种方式（重）。病毒入胞后的六种命运。第四章病毒的基因组复制呼肠孤病毒dsRNA基因组全保留复制的过程。转录/复制酶的概念（重）。病毒基因组复制的三种主要方式。（填空）乙肝病毒基因组DNA的复制五步（重）。子代+ssRNA具有的三种功能。不同的病毒基因组复制的策略共七点，但不可照抄老师PPT上的，要写得更详细一些（重中之重）。 第五章病毒的基因表达早期转录、早期基因、早期mRNA的概念。早期蛋白为病毒基因组复制、晚期基因表达相关的酶和蛋白质。晚期转录、晚期基因、晚期mRNA的概念。晚期蛋白主要是构成病毒体所需的结构蛋白，如衣壳蛋白、包膜糖蛋白等。非对称性转录、多基因转录、单基因转录的概念。病毒转录方式的差异共6点。（重中之重）温馨提示：以上本章的知识点均为“病毒基因转录的特点”。有的DNA病毒携带RNA聚合酶，如痘病毒，很少见；ssRNA病毒和dsRNA病毒携带有转录酶。DNA病毒复制在核内，大的DNA病毒除外，如痘病毒、虹彩病毒；RNA病毒复制在细胞质内，少数例外，如正粘病毒RNA（重）。 第六章病毒粒子的装配和释放装配的部位：真核DNA病毒在细胞核；RNA病毒在细胞质。不同病毒释放的方式及举例（重）。 第七章病毒对宿主细胞的影响包涵体的概念（重）。细胞融合性病毒（合胞病毒）的概念（重）。HA（血凝素）是正粘病毒、副粘病毒等的VAP，与宿主细胞膜表面的病毒受体糖蛋白末端的唾液酸残基结合；NA（神经氨酸酶）的作用是在病毒粒子要离开宿主细胞表面时，水解掉唾液酸残基，促进病毒粒子的释放。 第八章。机体的病毒感染防治机体的病毒感染的概念。要注意两种情况下病毒进入机体不叫感染。根据不同的依据，机体病毒感染的类型有三种不同的分法（重）。急性感染和持续性感染的概念（重）。病毒的致病性和病毒的毒力的概念和区别。机体内病毒感染的表现形式和结果由病毒、机体和环境条件三者综合作用决定。持续性感染的四种类型。持续性感染发生的机制（重）。缺损干扰颗粒（DI颗粒）的概念（重）。病毒的两种传播方式。构成病毒性疾病流行的基本环节（三个）。病毒性疾病的预防原则（三个）。常规的全病毒疫苗分为两类：活疫苗和灭活疫苗。活疫苗又分为减毒的活疫苗和烈性病毒活疫苗。亚单位疫苗的概念（重）。DNA疫苗的概念。 第九章。病毒学的研究方法沉降系数的概念。病毒感染的症状可分为系统反应和局部反应。致细胞病变效应（CPE）的概念。蚀斑、蚀斑实验的概念。病毒的感染性测定常用的四种方法。病毒的鉴定七点，要详细。（重）荧光定量PCR技术的原理（重中之重）。要说明基本原理、Taqman探针和分子信标的工作原理、Ct值的含义、Ct值与起始拷贝数的对数的线性关系、从标准曲线计算起始拷贝数。酵母双杂交系统的工作原理。建议把各种PCR、western blotting、噬菌体展示技术、Sanger测序法的基本原理都看一下。这