细胞生物08临医《医学细胞生物学》教案.doc

教 案1姓名_齐冰_ 20082009学年第 二 学期 时间2007/3/9节次1-3节课程名称细胞生物学授课专业及层次2008临床医学本科1-2班授课内容绪论 细胞的分子基础和基本概念学时数3教学目的使学生了解细胞生物学的概念、发展、成就和作用；掌握细胞生物学研究方法和学习方法；激发学生学习细胞生物学的兴趣。了解细胞的化学和分子组成；掌握核苷酸的组成，掌握核酸的结构特点，掌握蛋白质的结构特点，糖类的组成，了解原核细胞与真核细胞的结构特点，掌握原核细胞与真核细胞的区别重点激发学生学习细胞生物学的兴趣；掌握细胞生物学的学习方法，核苷酸的组成核酸的结构特点，原核细胞与真核细胞的区别难点核苷酸的组成， DNA的结构特点，蛋白质的结构特点，真核细胞的结构自学内容细胞生物学技术，核酶，细胞的形成与进化使用教具多媒体课件相关学科知识细胞学和生物化学的相关知识教 学 法谈话法、讨论式、讲述法教学法讲授内容纲要、要求及时间分配自我介绍及教材、课程介绍一、细胞及细胞生物学的概念：1. 细胞2. 细胞学说3. 细胞生物学的发展简史4. 细胞生物学的分支学科5. 细胞生物学与医学科学，细胞生物学研究动态与医学的进展二、细胞生物学的学习方法三、细胞生物学的研究方法第三章 细胞的分子基础和基本概念引 言第一节 细胞的化学与分子组成无机物：水、无机盐有机物：核酸、蛋白质、脂肪、糖类一、核酸：1. 核酸的化学组成： 组成单位：核苷酸 核苷酸的组成：碱基的种类、A、T、G、C、U核糖的种类、核糖、脱氧核糖、磷酸10分钟10分钟10分钟5分钟15分钟讲授内容纲要、要求及时间分配（附页） 核苷酸连接的化学键：磷酸二酯键从3，5-磷酸二酯键来理解核酸的方向性。DNA与RNA在化学组成上的异同 戊糖 碱基2、DNA的结构与功能1 DNA的双螺旋结构模型：（1）由两条相互平行方向相反的多核苷酸链构成；（2）两条链间的碱基遵循碱基互补配对原则配对，AT、GC（3）碱基的排列顺序蕴含着遗传信息。2 DNA的功能：（1）储存遗传信息（2）复制（3）转录原位杂交技术（1） 原位杂交技术的原理（2） 荧光原位杂交的原理聚合酶链反应（PCR）（1） PCR的原理（2） TaqDNA聚合酶的作用特点（3） 引物合成的主要原则PCR的应用3 RNA的结构与功能：1 tRNA2 mRNA3 rRNA4 snRNA 4核酶的概念核酶的发现打破了传统上酶是蛋白质的定论，具有重要的意义核酶与基因治疗的关系。二、 蛋白质1、 蛋白质的化学组成：1 组成单位：AA2 肽键2、 蛋白质的分子结构1 蛋白质的一级结构：AA的排列顺序；是蛋白质高级结构的基础。2 蛋白质的二级结构、三级结构、四级结构：二级结构强调的是主链上电负性差异大的原子间的电性吸引力氢键。三级结构强调的是侧链间原子间的作用，就氢键而言，和二级结构由本质的区别，另外和二级结构不同的是离子键、疏水键等。5分钟10分钟5分钟15分钟5分钟10分钟20分钟讲授内容纲要、要求及时间分配（附页）（重点强调）只有具有三级或三级以上的空间结构，才表现出相应的生物学活性3、 蛋白质折叠的分子机制4、 蛋白质的结构与功能的关系5酶（简介）三、糖类1、 糖的化学组成、结构与分类2复合糖在细胞中的分布与功能第三节 原核细胞与真核细胞一、原核细胞原核细胞的结构特点二二、真核细胞1、真核细胞的基本结构：生物膜结构、细胞骨架结构、胞质溶胶、细胞核2、真核细胞的形态与大小三、原核细胞与真核细胞的比较1、细胞结构2、基因组3、转录与翻译小 结5分钟5分钟15分钟5分钟教 案2姓名_齐冰_ 2006 2007学年第 二 学期 时间2007/3/15 节次1-3节课程名称细胞生物学授课专业及层次2008临床医学本科1-2班授课内容第四章 细胞膜及物质的跨膜运输（一） 学时数3教学目的了解生物膜的化学组成和分子结构，掌握流动镶嵌模型的主要内容重 点流动镶嵌模型的主要内容难 点生物膜的特性自学内容无使用教具多媒体课件课件相关学科知识生物化学的相关知识教 学 法讲述法、图表法、谈话法讲授内容纲要、要求及时间分配复习旧课，导入新课第四章 生物膜的化学组成细胞膜、内膜系统、生物膜、单位膜一、 生物膜的化学组成：1 膜脂：膜脂的特点双亲性（重点强调膜脂的兼性分子的特点与膜形成的关系）膜脂的类型：磷脂、胆固醇、胆固醇的板层状结构可有效的阻止磷脂分子尾部碳氢链的相互聚集，从而降低膜的流动性；抑制了膜因温度的变化而引起的相变，防止低温使膜流动性的突然降低。