不同采收期的芒果叶中总黄酮的变化规律研究VIP

不同采收期的芒果叶中总黄酮的变化规律研究摘要目的研究不同采收期的芒果叶中总黄酮的变化规律。方法采用乙醇回流法从芒果叶中提取黄酮类物质，并用紫外分光光度法测定不同采收期芒果叶的总黄酮含量。结果芒果叶中总黄酮的含量随采收季节不同呈一定幅度变化，其中以1、11月总黄酮含量最高，57月含量较低。结论不同采收期是影响芒果叶中总黄酮质量的重要因素。关键词不同采收期；芒果叶；紫外分光光度法；总黄酮中图分类号R927.2文献标识码A文章编号1674-4721（2013）02（c）-0074-02芒果叶为漆树科植物芒果（MangiferaindicaL.）的叶。芒果叶味酸、甘，性凉、平，具有平喘、止咳、祛痰、抗炎、镇痛、保肝利胆、抗脂质过氧化、抗病毒、抗肿瘤、抗菌等作用，对中枢神经系统和心血管系统等疾病也都有明显疗效1-2。芒果叶主要有效成分为黄酮类成分3-4，有关黄酮类成分的提取报道已有文献报导5，本文报道了不同采收期芒果叶中总黄酮变化规律，为深入研究开发芒果叶中总黄酮成分提供科学依据。1仪器与试药1.1仪器UV-1800紫外-可见分光光度仪（上海美谱达仪器厂）；AG285电子分析天平（瑞士METTLER公司）。1.2试药芒果叶采摘于广东省东莞市芒果种植园，经广东医学院药学院闫冲博士鉴定。采摘后于50烘箱干燥备用，每周采摘1次，持续1年。芦丁标准品购自南京替斯艾么中药研究所（批号：TCM027-091210）；乙醇等试剂均为分析纯。2方法与结果2.1对照品溶液的制备精密称取干燥芦丁对照品13.40mg，用50%乙醇定容至100mL，精密吸取此溶液并用50%乙醇分别稀释成0.0804、0.0268g/L的芦丁对照品溶液，备用。2.2供试品溶液的制备精密称取不同采收期芒果叶各0.5g，揉碎，用100mL50%乙醇80回流3h，冷却过滤，即得供试品溶液6。2.3标准曲线的绘制准确吸取0.0268g/L的芦丁对照溶液1.00、2.00mL，0.0804g/L的对照液1.00、2.00、3.00、4.00mL分别置于10mL容量瓶中，准确吸取0.134g/L的芦丁溶液2.00mL，至10mL容量瓶中，分别加入5%亚硝酸钠溶液0.5mL，摇匀，放置6min后加入10%硝酸铝溶液0.5mL，摇匀，放置6min；再加入5%氢氧化钠溶液4mL，分别用50%乙醇加至刻度，摇匀，放置15min后，以空白试剂为对照调0，于紫外分光光度计510nm处测定，结果显示其吸光度分别为：0、0.025、0.051、0.088、0.183、0.262、0.366、0.867，通过最少二乘法得回归方程Y=0.0921X-0.0001Y：浓度（g/L）；X：吸光度（A510nm），R2=0.9991，证明线性关系良好。2.4精密度试验精密量取0.03216g/L的对照品溶液1mL于10mL容量瓶中，平行制备6份，按“2.3”项下操作步骤，加入亚硝酸钠、硝酸铝及氢氧化钠溶液，于紫外分光光度计510nm处测定吸光度分别为0.366、0.366、0.366、0.367、0.366、0.366（RSD=0.11%，n=6），表明精密度良好。2.5重复性试验精密称取同一采收期（采摘于08年10月18日）的芒果叶6份（每份0.5g），揉碎，分别用100mL50%乙醇80回流3h，冷却过滤。精密吸取滤液1mL于10mL容量瓶中，按“2.3”操作步骤，测定吸光度分别为0.442、0.397、0.432、0.430、0.450、0.408（RSD=4.74%，n=6），表明重复性良好。