实验五 放线菌形态观察PPT演示课件

放线菌形态的观察 1 放线菌形态的观察 目的要求实验材料实验程序思考题 2 目的要求 学习观察放线菌的基本方法加深理解放线菌的形态特征 3 实验材料 放线菌培养物 费氏链霉菌 Streptomycesfradiae 或 5406 产生菌 St microflacus 细黄链霉菌四天培养物 显微镜 载玻片 接种环 解剖针 解剖刀 酒精灯 镊子等 酒精 蒸馏水等 4 G GC含量高 和另一类阳性菌 厚壁菌门相比 好氧 少部分寄生兼性厌氧放线菌重要的属有 放线菌属 Actinomyces 节杆菌属 Arthrobacter 棒杆菌属 Corynebacterium 弗兰克氏菌属 Frankia 微球菌属 Micrococcus 微单孢菌属 Micromonospora 分枝杆菌属 Mycobacterium 诺卡氏菌属 Nocardia 丙酸杆菌属 Propionibacterium 链霉菌属 Streptomyces 5 1 链霉菌属 Streptomyces 分枝菌丝孢子体或气生菌丝菌丝无横隔好氧原核生物降解高分子底物生长条件简单抗生素 6 2 棒状杆菌属 Corynrbacterium 谷氨酸棒杆菌 C glutamicum 味精生产菌氨基酸生物合成调节机制白喉棒状杆菌 C diphtheriae 7 3 分枝杆菌属 Mycobacterium 不规则杆状菌抗酸性染色细胞壁含有大量的脂类和分枝菌酸结核分枝杆菌 麻风分枝杆菌 8 抗生素 链霉素灰色链霉菌 Streptomycesgriseus 四环素红霉素新霉素庆大霉素 9 FilamentousActinomycetes TypicalappearanceofastreptomycetegrowingonagarslantsThecolorsareduetotheproductionofpigments 10 FilamentousActinomycetes Antibioticactionofsoilmicroorganismsonacrowdedplate streptomycetes Bacillus 11 插片法 1 倒平板2 接种 划线培养3 插片 无菌操作将盖玻片以大约45度角插入培养基4 培养倒置培养28 通常4 6天5 镜检 12 插片法 28 插片培养4 6d 轻轻取出盖玻片 直接观察镜检 观察菌丝和孢子丝自然生长的性状 其中包括气生菌丝 较粗 基内菌丝 较细 和孢子丝的形状 如分枝状况及孢子丝的卷曲等 并绘图说明 本实验采用费氏轮生菌接种后观察 首先寻找插在培养基的界面分界线 观察营养菌丝 气生菌丝形态及分枝情况 调节亮度直接镜检 13 14 FilamentousActinomycetes Stagesintheconversionofastreptomycete s 链霉菌 aerialhyphaintospores conidia 15 16 Varioustypesofspore bearingstructuresinthestreptomycetes 17 FilamentousActinomycetes Severalspore bearingstructuresofactinomycetes Streptomyces 18 19 20 浸染法放线菌形态观察 插片培养 高氏1号培养基 取片浸染 把盖玻片上长有放线菌的部分 放入石碳酸复红染液池中浸染0 5 1min染色液 A液 碱性复红0 3g 95 乙醇10ml B液 石碳酸5 0g 蒸馏水95ml 染色时 混合A液及B液 再将混合液稀释5倍即成 干燥 染色完毕 用吸水纸吸掉盖玻片上多余的染液 将盖玻片放于酒精灯火焰上部烘干 注意温度不宜高 以免盖玻片碎裂 镜检 取一洁净载玻片 滴入适量蒸馏水 用镊子将干燥好的盖玻片放在滴有蒸馏水的地方 有菌的一面朝上 操作中尽量避免气泡的产生 盖玻片紧紧地贴附在载玻片上后 切勿随意移动 随即进行显微观察 21 插片法放线菌菌丝 40 插片法浸染法菌丝 40 插片法浸染法放线菌孢子 100 插片法浸染法放线菌孢子 100 22 印片染色法 1 接种培养28 培养4 7d2 印片 用镊子取一小块菌苔 置于载玻片上 取另外一洁净玻片盖在菌苔上 轻轻粘一下菌苔表面 使培养物 气丝 孢子丝 孢子 粘附载玻片中央 过火焰2 3次固定3 染色 石炭酸复红染色1min 水洗4 镜检 油镜 23 印片法放线菌孢子 100 印片法放线菌菌丝 100 印片法放线菌孢子 100 24 浸染法放线菌形态观察 取片 石碳酸复红浸染0 5 1min 干燥 注意温度不宜高 镜检 滴入适量蒸馏水 将盖玻片放在滴有蒸馏水的地方 有菌的一面朝上 显微观察 载玻片 印片 固定 石炭酸复红染色1min 水洗 晾干 油镜5406菌孢子丝的形状 如分枝状况及孢子丝的卷曲等 并绘图说明 印片染色法 25 思考题 在用插片法观察气生菌丝和孢子丝的形态时 要注意些什么 26 结束 27 实验 霉菌的载片培养 28 青霉 黑曲霉培养小室准