[生物医药论文精品]川芎中藁本内酯的分离鉴定及药材质量标准研究

川芎中藁本内酯的分离鉴定及药材质量标准研究摘要目的分离藁本内酯对照品对川芎质量标准进行研究。方法采用硅胶柱层析对川芎中藁本内酯进行分离，UV、1HNMR、13CNMR等波谱分析技术鉴定分离成分，并用HPLC法对药材中的藁本内酯进行含量测定。结果分离成分经鉴定，为Z藁本内酯；经测定，其药材中含量不低于070。结论以藁本内酯为对照品建立的含量测定方法将为川芎质量标准提升提供理论依据。关键词川芎；藁本内酯；成分分离；含量测定LIGUSTILIDESEPARATIONANDSTUDYONCHUANXIONGQUALITYSTANDARDSABSTACTOBJECTIVELIGUSTILIDEREFERENCESUBSTANCESEPARATIONFORCHUANXIONGQUALITYSTANDARDSRESEARCHMETHODCOMPOUNDWASISOLATEDWITHSILICAGELCHROMATOGRAPHYANDIDENTIFIEDBYMEANSOFSPECTRALANALYSIS,SUCHASUV、1HNMR、13CNMRHPLCMETHODWASESTABLISHEDTODETERMINETHELIGUSTILIDEINHERBSRESULTCOMPOUNDWASIDENTIFIEDTOZLIGUSTILIDEANDDETERMINEDNOLESSTHAN070INHERBSCONCLUSIONTHEESTABLISHMENTOFTHEDETERMINATIONOFLIGUSTILIDEWILLPROVIDEATHEORETICALBASISOFRAISINGCHUANGXIONGQUALITYSTANDARDSKEYWORDSLIGUSTILIDECHUANXIONG,LIGUSTILIDE,SEPARATIONOFCOMPONENTS,CONTENTDETERMINATION川芎为伞形科（UMBELLIFERAE）植物川芎LIGUSTICUMCHUANXIONGHORT的干燥根茎，具有活血化瘀、祛风止痛的功效A1A0A2。现代化学和药理研究表明A3藁本内酯具有抗血小板聚集，松驰子宫和气管平滑肌，抑制中枢神经系统等活性2A43，在川芎中可达1以上4，在川芎挥发油中达30以上5。因此，藁本内酯可作为川芎药材质量评价的G6363标成分G1055G980。本研究对川芎药材中藁本内酯进行G1114分离鉴定，建立G1114HPLC测定川芎中藁本内酯的方法，并对川芎G1039G1147G3332药材中的藁本内酯进行G1114含量测定，提G1998G1114川芎中藁本内酯的质量G6523制G6363标。1仪器与材料LC10AG20652效G9094G11468G14406谱G1214（G7097本G4719G8953G1856G2508）；CLASSVPG5049作G12461（G7097本G4719G8953G1856G2508）；SPD10AG13055G3818G7828测G3132（G7097本G4719G8953G1856G2508）；G37G85G88G78G72G85G3G36G89G68G81G70G72G3G25G19G19G7692G11925G1861G6403G1214（G10802G3775G37G85G88G78G72G85G1856G2508）；G13055G3818可G16277分G1821G1821G5242G16757G149G57G16G57G44G54G3G27G24G19G19G11G7092G19189科达G1856G2508G12；BP211DG11017子分析G3837平（G2325G987分G1055G980，G5515G3281SARTORIUSG1856G2508）；G37G56G42G21G24G16G20G21G17241G3780波G9177G8939G7438（G21G24G78G43G93，G24G19G19G58，上G9035G5529G14033G1461G17241G3780波有G19492G1856G2508）；G53G16G21G19G20G3423G7071G17728G14988发G1214（上G9035G11015G14000G10995物技术有G19492G1856G2508）。G3层析硅胶（100200G11458、300400G11458，G19750G4719G9035G8927化G5049G2390），G11014G18267（G14406谱G13443，TEDIAG1856G2508），其G4439G16809G2070G3355为分析G13443（成G18129G5078科G21869化G5049G16809G2070G2390）。川芎药材于2007G519211G7388G14270G17153于G18129G8755G3588G5476G9205G1077川芎GAPG3534G3332，经成G18129中G2319药G3835学中药鉴定G6957研G4472G19484G7044G2115G6957G6492鉴定为LIGUSTICUMCHUANXIONGHORT的干燥根茎。2方法及结果G21G20藁本内酯的分离鉴定211制G3803G5049G14414G726川芎G12907G1289315KG，乙G18267渗漉，提取物上硅胶柱层析，以石油醚（6090）乙酸乙酯混合溶G2070梯G5242G8939脱，TLCG7828查合并G11468同组分，再进行石油醚（3060）乙醚G8939脱，得G13443品。G2112结构鉴定G726该化合物为淡黄G14406油状物，略有酯香味；UVMAXNMG726208，280，320；1HNMR、13CNMR数据与文献6数据对照，鉴定为Z藁本内酯。波谱数据及其归属G16277表1，结构式G16277图1。TABLE11HNMRA513CNMRA6CDCL3A7DATAANDATTRIBUTIONOFCOMPOUDLOCATION1HPPM1HSHAPHNO13CPPM1167543148513A147194261DD228095248M222366602M1130027628D1116877A123808523T1112939238Q2223410150M2184411096T31373OO133A4577A891011FIG1ZLIGUSTILIDEG21G21G3藁本内酯稳定性研究G3G3G3G3G3文献7,8报道，藁本内酯在G4472温条件下极不稳定，保存15DG13443G5242由9948降至4197，4冰箱中5D后含量就降到8667；藁本内酯在氯仿中可稳定保存1G5192。实验研究表明，藁本内酯对照品在18冰箱中90D内含量几乎没有变化，可G16277避G1821低温有利于保存。