第4章微生物生理

第四章微生物的生理 第一节微生物的酶 自学为主 酶是由细胞产生的 能在体内或体外起催化作用的具有活性中心和特殊构象的生物大分子 包括蛋白质类和核酸类酶 酶是生物体为其自身多谢活动而产生的生物催化剂 生物体内一切生化反应都需要酶的催化才能进行 1 酶的组成形式单成分酶 只含蛋白质 全酶 有3种形式 酶蛋白 非蛋白质小分子有机物如 脱氢酶酶蛋白 非蛋白质小分子有机物 金属离子如 丙酮酸脱氢酶酶蛋白 金属离子如 细胞色素氧化酶 一 酶的组成 酶的各组分的功能 1 酶蛋白起加速反应 催化 作用 2 辅助因子本身无催化作用 它的主要作用是 在酶促反应中运输转移电子 原子或某些功能基 如参与氧化还原的作用 协助活性中心基团快速转移等 金属离子除传递电子外 还可改变并稳定活性中心或改变底物化学键稳定性 起激活剂的作用 例如 羧肽酶中的锌离子 可稳定活性中心使肽键失稳 吸附羧氧原子 2 常见的辅酶和辅基重要的辅酶和辅基 铁卟啉 辅酶A CoA或CoA SH NAD 辅酶 和NADP 辅酶 FMN 黄素单核苷酸 和FAD 黄素腺嘌呤二核苷酸 辅酶Q CoQ 腺苷磷酸及其他核苷酸类 包括AMP ADP ATP GTP等 专性厌氧菌特有的辅酶 辅酶M F420 辅酶420 F430 辅酶430 等 1 辅酶A CoA 辅酶A是生物体内代谢反应中乙酰化酶的辅酶 功能 是传递酰基 是形成代谢中间产物的重要辅酶 A 酰基供体B 酰基受体 2 NAD 辅酶 和NADP 辅酶 NAD 烟酰胺 腺嘌呤二核苷酸 又称辅酶I 和NADP 烟酰胺 腺嘌呤磷酸二核苷酸 又称辅酶II 功能 是多种重要脱氢酶的辅酶 NAD是细胞内一种通用电子载体 3 FAD和FMN FAD 黄素 腺嘌呤二核苷酸 和FMN 黄素单核苷酸 功能 在脱氢酶催化的氧化 还原反应中 起着电子和质子的传递体作用 4 辅酶Q CoQ 辅酶Q又称为泛醌 其结构为 辅酶Q的活性部分是它的醌环结构 主要功能是作为线粒体呼吸链氧化 还原酶的辅酶 在酶与底物分子之间传递电子和氢 5 硫辛酸 硫辛酸是少数不属于维生素的辅酶 硫辛酸是6 8 二硫辛酸 有两种形式 即硫辛酸 氧化型 和二氢硫辛酸 还原型 6 焦磷酸硫胺素 TPP 焦磷酸硫胺素是脱羧酶的辅酶 功能 是催化酮酸的脱羧反应 7 磷酸吡哆醛和磷酸吡哆胺 磷酸吡哆醛和磷酸吡哆胺 磷酸吡多素是转氨酶的辅酶 转氨酶通过磷酸吡多醛和磷酸吡多胺的相互转换 起转移氨基的作用 8 生物素 生物素是羧化酶的辅酶 生物素的功能是作为CO2的递体 在生物合成中起传递和固定CO2的作用 9 四氢叶酸 FH4或THFA 四氢叶酸是合成酶的辅酶 其前体是叶酸 又称为蝶酰谷氨酸 维生素B11 四氢叶酸的主要作用是作为一碳基团 如 CH3 CH2 CHO等的载体 参与多种生物合成过程 二 酶蛋白的结构 氨基酸由肽键连接成多肽链 以氢键连接成二级结构 多肽链进一步弯曲成三级结构 几十个亚基形成四级结构 一级结构 primarystructure 是指多肽链的氨基酸残基的排列顺序 也是蛋白质最基本的结构 它是由基因上遗传密码的排列顺序所决定的 各种氨基酸按遗传密码的顺序通过肽键连接起来 二级结构 secondarystructure 指多肽链借助于氢键沿一维方向排列成具有周期性的结构的构象 是多肽链局部的空间结构 构象 主要有 螺旋 折叠 转角等几种形式 它们是构成蛋白质高级结构的基本要素 三级结构 tertiarystructure 针对球状蛋白质而言的 是指整条多肽链由二级结构元件构建成的总三维结构 蛋白质特定的空间构象是由氢键 离子键 