糖脂2 膜蛋白类型：内在膜蛋白、外在膜蛋白重点介绍其特点及其与膜的结合方式3 膜糖类：存在特点5分钟10分钟15分钟20分钟20分钟5分钟讲授内容纲要、要求及时间分配（附页）二、 生物膜的特性1、 生物膜的流动性：膜脂的流动性：运动方式影响因素 膜蛋白的流动性：方式 人鼠细胞融合实验：膜蛋白流动的区域性以小肠上皮细胞的物质吸收的载体蛋白分布为例说明2、 生物膜的不对称性三、 生物膜的分子结构模型流动镶嵌模型1、 磷脂双分子层构成膜的基本结构骨架2、 蛋白质以不同的方式与膜结合3、 膜的流动性4、 膜的不对称性四、 其它模型小 结15分钟5分钟10分钟10分钟10分钟15分钟5分钟5分钟教 案3姓名_齐冰_ 20062007学年第 二 学期 时间2007.3.22节次1-3节课程名称细胞生物学授课专业及层次2008临床医学本科1-2班授课内容细胞膜和物质运输（二）学时数3教学目的了解小分子物质跨膜运输的方式，掌握膜蛋白介导的跨膜运输，了解大分子和颗粒物质的跨膜运输方式、掌握受体介导的内吞作用的过程，重点掌握膜蛋白介导的跨膜运输，受体介导的内吞作用难点掌握膜蛋白介导的跨膜运输，受体介导的内吞作用自学内容无使用教具多媒体课件相关学科知识生物化学的相关知识教 学 法讲述法、谈话法、图表法讲授内容纲要、要求及时间分配复习旧课、导入新课一、 膜的选择通透性和单纯扩散1 膜的选择通透性2 单纯扩散：物质及影响因素二、 膜蛋白介导的跨膜运输载体、通道1 载体蛋白介导的运输：1 葡萄糖载体蛋白：2 NaKATP酶3 Ca泵4 HATP 酶5 协同运输概念及类型2 通道蛋白介导的运输：1 通道蛋白的特性：2 通道蛋白的种类： 三、 总结小分子物质的跨膜运输方式及特点5分钟15分钟5分钟10分钟15分钟5分钟5分钟15分钟10分钟15分钟讲授内容纲要、要求及时间分配（附页）第三节 大分子和颗粒物质的跨膜转运一、 内吞作用1 吞噬作用2 吞饮作用3 受体介导的内吞作用：二、 外吐作用：1 外吐作用的过程2分泌作用的类型三、 质膜循环四、 质膜的运动进一步理解膜的流动性小 结10分钟20分钟5分钟5分钟5分钟教 案4姓名_齐冰_ 2006 2007学年第 二 学期 时间2007/3/29 节次1-3节课程名称细胞生物学授课专业及层次2008临床医学本科1-2班授课内容细胞核与遗传物质的流向（一）学时数3教学目的了解核的结构，掌握核孔复合体的物质转运功能了解染色质的化学组成和种类, 了解染色体的形态特征，掌握功能染色质的三个必须序列,掌握常染色质和异染色质的区别，掌握染色质的包装模型，掌握染色体的基本形态结构，了解基因组和核型的概念，了解核基质的化学组成和功能，掌握核仁的形态结构及功能，了解核仁周期重点核孔复合体的结构及运输功能，常染色质和异染色质的区别，染色质的包装模型，染色体的形态特征核仁的，形态结构及核仁周期难点核孔复合体的结构及运输功能，染色质的包装模型，核仁的形态结构自学内容无使用教具多媒体课件相关学科知识生物化学的相关知识教 学 法讲述法,谈话法,图表法讲授内容纲要、要求及时间分配复习旧课,导入新课.