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文档简介
专题七选修内容 小专题19生物技术实践 1 微生物的实验室培养要点解读 1 培养基的主要种类 续表 2 消毒和灭菌的区别 3 纯化大肠杆菌的原理 在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞 使其长成单个的菌落 这些单个的菌落就是一个个纯化的细菌菌落 2 酵母细胞的固定化 1 实验原理 固定化酶不溶于反应液中 易于回收 可以重复使用 固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞固定于一定空间内的技术 2 直接使用酶 固定化酶 固定化细胞的比较 3 制备固定化酵母细胞取得成功的关键加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环 如果浓度过高 将很难形成凝胶珠 如果浓度过低 形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数量少 都会影响实验效果 溶化海藻酸钠时要用小火或间断加热 避免海藻酸钠发生焦糊 3 五种重要物质的提取 1 提取方法总结 续表 2 dna粗提取与鉴定 哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核 不适于作为dna提取的材料 但却是提取血红蛋白的理想材料 实验过程中两次用到蒸馏水 第一次目的是使成熟的鸡血细胞涨破 释放出dna 第二次目的是稀释nacl溶液 鉴定dna 加入二苯胺试剂并沸水浴加热 观察是否出现蓝色 3 血红蛋白的提取和分离操作程序 样品处理 红细胞的洗涤 除去血浆蛋白等杂质 血红蛋白的释放 使红细胞破裂 血红蛋白释放出来 分离血红蛋白溶液 经过离心使血红蛋白和其他杂质分离开来 粗分离 透析 除去样品中相对分子质量较小的杂质 纯化 一般采用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离和纯化 纯度鉴定 一般用sds 聚丙烯酰胺凝胶电泳方法 来鉴定蛋白质的纯度 4 植物有效成分的提取方法 蒸馏法 芳香油具有挥发性 把含有芳香油的花 叶等放入水中加热 水蒸气能将挥发性较强的芳香油携带出来 形成油水混合物 冷却后 油水混合物又会重新分成油层和水层 除去水层便得到芳香油 萃取法 需将植物材料浸泡在乙醚 石油醚等低沸点的有机溶剂中 使芳香油或色素充分溶解 然后蒸发出低沸点的溶剂 剩下的就是芳香油或色素 压榨法 橘子 柠檬 甜橙等植物的果皮中 芳香油的含量较多 可以用机械压力直接榨出 这种提取方法叫做压榨法 一 几种传统发酵技术的比较 续表 蛋白酶 脂肪酶 二 植物组织培养技术1 理论基础和基本过程当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于离体状态时 在一定的营养物质 激素和其他外界条件的作用下 就可能表现出全能性 发育成完整的植株 基本过程如下 1 内因 不同的植物组织 培养的难易程度差别很大 容易进行无性繁殖的植物也容易进行组织培养 同一种植物材料 材料的年龄 保存时间的长短也有影响 幼龄 保存时间短的植物材料容易培养成功 菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝 2 外因 无菌 营养物质 植物激素 注意使用的先后顺序 和环境因子 ph 温度 光照 等 2 影响因素 热点考向1 细菌培养的有关技术 例1 2011 全国新课标 有些细菌可分解原油 从而消除由原油泄漏造成的土壤污染 某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株 回答问题 1 在筛选过程中 应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基上 从功能上讲 该培养基属于 培养基 2 纯化菌种时 为了得到单菌落 常采用的接种方法有两种 即 和 原油 选择 平板划线法 稀释涂布平板法 3 为了筛选出高效菌株 可比较单菌落周围分解圈的大小 分解圈大说明该菌株的降解能力 4 通常情况下 在微生物培养过程中 实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌 和 无菌技术要求实验操作应在酒精灯 附近进行 以避免周围环境中微生物的污染 强 干热灭菌 高压蒸汽灭菌 火焰 解析 1 题中想筛选分解原油的菌株 应该以原油为唯一的碳源 培养基分为选择培养基和鉴别培养基 本题是筛选菌株 属于选择培养基 2 接种方法分为平板划线法和稀释涂布平板法 3 菌株的分解能力越强 分解的原油越多 则分解圈越大 4 微生物实验要求在无菌环境中操作 灭菌方法包括灼烧灭菌 干热灭菌和高压蒸汽灭菌 变式1 2011 湖南师大附中模拟 伴随着生命科学的新突破 