偶极与偶极间的相互作用 疏水作用等作用力维持的 疏水作用是主要的作用力 有些蛋白质还涉及到二硫键 四级结构 quaternarystructure 是指在亚基和亚基之间通过疏水作用等次级键结合成为有序排列的特定的空间结构 亚基是由一条或几条多肽链在三级结构基础上形成的小单位 四级结构不是所有的蛋白质都具有 二级结构 三级结构 四级结构 胰岛素的三级结构 溶菌酶分子的三级结构 磷酸丙糖异构酶和丙酮酸激酶的三级结构 丙酮酸激酶 磷酸丙糖异构酶 三 酶的活性中心酶的活性部位 是酶蛋白分子中直接参与底物结合 并与酶的催化作用直接有关的部位 单成分酶 酶分子中在三维结构上比较靠近的少数几个氨基酸残基组成全酶 肽链上的某些氨基酸残基及辅酶或辅基分子上的某一部分结构组成 胰蛋白酶活性中心 牛胰核糖核酸酶的活性中心 酶的活性中心包括两个功能部位结合部位 与底物分子结合的部位催化部位 底物分子中的化学键在此处被打断或形成新的化学键 从而发生一系列化学反应两个功能部位不是独立存在的 构成这两个部位的有关基团 有的同时兼有结合底物和催化底物发生反应的功能 活性中心以外的必需基团 底物 结合基团 催化基团 这是国际上的标准分法 国际生物化学学会酶学委员会根据各种酶所催化反应的类型 把酶划分为6大类 1 氧化还原酶 氧化还原反应 AH2 BA BH2还可进一步分为氧化酶和脱氢酶 2 转移酶类 底物的基团转移到另一有机物上 AR BA BRR可以是氨基 醛基 酮基 磷酸基等 四 酶的分类与命名1 酶的分类 3 水解酶类 大分子有机物水解 AB HOHAOH BH 4 裂解酶类 有机物裂解成小分子物质 ABA B 5 异构酶类 同分异构体之间的转化 AA 6 合成酶类 底物的合成反应 需要能量 A B nATPAB nADP nPi 1 习惯命名法按底物不同命名 淀粉酶 蛋白酶 脂肪酶 纤维素酶 核糖核酸酶等有时加上来源区别不同来源的同一类酶 如胃蛋白酶 胰蛋白酶等按催化反应的性质和类型命名 水解酶 转移酶和氧化酶等结合上述两个原则命名 如琥珀酸脱氢酶等按在细胞的不同部位命名 胞外酶 胞内酶和表面酶等 2 酶的命名 简单直观 但缺乏系统性 原则 以酶所催化的整体反应为基础 酶的名称要明确表明酶的底物和催化反应的性质如果一种酶同时催化两种底物起反应 应在它们的名称中注明 并用 将两种底物隔开 同时列出习惯名称 如果底物之一是水时可将水省去 2 国际系统命名法 1 酶具有一般催化剂的共性酶积极参与生物化学反应 加快反应速度 但不能改变反应平衡点 在反应前后无变化 2 酶的催化作用具有专一性被酶作用的物质称为底物 作用物或基质 一种酶只能作用于一种物质或一类物质 或者说只能催化一种或一类化学反应 根据专一性程度的不同 酶的底物专一性可分为两种主要类型 结构专一性和立体异构专一性 五 酶的催化特性 锁钥学说 认为整个酶分子的天然构象是具有刚性结构的 酶表面具有特定的形状 酶与底物的结合如同一把钥匙对一把锁一样 诱导契合学说 该学说认为酶表面并没有一种与底物互补的固定形状 而只是由于底物的诱导才形成了互补形状 3 酶的催化作用条件温和酶只需在常温 常压和近中性的水溶液中进行催化反应 相当于生物体内环境 4 酶对环境条件极为敏感酶是由细胞产生的生物大分子 高温 强酸 强碱 重金属离子等会使酶丧失活性 容易变性 5 酶具有极高的催化效率由于酶的催化反应使系统活化能 分子活化需要的能量 降低 活化分子相应增加 底物与酶结合频率 有效碰撞 高 周转率高等 使酶具有极高的催化效率 酶促反应速度是无酶催化或普通人造催化剂催化反应速度的10的6次方至10的16次方倍 