G213G3川芎药材中藁本内酯的HPLC含量测定G3G213G20G3G14406谱条件G726G14406谱柱G726HYPERSILODSC18（46MM200MM，5M）；流动G11468G726G11014G18267水（G25G19G7264G19）；流速G20G19ML/MIG81；G7828测波长3G21G19G81M。在此G14406谱条件下，川芎药材中藁本内酯与其G4439组分G14033达到G3534线分离（G16277图G21）。G3G3A8A9A10A11A12A10A11A13A14A15A16A15A16A17A16A18A19A20A21A22A23A20A10A19A22A21A19A20A21A23A20A20A24A19A25A24A25A19A25A26A27A25A28A29A30A28A23A22A26A27A25A22A26A31A28A22A21A32A33A25A30A28A23A22A27A25A33A25A34A35A36A37A38A37A36A37A39A40A37A41A42A43A41A44A45A39A40A37A46A47A35A41A45A48A49A50A37A46A45A35A51A52A53A54A55A42A41A44A54A50A54A56A37G213G21G3对照品溶G9094的制G3803G726取藁本内酯对照品约G25G19MG，精密称定，置G21G24ML容量瓶中，加G11014G18267溶解并稀释至刻G5242，摇匀，得浓G5242为G214G21MG/ML的对照品储G3803G9094，精密量取G20ML，置G20G19ML容量瓶，加G11014G18267稀释置刻G5242，摇匀，即得。G2133G3供G16809品溶G9094的制G3803G726取药材G12893末过3号筛05G，精密称定，置50ML具塞锥形瓶中，精密加入G11014G1826725ML，密闭，称重，G17241G3780提取45MIN后取G1998，称重，加G11014G18267补足失重，摇匀，滤过，取续滤G9094，即得。G2134线性范围考察G726分别精密吸取G19G21ML、G19G24ML、G20ML、G20G24ML、G21ML的藁本内酯对照品储G3803G9094，置G20G19ML容量瓶中，加G11014G18267稀释置刻G5242，摇匀，得浓G5242分别为G19G194G274MG/ML、G19G20G21G20G3MG/ML、G19G214G21G3MG/ML、G193G253G3MG/ML、G194G274G3MG/ML的对照品溶G9094，吸取上述不同浓G5242的对照品溶G9094各G20G19L，分别进样测定，以藁本内酯质量X（G）对峰面积积分值A进行线性回归，得标准曲线方程A2167715X116629，R09998，表明藁本内酯在0484G484G范围内与峰面积积分值G2588G14403G3921的线性G1863系。G3G213G24G3精密G5242G16809验G726取对照品溶G9094，依G17885定的G14406谱条件G17842续进样6G8437，测定峰面积，其RSD为058N6。G213G25稳定性G16809验G726分别取对照品溶G9094和供G16809品溶G9094于G7849G14406瓶中，密闭、G4472温保存。于0，2，6，12，24H进样2G8437，测定藁本内酯的峰面积，其RSD分别为038，086N5。G16840明藁本内酯在此溶G9094中稳定性G14403G3921。G213G26G3重G3809性G16809验G726取同G980样品G12893末6G1233，照供G16809品溶G9094制G3803方法制成供G16809品溶G9094，进样测定，G16757G12651藁本内酯的含量，其RSD为189N6。G16840明此方法重G3809性G14403G3921。G213G27G3加样回G6922G10587G16809验G726取G5062G11705藁本内酯含量的川芎药材约025G，6G1233，精密称定。分别精密加入藁本内酯量的对照品溶G90945ML和10MLG11014G18267。G6365照供G16809品溶G9094制G3803方法制成供G16809品溶G9094，分别测定藁本内酯的含量。其平G3355回G6922G10587为9627RSD28，N6。TAB2AVERAGERECOVERYOFLIGUSTILIDESAMPLESCONTENT/MGADDED/MGFOUND/MGRECOVERY/AVERAGERECOVERY/RSD/118751213018978221862121298796883188412130059709986252134179912130861025651858121301198146192112131089926G213G28G3样品测定G726取川芎样品10G1233，G6365供G16809品溶G9094的制G3803方法制成供G16809品溶G9094，各进样10L测定2G8437。根据回归方程G16757G12651样品中藁本内酯的含量。结G7536表明药材中藁本内酯含量不低于070。3讨论31G1268统方法提取川芎挥发油G3822采用水G14988气G14988G20323提取，提取温G5242G20652，G1000G14988G20323G9094为油水混合物，不G7143分离，得G10587低；本实验采用乙G18267渗漉提取川芎油，条件温和，经G8994G20652效，G14033G1363川芎中挥发油G12879成分不G15999G11784G3363，得到G17751G3921的分离。32川芎药材现有标准（G457中G3281药G1868G4582005G5192G10268）G4590G7092含量测定，本实验对川芎中有效成分藁本内酯进行G1114分离鉴定，并以此为对照品，建立G1114HPLC含量测定方法，G6164G1582G5049作将为川芎药材标准的提升提供理论依据。G3参考文献1ZHANGTMTHECHINESEHERBALPHARMACYCHANGSHAHUNANSCIENCEANDTECHNOLOGYPUBLISHINGHOUSE，2002，2552562SATCMOFCHINESEHERBALMEDICINEEDITORIALBOARDTHECHINESEHERBALMEDICINEVOL5SHANGHAISHANGHAISCIENCEANDTECHNOLOGYPUBLISHINGHOUSE,1999976,8933TAOJYANGELICACOMPONENTLIGUSTILIDESEFFECTOFANTIA