不同波长下测定药品有关物质的讨论.doc

不同波长下测定药品有关物质的讨论某片剂，主药在220nm、254nm下均有较强吸收，254nm吸收值约比220nm大一倍，含量测定采用254nm，现想对该药物进行有关物质检查，波长初步选择为254nm，经查国内外相关文献，并无该药品的有关物质检查报道，我们想在质量研究中增加在不同波长下考察有关物质的大小试验。现分别采用220nm和254nm进行同一份样品进行有关物质检测，大致现象为:(1)220nm：杂质峰面积明显增大，主峰峰面积明显减小，故归一化法杂质明显增大，总杂质约1.5%，新增2个杂质，共5个杂质；(2)254nm：杂质峰面积小，主峰面积大，归一化法总杂质约0.3%，共3个杂质；试问，在这种情况下，该如何合理的对比杂质大小、个数？（丁香园版主，lyslinjiu）我资料中体现了粗品与强制降解产物的全波长扫描，当时考虑到各杂质的最大吸收均在280nm，因此就选择了280nm作为有关物质的检测波长，当时也比较了低波长处的归一化限度均小于280nm，但是没有写到资料里去，因此感觉比较冤。这也体现出目前对杂质研究的重视，对于杂质来说在有较强吸收的地方，分别比较杂质的检出个数与总量，最终根据杂质的量与个数确定合适的波长，当然DAD检测器成为首选，以粗品与降解产物进行DAD测定是目前的基本要求，审核人员希望看到你为建立专属性强的方法做了全面的工作，所选波长基本能检出所有杂质，并且杂质量也是最多的。曾经咨询过专家的意见，很多品种含量下降与有关物质增加不符合，甚至相差510倍，建立专属的有关物质方法是现在审核的中心。基于上述理由严重建议做充分的工作，比较粗品与强制降解产物的杂质检出个数与数量（你新增的杂质不一定是新增，可能由于浓度低而未检出，采用强制降解一般不会出现上述问题，毕竟有关物质与样品的母体基本相同），最终确定有关物质波长，你的理论上应该选择220nm而非254nm。最好以DAD检测器得到的结果来证明。首先254nm是苯环的B带吸收。1.杂质如果在此没有吸收的话，他很可能不具有苯环结构，这样的杂质有点超出一般意义下的杂质，这样的杂质与主药没有直接的关系，可能来源于合成的起始原料等，具体可以参考合成工艺分析，由于一般带有苯环的不太会后加苯环，这样的可能性比较小。2.杂质在254你们有最大吸收，单由于杂质的吸收度小无法检测出，这样的选择254nm是可以的。或者在此的吸收系数比较小，这样的需要加校正因子校正。选择低波长是比较有风险的，国家局的意思也是要跟低波长处的进行比较，他可能希望看到此处的数据，譬如210nm检出0.5%杂质，280nm检出0.4%杂质，但是低波长的干扰较大，或者某些残留溶剂再此也有峰，选择280nm也是可以的，210nm0.5%的杂质、280nm0.4%的，你选择280nm总会找出一些理由，如果你没有给出低波长下的数据审评人员心里没数可能就要补你，固确定多出的这2个杂质是需要关注的。“说得有点复杂哈，简单一点，主药和杂质通常情况下在一个波长下均有吸收，怎么证明我选择主药的最大吸收是合理的？”证明杂质与主药的相应因子在0.91.1之间，也可以反推220nm的相应因子超过了1.1，所以检出的量是大的、假的。实际上制剂大于0.2%的未知杂质需要结构确证的，因此最好搞到该杂质的对照品，证明其220nm处其相应因子不在0.91.1之间。原料是合法来源，但可能没有控制有关物质，如果有控建议参考其标准。220nm杂质已经超标，最好不表述。如果表述则需要证明其不合理性。否则上述信息让审评人员知道，1.5%与0.3%不研究明白肯定让你再行研究。（丁香园版主，lwinna）实际上制剂大于0.2%的未知杂质需要结构确证的，因此最好搞到该杂质的对照品，证明其220nm处其相应因子不在0.91.1之间。（丁香园准中级站友，悠云水榭）摩尔吸收系数的比值在0.91.1，这是使用主成分自身对照法的冲要条件，否则需采用自身对照法或者加校正因子的主成分自身对照法等。这一切的前提都是得到杂质对照品，目前制剂杂质大于0.2%的也需要拿到杂质对照品，并进行结构确证，确定安全性，目前申报的门槛大大提高了，是我辈的不幸啊。如果时间不允许也只能装作不知道，看审评中心的老师是否知道，他也不知道那就万事大吉，他知道那只能再补。你这个品种一旦涉及到220nm，你里面就有超过0.2%的杂质，需要按照指导原则进行，目前的政策就是不能有超过0.2%的杂质出现，超过了结构确证，有文献报道该杂质安全，则不需要进行安全性试验，否则进行。 （丁香园版主，lwinna）220nm：杂质峰面积明显增大，主峰峰面积明显减小，故归一化法杂质明显增大，总杂质约1.5%，新增2个杂质，共5个杂质；在220nm处归一化法检测杂质要充分考虑辅料的干扰，因为辅料在此波长均有很强的吸收，若为小剂量产品，小药丸説的在220nm主药和杂质各占50%左右是很有可能的，若必需在220nm处检测杂质，一定要减去辅料的吸收，但辅料降解产物的影响仍然是未知数。（丁香园战友，hurley123456）有关物质波长的选择最好是有杂质对照品，先确定每个杂质的最大吸收波长，然后选择主药最大吸收波长附近的波长作为检测波长，且该波长下杂质要有较大的吸收值，然后研究响应因子。此条国内一般不愿去做，工作量大，费用高，但是是以后的方向。选择粗品和破坏的全波段扫描，来确定不同波长下的有关物质情况，比如杂质数目，杂质的归一化百分比等，但是不是有关越高越好，最好还是选择和主药与杂质的最大吸收波长最接近的波长。 （丁香园战友，damotuoling）个人认为，有关物质的研究在国内还是处在尴尬的境地，即使选择了杂质最大的波长仍然不能保证把所有杂质都检测出来，用液相方法只是比薄层先进