一个反应中 每个分子能量不同 具有较高能量 处于活化态的分子才能发生化学反应 活化分子越多 反应速率越快活化能 活化分子比一般分子高出的一定的能量定义 在一定温度下 1mol底物全部进入活化态需要的自由能 单位kJ mol降低反应的活化能如 H2O2自发水解所需活化能为75kJ mol 用胶铂催化需46kJ mol 用过氧化氢酶催化仅需8 4kJ mol 催化效率高的机理 六 酶促反应和影响酶反应速率的因素 酶促反应 k1k3E SESE Pk2酶底物中间产物酶最终产物 得出米 门公式 酶促反应方程式 其中 Km 米氏常数 表示反应速度为最大速度一半时的底物浓度 Km值越小 表示酶与底物的反应越趋于完全 Km值越大 表明酶与底物的反应越不完全 V Vmax S Km S 酶浓度 底物浓度 温度 pH值 激活剂 抑制剂 酶促反应的影响因素 E 对酶促反应的影响理论 酶促反应速度与 E 成正比 即当 S 足够大时 E 越大 酶促反应速度越快 实际 当 E 达到一定浓度时 酶促反应速度就趋于平缓 1 酶浓度 当 E 为定值 且 S 从零逐渐增大时 酶促反应与 S 成正比 但当所有的E变成了EP后 即使再增加 S 酶促反应速度也不会增加当 S 为定值时 酶促反应速度与初始 E0 成正比 2 底物浓度 3 温度 另一方面 随温度升高而使酶逐步变性 即通过减少有活性的酶而降低酶的反应速度 酶的最适温度就是这两种过程平衡的结果 一方面是当温度升高时 反应速度也加快 在最佳适应范围内 酶的活性最高 酶促反应速度最大 温度每升高10 酶促反应速度提高1 2倍 用Q10表示 通常在1 4 2 0之间 过高过低的温度都会影响酶促反应 高温时 酶会受到破坏 发生不可逆变性 甚至完全失去活性 低温时 可降低酶的活性 但不会失去活性 当温度恢复时 活性即恢复 温度与v的关系 在一定的pH下 酶具有最大的催化活性 通常称此pH为最适pH pH对酶活的影响表现 改变底物分子和酶分子的带电状态 过高或过低的pH会影响酶的稳定性 4 pH 5 激活剂 能够对酶起激活作用的物质称为激活剂 如 Fe2 Cu2 Br SO42 维生素等 某些酶必须在加入激活剂后才会真正表现出催化性能或增强催化性能 微生物体内有的酶虽然形成了 但并不起催化作用 称为酶原 当加入了激活剂后才会表现为催化作用 作用机理是稳定改变中心 提高亲和力 能减弱 抑制甚至破坏酶活性的物质称为酶的抑制剂 作用机理 抑制剂与酶的活性部位结合 使酶蛋白活性部位的结构和性质发生改变 从而引起酶活力下降或丧失 6 抑制剂 1 不可逆的抑制作用 抑制剂与酶以共价键方式结合 导致酶活性下降或丧失 且不能用透析 超滤等方法出去抑制剂而使酶的活性恢复 重金属离子 有机汞等是不可逆的抑制剂 2 可逆的抑制作用 抑制剂与酶以非共价键方式结合竞争性抑制 抑制剂结构与底物类似 竞争性与酶活性中心结合非竞争性抑制 抑制剂和底物没有竞争性 底物和酶结合后还可以与抑制剂结合 同样抑制剂与酶结合后还可以与底物结合 形成酶 底物 抑制剂复合物 酶不显示活性 不能转变为产物反竞争性抑制 酶只有与底物结合后 才能与抑制剂结合 形成酶 底物 抑制剂复合物 常见于多底物反应中 抑制作用类型有两种 第二节微生物营养 物质分解反应将营养物质和细胞物质分解的过程 释放能量 新陈代谢 物质合成反应将营养物质转变为机体组分的过程 吸收能量 异化作用 同化作用 新陈代谢 微生物从外界环境中不断的摄取营养物质 经过一系列的生物化学反应 转变为细胞的组分 同时产生废物并排泄到体外 这个过程称为微生物的新陈代谢 