淡水鱼产品中二甲胺的含量分析.doc

淡水鱼产品中二甲胺的含量分析池叶艳*，胡洋洋，郑元建，王慕华(丽水学院 化学系，浙江 丽水 323000)The Determination of Dimethylamine Concentration in Ou River ProductsChi Yeyan*, Hu Yangyang, Zheng Yuanjian, Wang Muhua(Deparment of Chemistry, Lishui University, Lishui 323000, China)Abstract: An GC-FID method for determination of dimethylamine (DMA) in freshwater products in Ou River was utilized in the study. The experiment were determined various samples of dimethyl-amine which was changing over time in different time periods. After samples of dimethylamine by extraction and derivatized. The production will be analyzed by gas chromatography. The results showed: the freshwater products with dimethylamine content changing with time after death, between the 012 hours after death the dimethylamine content present the rising tendency, the highest point was on 12 hours, and then the 012 hours after death decreased gradually.Keywords: dimethylamine (DMA)；Ou Rive products；death the time二甲胺是一种常见低分子有机胺，通常存在在自然环境和水产品中。研究表明，二甲胺在亚硝基和一些含硝基化合物在胃里易形成致癌物质 N-亚硝基化合物1-2。我国目前对二甲胺等低分 子有机胺的检测多数集中在工厂废水，车间空气及自然环境的空气中，对于海产品中的二甲胺也有一定的涉及，但是对于淡水鱼 中的二甲胺的含量暂时还没有相关的研究。丽水，温州是瓯江的主要流域地，瓯江属于淡水水域，其中的 鱼类是所属地域中人们所食鱼类的主要来源。瓯江淡水鱼中的二甲 胺含量，对该地区人们的生活，饮食和身体健康有着重要的含义。1 材料与方法1.1 材料与试剂 大眼华鳊，鳜鱼，花鱼骨，鲫鱼，餐条，市购。 三氯乙酸(AR)，二甲胺盐酸盐(AR)，甲苯(AR)，KOH(AR)，对甲苯磺酰氯，无水硫酸钠(AR)，对甲苯磺酰氯甲苯溶液，配制：将对甲苯磺酰氯溶于甲苯溶液使浓度为 40 mg/mL。1.2 仪器与设备Aglient GC6890 气相色谱；TDL-4 型低速台式离心机(上海安亭科学仪器厂)；HHS 型电热恒温水浴锅(上海博讯实业有限公司医疗设备出品)。1.3 实验条件1.3.1 色谱条件3色谱柱：HP-5 毛细血管柱(30 m0.32 mm，0.25 m)；程序升温：100 保持 1 min，以 25 /min 升温至 190 ，保持 1 min，再以 5/min 升温到 220 保持 1 min，然后以 25 /min 升温到 270 保持 3 min，不分流；载气(N2)流速：2 mL/min，进样量：1 L；数据处理：Agilent Chemstation。1.3.2 水产品中二甲胺的提取2.2 样品死亡时间对二甲胺的影响 考察不同死亡时间段，淡水鱼中二甲胺的生成含量的变化，在 0、3、6、12、18、24 h，这 6 个不同的时间段所测定的结果如 图 13。1.11.00.90.80.70.60.50.4-20 24 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24Time/h26图 1花鱼骨中二甲胺含量随时间的变化Fig.1 Dimethylamine content changes with time0.70.6称取 45 g 样品，加入 5 mL 7.5 %三氯乙酸，充分研磨至肌 肉组织粉碎，在实验环境下，3500 r/min 离心 20 min，取上清液4。1.3.3 衍生取 4 mL 上清液，加入 4 mL 65 % KOH，加入 2 mL 蒸馏水，再加入对甲苯磺酰氯甲苯溶液 4 mL，60 水浴加热 1 h，取出0.50.4冰水浴冷却，离心 3 min，分离取上层有机溶液层，加入到含有 1 g 无水硫酸钠的试管中，除水分离，然后进行 GC-FID 分析5。2 结果与分析2.1 二甲胺盐酸盐标样的气相色谱分析 由于二甲胺具有易挥发，低沸点等特点，如果不经衍生，很难取得二甲胺，并长久存放。配制一定浓度的二甲胺盐酸盐标样，按照 1.3.3 的实验方法进行衍生和提取，进行 GC-FID 分析。产物 进一步经过 GC-MS 确证，为衍生反应的主要产物二甲胺-对苯 磺酰胺。得到结果与理论6相同。0.30.2-2 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26Time/h图 2 鲫鱼中二甲胺含量随时间的变化Fig.2 Dimethylamine content changes with time收稿日期 2011-05-17Content/( ugg-1)Content/( ugg-1)摘 要采用气相色谱-FID 对瓯江淡水鱼中的二甲胺进行检测。本实验对样品中的二甲胺随时间的变化进行了不同时间段的测定。样品中 的二甲胺经提取，衍生后的生成物在确定的气相色谱条件下进行分析。结果显示：死亡后的淡水鱼中的二甲胺含量随时间的延长而发生变化， 在死亡后的 012 h 之间，二甲胺含量曲线呈上升趋势，在 12 h 达到最高点，随后的 12 h 呈逐渐下降趋势。关键词二甲胺(DMA)；瓯江淡水鱼；死亡时间中图分类号O65文献标识码A文章编号1007-1865(2011)10-0143-02图 1 为花鱼骨，早上 8 点 30 分死亡后，立即相隔 3、6、12、18、24 h 后，对鱼肉中的二甲胺进行提取，衍生，GC-FID 测定的二甲胺的含量直观图。