现代生物技术已经广泛地应用于工业 农牧业 医药 环保等众多领域 产生了巨大的经济和社会效益 请回答下列生物技术方面的问题 1 工业生产上通常采用微生物发酵技术获得果胶酶 选用的微生物通常是 在提取细胞内的酶时 先将组织细胞 制取粗酶液 再进一步获得相应的酶 2 微生物一般来自土壤 在平板培养基上分离纯化细菌常用的接种方法是 和 等 曲霉 青霉 破碎 过滤和离心 平板划线法 稀释涂 布平板法 3 微生物在果酒 果醋 腐乳 泡菜等食品加工方面应用广泛 其中与果醋 泡菜制作密切相关的微生物分别是 醋酸菌和乳酸菌 4 右图为提取胡萝卜素的粗品通过纸层析鉴定的结果示意图 请据图回答问题 该图所示的鉴定方法的基线一般距底 cm 2 a b c d四点中 属于标准样品的样点是 点样的要求 在图中的层析谱中 图中 代表的物质是 该层析的目的是 而 叶绿体中色素的提取和分离 的实验中层析的目的是 a和d 保持干燥 点样应该快速细致 在基 线上形成2毫米左右的圆点 每次点样后滤纸都要 其他色素和杂质 胡萝卜粗品的鉴定 分离 叶绿体中色素 解析 1 题中想筛选分解原油的菌株 应该以原油为唯一的碳源 培养基分为选择培养基和鉴别培养基 本题是筛选菌株 属于选择培养基 2 接种方法分为平板划线法和稀释涂布平板法 3 菌株的分解能力越强 分解的原油越多 则分解圈越大 4 微生物实验要求在无菌环境中操作 灭菌方法包括灼烧灭菌 干热灭菌和高压蒸汽灭菌 热点考向2 植物组织培养技术 例2 2011 浙江卷 下列有关植物组织培养的叙述 正确的是 a 愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞b 二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株c 用人工薄膜将胚状体 愈伤组织等分别包装可制成人工种子d 植物耐盐突变体可通过添加适量nacl的培养基培养筛选而获得 解析 愈伤组织是在植物组织培养过程中 已经分化的细胞经过诱导失去其特有的结构和功能而转变成的未分化的细胞 二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到的是单倍体植株 只有一个染色体组的植物是高度不育的 人工种子是以植物组织培养得到的胚状体 不定芽 顶芽或腋芽经过人工薄膜包装后得到的种子 解析 d 变式2 2011 湖南师大附中模拟 下图是月季花药离体培养产生花粉植株的两种途径 请据图回答有关问题 1 选用的材料合适与否是能否成功诱导出花粉植株的重要因素 一般来说选用 期的花粉可提高成功率 选择花粉时 一般要通过 来确定花粉是否处于合适的发育期 这时需要对花粉的细胞核进行染色 常用的染色剂是 单核 镜检 显微镜观察 醋酸洋红 2 上图中花药经脱分化产生的是胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中 不管哪种途径 最终获得的完整植株都称为 必须对植株进行 才能使其结实产生后代 激素的种类及其浓度配比 单倍体 诱导染色体数目加倍 3 胚状体与愈伤组织在结构上的主要区别在于愈伤组织的细胞排列疏松 无规则 是一种高度 的薄壁细胞 胚状体与 发育形成的胚有类似的结构 即具有胚芽 胚轴和胚根 液泡化 正常受精卵 或受精卵 4 无菌技术也是成功诱导出花粉植株的重要因素 请说明 下列各项中需要灭菌的有 填编号 需要消毒的有 填编号 培养基 培养皿 接种环 花蕾 实验操作者的双手 三角锥形瓶 5 试管苗移栽到土壤前 通常要进行壮苗处理 应如何壮苗 将试管苗移栽到经消毒过的培养基中生活一段时间 等幼苗长壮后再移栽到土壤中 解析 此题考查植物组织培养的相关知识 应熟练掌握花药离体培养的基本原理及技术流程 热点考向3 dna等重要物质的提取 例3 2011 浙江卷 在利用鸡血进行 dna的粗提取与鉴定 的实验中 相关叙述正确的是 a 用蒸馏水将nacl溶液浓度调至0 14mol l 滤去析出物b 调节nacl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶 都可以去除部分杂质c 将丝状物溶解在2mol lnacl溶液中 加入二苯胺试剂即呈蓝色d 用菜花替代鸡血作为实验材料 其实验操作步骤相同 解析 dna在浓度为0 14mol l的nacl溶液中溶解度最小 dna析出 木瓜蛋白酶能够水解样品中的一部分蛋白质 dna溶解于2mol lnacl溶液中 在沸水浴条件下遇二苯胺试剂呈现蓝色 用植物材料提取dna时 需用洗涤剂处理材料以溶解细胞膜 答案 b 变式3 2011 江苏卷 下列与果酒 果醋和腐乳制作相关的叙述 正确的是 a 腐乳制作所需要的适宜温度最高b 果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵c 使用的菌种分别是酵母菌 醋酸菌 乳酸菌d 使用
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