简称代谢 新陈代谢包括同化作用与异化作用 两者是相辅相成的 异化作用为同化作用提供物质基础和能量 同化作用为异化作用提供基质 一 微生物的化学组成 水是微生物细胞的重要组成成分 通常微生物细胞的70 90 是水 其余10 30 为干物质 在干物质中 有机物占90 97 主要为蛋白质 糖类 核酸和脂质这四类生物大分子 还有机酸 维生素 激素等有机化合物 无机物占3 10 包括大量元素P S Na Ca Mg Fe Cl和微量元素Cu Mn Zn B Mo Co Ni等 C H O N为所有生物体的有机元素 糖类 脂类由C H O组成 蛋白质由C H O N S组成 核酸由C H O N P组成 微生物细胞中主要化学元素的含量 干物质重 二 微生物的营养物及营养类型 一 微生物的营养物微生物需要的营养物质有水 碳素营养 氮素营养 无机盐及生长因子 水 微生物营养物质 碳素和能源 氮素 矿质元素 生长因子 1 水各类微生物都含有大量水分 占90 左右 一般来 说低等微生物含水量大于高等微生物 幼龄菌含水量大于老龄菌 水有哪些作用 是微生物机体重要组成部分 是微生物代谢过程中必不可少的 一是有助于营养物质的吸收利用 先溶解于水 二是保证各种生化反应的进行 必须在水溶液中进行 调节微生物细胞温度水维持细胞膨压 2 碳源和能源 1 碳源 提供碳元素来源的物质 称为碳源 细菌细胞中的碳素含量占干物质质量的50 左右 碳源作用 细胞的碳骨架 大多还是能源物质 碳源种类 有机含碳化合物 无机碳化合物 随微生物种类不同 各有偏好 微生物最喜好的碳源是 糖类物质 尤其是葡萄糖和蔗糖 3 氮源 凡是能够提供微生物氮素营养的物质称为氮源 氮源的作用 提供微生物合成蛋白质的原料 哪些物质可作为微生物的氮源 有机氮 氨基酸和蛋白质 无机氮 N2 NH3 铵盐 亚硝酸盐 硝酸盐 等 实验室中有机氮源 蛋白胨 根据对对氮源要求不同 将微生物分为4类 固氮微生物 利用空气中的N2合成自身的氨基酸和蛋白质 如固氮菌 根瘤菌和固氮蓝细菌 利用无机氮作为氮源的微生物 能利用氨 铵盐 亚硝酸盐 硝酸盐的微生物有亚硝化细菌 硝化细菌 大肠杆菌 产气杆菌 枯草杆菌 铜绿色假单胞菌 放射菌 霉菌 酵母菌和藻类等 需要某种氨基酸作为氮源的微生物 这类微生物叫氨基酸异养微生物 如乳酸细菌 丙酸细菌 从分解蛋白质中取得铵盐或氨基酸的微生物 如氨化细菌 霉菌 酵母菌及一些腐败细菌 4 无机盐 阴离子盐 磷酸盐 硫酸盐 氯化物 碳酸盐 碳酸氢盐 阳离子盐 氨 钾 钠 钙 镁 铁的盐P和S Fe Mg的需求量较大 同时还需要锌 锰 钴 铝 铜 硼 钒 镍等微量元素 生理功能 构成细胞组分 构成酶的组分和维持酶的活性 调节渗透压 氢离子浓度 氧化还原电位等 供给自养微生物能源 5 生长因子 作用 嘌呤和嘧啶参与合成核酸和辅酶 维生素为重要辅酶多数微生物不存在生长因子问题 只有少数微生物需要外界提供现成的生长因子 才能生长 如乳酸菌需要多种维生素 因此只能生活在这些物质供应充足的环境 如牛奶中 肠道 是指一些微生物维持正常生活所必需而需要量又不大的特殊物质 包括 嘌呤 嘧啶类 维生素 氨基酸类 二 碳氮磷比 水 碳源 氮源 无机盐及生长因子为微生物共同需要的物质 不同微生物对各营养元素的比例要求不同 主要指C N或C N P的比值 如根瘤菌要求碳氮比为11 5 1 霉菌为9 1 在污水处理中 活性污泥中好氧微生物要求碳氮磷比为BOD5 N P 100 5 1 厌氧消化污泥中的厌氧微生物群体要求BOD5 N P 100 6 1 