由图 13 可以得出以上三种鱼中二甲胺的含量在 012 h 之间 随时间的延长而增加，这与氧化三甲胺酶的活性有直接关系。鱼类中的二甲胺是由鱼类中的氧化三甲胺被氧化三甲胺酶的作用下 分解产生得到的。Nelson5研究发现不同鱼类，不同个体之间的酶的活性差异很 大，因此产生二甲胺的能力也有很大差别。在实验进行的第 12 h 时为晚上 2021 点之间，当时的气温为 夜晚温度，相对较低，抑制了氧化三甲胺酶的活性，此时鱼类的 二甲胺含量为一天内含量最高，累积最多。实验结果与理论6相 符合。2.3 部分瓯江淡水鱼中不同时间段中二甲胺的含量分析 本实验对部分市售瓯江淡水鱼中的二甲胺含量随死亡时间的推移进行分析，其二甲胺含量如表 1 所示。根据表 1 所示，淡水鱼中二甲胺含量在 0.22.5 g/g 之间不等。0.70.60.50.40.30.2-20 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26Time/h图 3Fig.3大眼华鳊中二甲胺含量随时间的变化Dimethylamine content changes with time表 1 瓯江中淡水鱼不同时间段中二甲胺的含量Tab.1 Dimethylamine content in different time of fresh water fish in Ou river二甲胺的含量/(gg-1)0 h3 h6 h12 h18 h24 h大眼华鳊鳜鱼 花鱼骨 鲫鱼 餐条0.25910.22470.50890.27900.36860.33400.25980.79890.38370.63300.39650.30380.86620.41700.70120.68450.40201.0650.64082.57380.47050.34100.65200.42041.65270.35880.28540.46970.19330.67533 结论本实验中分析的淡水鱼均为欧江中的淡水产品，并且为新鲜水产品，实验中样品均没有在冷藏情况下，本实验中鱼类均采取其肌肉为实验材料，其实验气温在 015 之间，相对较冷。 采用 7.5 %三氯乙酸提取瓯江中淡水鱼中的二甲胺，衍生时间为 1 h，温度为 60 。在此实验条件下，实验结果显示：在 0，3，6，12，18，24 h，这 6 个不同时间段，二甲胺在死亡的新鲜淡水鱼中的含量不同，当场死亡的鱼在事隔 12 h 之间，其肌肉中的二甲胺含量随时间的延长呈逐渐上升的趋势，在 1112 h 时二甲胺在鱼类中含量达到最大，其含量在 0.42.5 g/g 不等。ndM2 edBaffinsLane，Chichester，England：John Wily and Sins Ltd，19933贾佳，朱军莉，励建荣气相色谱-氢火焰离子检测器检测海产品中的 二甲胺J食品科学，2009，30(6)：167-1704Benjakula S，Visessanguanb W，Tueksuban JChanges in physicochemicalproperties and gelforming ability of lizardfish (Saurida tumbil)during postmortem storage in ice Food Chemistry，2003(80)：535-5445Nielsen M K ， Jorgensen ， B M Quantitative relationship betweenTrimethylamine Oxide aldolaseactivity and formaldehyde accumulation in white muscle from Gadiform fish during frozen storageJAgric Food Chem，2004(52)：3814-38226夏涛龙头鱼甲醛、二甲胺和氧化三甲胺含量的研究D中山大学生 命科学学院，2007，12参考文献1Abalos M，Bayona J N，Ventura FDevelopment of a solidphase m icroextraction GCNPD procedure for the determ ination of free volatile amines in wastewater polluted watersJAnal Chem，1997，71(16)：3531-35372Blau K，Halket J MHandbook of derivative for chromatography(本文文献格式：池叶艳，胡洋洋，郑元建，等淡水鱼产品中二甲胺的含量分析J广东化工，2011，38(10)：143-144)(上接第 167 页)CH3参考文献1李少芬有机化学教学中导入新课的几种方法J安徽卫生职业技术学 院学报，2002，1(1)：80-82 2畅克平有机化学教学中突破难点的做法和体会J医学检验教育，1995(4)：36-383安从武优化有机化学课堂教学过程J科技资讯，2008，36：197-1974王茹林有机化学中的电子效应J基础医学教，2002，4(3)：260-2615李敬芬有机化学教学难点问题的有效教学设计J黑龙江医药科学，2005，28(5)：94-956傅建熙，张坐省有机化合物的结构和性质相关规则及其应用J西北 农业大学学报，1993，21(4)：81-857张培志，吕守茂，周孝瑞，等基于自主学习能力培养的有机化学教学 初探J浙江科技学院学报，2008，20(4)：304-3068陈风雷，李智提高有机化学教学效果的探索科J科技创新导报，2008，36：153-153CI + 0.067NO2+0.058-0.017-0.017+0.001+ 0.001+0.001+0.052-0.011-0.015图 3 邻、对位和间位定位基对苯环各碳原子上电子云密度分布的影响Fig.3 Effect of Ortho position and orientation between the base toBenzene ring of carbon atoms on the electron density distribution总之，教师可根据教学要求和学生实际，在有机化学的教学实践过程中，通过对整个课程的科学教学设计、每次课堂精心的教学设计及重点和难点有效设计，优化有机化学课堂教学过程，来