第五章 细胞核及遗传信息的流向细胞核绪论:核出现的意义,核的数量,形态核被膜一、 外核膜二、 内核膜三、 核间隙四、 核孔1 核孔的结构2 核孔的功能：物质运输自由扩散，主动运输核定位信号五、 核纤层第一节 染色质和染色体一、 染色质的化学组成及种类1 染色质的化学组成 DNA，三个必须序列复制源、着丝粒、端粒 RNA 蛋白质：组蛋白和非组蛋白2 染色质的种类 常染色质 异染色质：兼性异染色质，结构异染色质5分钟5分钟5分钟5分钟20分钟10分钟20分钟讲授内容纲要、要求及时间分配（附页）二、 染色质的包装多级螺旋模型 一级结构：核小体链核小体结构 二级结构：螺线管 三级结构：超螺线管 四级结构：染色单体2 袢环模型 袢环：螺线管由纵轴伸出又返回 微带：由18个袢环组成形成的平面 染色单体：三、染色体1染色体的形态特征： 染色单体 着丝粒与主缢痕，动粒，染色体根据着丝粒的位置可分为4类 次缢痕核随体：核仁组织区 端粒：2 基因组与核型第三节 核基质一、 核基质的形态结构核化学组成二、 核基质的功能：第四节 核仁一、 核仁的形态结构和化学组成：1 纤维中心2 致密纤维成分：3 颗粒成分：二、 核仁的功能：核糖体亚单位的装配场所三、 核仁周期：小 结15分钟15分钟10分钟5分钟20分钟10分钟5分钟教 案5（实验教案1）姓名 齐冰 20062007学年第二 学期 时间_07/4/5_节次_1-3课程名称细胞生物学授课专业及层次2008临床医学本科1-2班授课内容基因组DNA的提取学时数3教学目的掌握基因组DNA提取的原理及方法重点DNA提取的方法难点自学内容无使用教具离心机等实验器材相关学科知识细胞生物学教 学 法演示法、谈话法等讲授内容纲要、要求及时间分配一、人类外周血基因组DNA提取：（一） 原理：1、 对外周血淋巴细胞内DNA进行提取，首先要消化掉细胞膜和核膜，然后将与DNA结合的蛋白质分离并沉淀。2、 传统的TLS法提取DNA是通过TLS（是一种强的表面活性剂）处理淋巴细胞，迅速溶解细胞膜和核膜并使DNA和蛋白质分离，但此法操作繁琐且费时，现一般用试剂盒进行DNA进行提取。3、 试剂盒的原理应与TLS法相似，（二） 方法与步骤：1、 离心管中加入溶液500l，新鲜血液100l ，立即振荡。2、 室温放置10分钟，12000r离心5分钟。吸去离心管中的液体（注意不要将沉淀带出，）3、 离心管中加入溶液1ml，轻柔颠倒，室温12000r离心2分钟，去处上清。4、 离心管中加入溶液500l，轻微振荡10s，充分混合。5、 室温12000r离心5分钟，将上清移至新的离心管中。6、 在心离心管中加入等体积异丙醇500l，上下颠倒数次，直至出现白色丝状DNA。7、 结果观察（三） 实验注意事项1、着重强调离心机使用时的注意事项，如：离心时需要配平，平衡后要对称放入；2、高速离心机和低速离心机的区别；3、离心时离心管的摆放方向（耳朵朝外）要一致，4、讲解移液枪的正确用法。10分钟5分钟10分钟讲授内容纲要、要求及时间分配（附页）（四）报告要求：实验目的、原理、方法和步骤、实验结果、结果分析。结果分析：1、 是否达到预期效果？为什么？2、 每一步试剂的作用？二、学生实验125分钟教 案6姓名_齐冰_ 2006 2007学年第 二 学期 时间2007/4/12节次1-3节课程名称细胞生物学授课专业及层次2008临床医学本科1-2班授课内容细胞核与遗传信息流向（二）学时数3教学目的掌握原核细胞基因的结构特点及乳糖操纵子的调控，掌握真核细胞基因结构特点，了解遗传的中心法则，了解基因转录的基本过程，掌握转录的概念，掌握hnRNA的加工的三个步骤，掌握密码子的特点及摆动假说，了解真核细胞基因表达调控的途径重点乳糖操纵子的调控，真核细胞基因结构，HnRNA的加工步骤，摆动假说难点乳糖操纵子的调控，真核细胞基因结构，摆动假说自学内容真核细胞tRNA及5sRNA的转录后加工使用教具多媒体课件相关学科知识生物化学教 学 法讲授内容纲要、要求及时间分配复习旧课，导入新课。