为保证污水生物处理和有机固体废物生物处理的效果 要按C N P比值配给营养 以满足活性污泥中微生物的营养要求 城市生活污水不存在营养不足的问题 但有的工业废水缺某种营养 当营养量不足时 应供给或补足 如酒精废水缺 洗涤剂废水 N P 缺N P过剩 炼油废水 N P 但如果工业废水不缺营养 就切勿盲目补充 微生物往往先利用这类现成的容易被吸收 利用的有机物质 而不再利用工业废水中难以吸收 利用的有机物 从而导致微生物分解特殊有机物的能力下降 三 微生物的营养类型 根据能源不同分为化能微生物 不具色素 不能进行光合作用 依靠氧化化合物来获得能量 和光能微生物 含有光合色素 能进行光合作用 从光得到能量 根据碳源不同分为无机营养微生物 自养 以CO2 CO和CO32 中的碳素为其唯一碳源 和有机营养微生物 异养 只能利用有机碳化合物为碳素营养和能源来源 1 无机营养微生物 自养微生物 无机 自养 CO2 CO和CO32 又根据能源不同又分为光能自养型微生物和化能自养型微生物 1 光能自养微生物 无氧有光 利用阳光 或灯光 作为能源 依靠体内的光合色素 进行光合作用 如紫硫细菌和绿硫细菌 紫硫 绿硫细菌代谢方式光照CO2 H2S CH2O 糖 H2O 2S 菌绿素 与叶绿素大同小异 提问 在自然界的作用是什么呢 早期无氧地球 清除H2S毒物 H2S类似植物光合作用中的H2O 条件苛刻 不是污水处理菌 较洁净的光照池塘无臭 H2S 区 紫硫细菌 湖中4m 硫化物 这个深度紫硫细菌多 2 化能自养微生物 自养 碳源CO32 化能 以 物质氧化产能NH4 NO2 S H2S H2 Fe2 好氧 硝化菌 氨氧化菌和亚硝酸氧化菌 好氧的硫细菌 硫化细菌和硫磺细菌 铁细菌 氢细菌 提问 化能自养细菌能用于污水处理吗 能 脱氨 脱硫 条件容易 2 有机营养微生物 异养微生物 有机 异养 以有机物为碳源提问 自养菌 异养菌哪种繁殖快 污水处理中异养产能率高 有机污染物充足 异养菌是污水处理的主角 异养微生物分为光能异养微生物和化能异养微生物 1 化能异养微生物以有机物作为碳源和能源的微生物 绝大多数的细菌都属于化能异养菌 放线菌 霉菌 酵母菌等 不受氧气限制 尤其适于高浓度有机废水 食品行业 的高效处理 2 光能异养微生物 无氧有光 光能 色素有机物 CO2 菌体 CH2O 小分子有机物碳源主要指红螺菌属 有氧无光时可化能异养生存 提问 在污水处理中的优势是什么 问题 与水分离困难 光照问题 嗜盐红螺菌大量滋生时的红盐田 提问 人工投加光合细菌 PSB 红螺菌 有利于水产养殖 原因 迅速转化毒物 水族排泄物被细菌分解后的氨 有机酸 为高蛋白的菌体 作为鱼的饲料 且不消耗氧 优势生长时能抑制水族病原菌的生长 3 混合营养微生物混合营养微生物是既可以利用无机碳 CO2 CO32 等 作为碳素营养 又可以利用有机化合物作为碳素营养 即为兼性自养微生物 例如 氢细菌属 贝日阿托氏菌属 发硫菌属等 既可以S H2S为能源 也能以低浓度的乙酸钠 琥珀酸及葡萄糖为能源和碳源 据报导 硝化细菌的某些菌株能以乙酸为碳源 四 微生物的培养基 培养基是一种人工配制的 适合微生物生长繁殖或产生代谢产物用的营养基质 任何培养基都应具备微生物所需要的营养要素 且其间的比例是合适的 任何培养基一旦配成 必须立即进行灭菌 否则很快引起杂菌丛生 并破坏其固有成分和性质 一 培养基配制的四个原则 目的明确 培养基组分应适合微生物的营养特点 营养协调 营养物的浓度与比例应恰当 条件适宜 物理化学条件适宜 经济节约 根据培养目的选择原料及其来源 目的明确 异养细菌的培养基中至少有一种有机物 