2.6稳定性试验精密吸取芒果叶0.5g（采摘于08年10月18日）提取液1mL于10mL容量瓶中，按“2.3”操作步骤，于紫外分光光度计510nm处每10分钟测定吸光度1次，结果分别为：0.397、0.397、0.398、0.397、0.396、0.396、0.396。表明样品在60min内稳定，RSD=0.19%（n=7）。2.7回收率试验精密吸取芒果叶（采摘于09年2月21日，总黄酮含量为9.31%）提取液0.50mL共9份，分别加入芦丁对照品适量（0.18、0.23、0.28mg）各3份，按“2.3”项下操作步骤，于紫外分光光度计510nm处测定吸光度分别为0.466、0.467、0.466、0.526、0.526、0.528、0.589、0.591、0.59，计算回收率，平均加样回收率为109.30%，RSD=0.84%（n=9）。2.8芒果叶中总黄酮测定精密称取芒果叶0.5g，揉碎，用100mL50%乙醇80回流3h，冷却过滤。精密吸取滤液0.50mL于10mL容量瓶中，按“2.3”操作步骤，于紫外分光光度计510nm处测定吸光度。由标准曲线求出各供试品中的总黄酮浓度，并按月汇总计算不同采收期的芒果中总黄酮百分含量，结果表明，不同采收期芒果叶中黄酮的含量有差别，其中以1月、11月份总黄酮含量较高，57月含量最低。见表1及图1。3讨论有文献报导芒果中的黄酮类化合物具有免疫调节及抗氧化作用7-8：研究结果证实芒果皮黄酮200mg/（kgd）、400mg/（kgd）剂量组可提高小鼠血液碳粒廓清速率；在体外能显著增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红的能力，免疫调节及抗氧化作用均呈剂量效应关系。王晓波等9研究发现芒果叶中总黄酮对O2-及OH自由基具有一定的清除能力，清除能力与浓度有明显的量效关系，即随浓度增加而增加。芒果叶中总黄酮类成分体外可抑制H2O2诱导肝匀浆的脂质过氧化作用，能减少H2O2诱导的红细胞溶血的发生。研究结果提示芒果中的黄酮类化合物具有免疫调节及抗氧化作用，芒果叶中富含黄酮类成分，具有广泛的开发前景和利用价值，有进一步综合开发的价值。芒果果实以其形、色、香、味俱佳而有“果王”之称，在热带、亚热带地区著名出口水果中占有重要的地位。我国是芒果主要生产国之一，广泛分布于广东、台湾、广西、海南以及福建、云南、四川等省、自治区，且四季均可采摘，芒果叶与芒果果实中均含黄酮类成分，芒果叶药材资源非常丰富。但目前缺少芒果叶开发的文献报导，限制了其临床应用。应合理开发芒果叶资源，加强其药效基础研究，为临床应用提供充分的药学、药理学依据，亦有待在系统的药效学、药代动力学、分子药理学和制剂学等方面进行进一步的研究工作5。本试验结果表明，不同采收期芒果叶中黄酮的含量有差别，其中以1月、11月份总黄酮含量较高，57月含量最低。故在进行芒果叶中黄酮成分的研究时应注意采收期的影响。参考文献1广西壮族自治区卫生厅.广西中药材标准M.南宁：广西科学技术出版社，1992：54.2邓家刚，曾春晖.芒果叶及芒果苷30年研究概况J.广西中医学院学报，2003，6（2）：44-49.3张小坡，裴月湖，刘明生，等.海芒果叶中黄酮类成分的研究J.世界科学技术（中医药现代化），2010，12（3）：423-425.4汪敏，王维民，陈良.金黄芒果废弃物中总类黄酮含量的测定J.农产品加工学刊，2006，85（12）：42-44.5黄锁义，黎海妮，唐玉莲，等.超声波提取芒果叶总黄酮J.中国现代应用药学，2006，23（6）：455-456.6彭新生，周艳芳，王孔治，等.正交试验法优选仙鱼汤的提取工艺研究J.广东医学院学报，2008，26（2）：126-128.7汪敏，王维民，谌素华.芒果皮黄酮的免疫调节作用J.食品研究与开发，2010，31（8）：23-25.8文良娟，刘昊，王维