实验室中通常是葡萄糖如一种大肠杆菌培养基 葡萄糖0 5gK2HPO41gMgSO40 2gNaCl5gNH4H2PO40 4g水1000mL 化能自养菌氧化硫杆菌的培养基粉末状硫10gKH2PO44gMgSO40 5gCaCl20 5g NH4 2SO40 4gFeSO40 01g水1000mL 自来水即可 提问 其中各组分作用是什么 空气中的CO2 能源 磷源 缓冲物 碳源是什么 氮源 盐 也可补加一部分碳酸钠 营养协调 物理化学条件适宜 经济节约 培养基的配制 通常 加水 二 培养基的类别 1 根据物理状态固体培养基 半固体培养基和液体培养基 1 液体培养基废水也可看作是一种广义的液体培养基 2 固体培养基 人工做法 向液体培养基中加入1 5 2 左右的琼脂 加热至100 溶解 40 下冷却并凝固 石花菜 红藻 琼脂 琼脂主要成份 半乳聚糖 分子量大 呈网状粘着力强 溶解分散 温度为96 以上 条状琼脂 粉末琼脂 琼脂特性 A 不能被绝大多数微生物利用 分解液化 提问 有什么好处 不作为额外碳源 干扰试验 保持固体特性B 高压灭菌结构不被破坏 且颜色透明不妨碍观察 C 多数微生物在琼脂培养基表面生长并形成独立菌落 提问 有何好处 易于纯化分离 3 半固体培养基 半 流动性介于固体与液体之间如何制作 在液体培养基中加入0 3 0 5 的琼脂作用 半固体培养基中可以融入少量的溶解氧 因此这种培养基常被用于培养在较低氧浓度环境下才能最佳生长的细菌 2 根据培养基组分 天然培养基 合成培养基和半合成培养基 合成培养基合成 纯化学试剂优点 稳定 选择性缺点 很多细菌营养需求较为复杂 配方获取较难 2 天然培养基天然 纯生物制品 细胞提取物 常用的细菌肉汤培养基 牛肉膏3g 蛋白胨5g 水1000mL pH7 2 7 4牛肉膏 瘦牛肉经过加热浓缩抽提的膏状物 主要作碳源 蛋白胨 动植物蛋白 大豆或动物骨粉等 经初步酶解形成的短肽 主要作氮源 类似物如酵母膏 麦芽汁 土壤浸出液 牛奶 玉米粉优点 营养丰富 配制容易缺点 质量不稳定 选择性差 酵母膏 3 半合成培养基半 不纯优缺点介于前两者之间 因而使用最广 大肠杆菌培养基葡萄糖0 5gK2HPO41gMgSO40 2gNaCl5gNH4H2PO40 4g水1000mL 属于哪种培养基类型 合成培养基 半合成培养基 天然培养基 3 基础培养基 大多数微生物均可在上面生长 肉汤培养基牛肉膏3g蛋白胨5g水1000mLpH7 2 7 4 常用物质为染料 胆汁酸盐 金属盐类 酸 碱和抗生素 例如欲分离古细菌 培养基中通常加入青霉素 古细菌就唯一分离并存活下来 胆汁酸盐 抑制革兰氏阳性菌 能选择性生长革兰氏阴性细菌 投毒法 毒 选择性的抑制剂 待选细菌有抗性 选择培养基选择性 待选的细菌能优势生长 理化因素控制法理化因素 特殊的温度 氧气 pH 盐度等环境条件主要用于筛选极端环境微生物 如嗜盐 嗜热 嗜冷 嗜酸 嗜碱等的细菌 同时也被用于选择性培养好氧或厌氧细菌 嗜冷菌 嗜热菌 加富培养基 专一性营养源培养法待选细菌专门需要的某种碳源或氮源例如筛选纤维素分解菌选用纤维素作为培养基中的唯一碳源 各类降解石化废水特殊有机物的细菌筛选通常是以这类有机物为培养基中的唯一碳源 将目的细菌富集筛选下来 鉴别培养基 鉴别 明查分别 细菌种类 提供培养环境外还同时具有类似于 验钞机 的作用 方法 鉴 加入指示剂别 不同菌落制造不同的代谢物 显色不同水处理中常用的EMB培养基就是典型大肠菌群内不同种属细菌的鉴别培养基 五 营养物进入微生物细胞的方式 微生物没有专门的摄食