第五节基因与基因转录一、 遗传的中心法则：二、 基因与基因转录：基因的概念：1 原核细胞的基因结构:特点：非翻译区少，串联排列，无内含子，单一拷贝，多顺反子例：大肠杆菌乳糖操纵子：结构及调控2 真核细胞的基因结构： 重复顺序多，单顺反子，断裂基因 重复序列：单一序列；中度重复序列；高度重复序列 多基因家族 结构基因特点：断裂基因概念内含子，外显子，启动子，增强子，终止子第五节 基因与基因转录3 原核细胞的基因转录： 转录概念 转录因子 转录过程4 真核细胞的基因转录：hnRNA的转录后加工戴帽，加尾，剪接5分钟5分钟5分钟5分钟20分钟15分钟10分钟20分钟15分钟15分钟 讲授内容纲要、要求及时间分配（附页）第六节 遗传信息的翻译一、 遗传密码与mRNA密码子，遗传密码密码子的特点：通用性，简并性，阅读框架的无间隔性二、 反密码子与tRNA三、 反密码子与密码子的相互作用摆动假说四、核糖体与遗传信息的翻译第七节 真核细胞基因表达的调控一、 基因表达的调节途径二、 转录水平的调节机制：顺式作用元件反式作用因子第八节细胞核与疾病小结10分钟10分钟10分钟5分钟教案7（实验教案2）姓名_齐冰_ 2006 2007 学年第 二学期 时间07/4/19 节次_1-3课程名称细胞生物学授课专业及层次2008临床医学本科1-2班授课内容细胞有丝分裂、学时数3教学目的掌握细胞的有丝分裂过程，初步掌握细胞有丝分裂临时压片方法、重 点细胞分裂各时期的的特点难 点细胞分裂各时期图像的寻找自学内容无使用教具显微镜等试验器材相关学科知识细胞生物学教 学 法示教讲授内容纲要、要求及时间分配（一）实验目的1、掌握植物细胞有丝分裂的过程及特点2、初步掌握植物细胞有丝分裂临时压片的方法（二）实验原理1、 讲解洋葱根尖的形态及生长点部位的细胞的特点。2、 盐酸醋酸地衣红对染色质特异染色。3、 图示既说明洋葱根尖细胞有丝分裂特点:间期：由细胞核，且核内着色均匀，没有纤维状的染色体出现。前期：核膜核仁消失、染色体出现中期：染色体排列在细胞中央的赤道板。着丝粒在中央、臂在两侧。 染色体形态清楚，数目清晰。后期：染色单体分离，并向两极分开，染色体形态清晰，向极移动时着丝粒在前，臂在后。末期：染色体解旋，在两极各形成一团染色体，核膜核仁出现，植物细胞在细胞中央出现细胞板。子细胞：其大小与其他间期细胞有明显的区别，且刚分裂形成的两个子细胞大小一致并列存在。（三）实验方法：直接取新鲜洋葱根尖，放入表面皿，加入盐酸醋酸地衣红染液，将烧杯于酒精灯上微微加热，当产生雾气时，即离开火焰（避免煮沸或烧干），不断震摇，如此断续加热23次，使标本加速固定、软化和染色，然后在表面皿内漂洗，轻轻取根尖于载玻片上，盖上盖玻片，在盖玻片上方两层吸水纸，用铅笔头或橡皮对准标本叩打（不要挪动标本），使细胞和染色体分散开，镜下观察。10分钟15分钟讲授内容纲要、要求及时间分配（附页）（四）注意事项：1、未染色根尖的颜色及染色后根尖的颜色，让学生识别根尖的位置很重要，关系到压片时是否合适。2、结合课本知识讲明细胞有丝分裂各期的特点。3、加热时，表面皿应在火焰上方23厘米左右。4、压片时力量要合适，既要防止用力太大将盖玻片敲碎，又要避免用力太小不能使生长点细胞呈单层。5、镜下观察时，应指导学生现在低倍镜下找到方形的生长点细胞所在的区域，这样利于找到处于分裂状态的细胞。（五）实验报告1、格式：实验题目、实验目的；2、绘制前、中、后、末四个时期细胞及染色体形态图3、绘图要求： 按着镜下实际观察到的各期染色体形态进行绘图； 一律用铅笔 绘染色体可以图描（六）实验报告批改及评分标准1、书写及绘图是否认真。根据认真程度扣分范围510分2、实验报告是否规范。（1） 实验标题、试验目的，落一项扣5分。（2） 所绘分裂期各期图，期别标识错误，一项扣10分。（3） 所绘染色体不是镜下看到的实际形态，而是自己杜撰或简单抄书，每期图扣5分。学生实验：5分钟120分钟教 案8姓名_齐冰_ 2006 2007学年第 二 学期 时间2007/4/26 节次1-3节课程名称细胞生物学授课专业及层次2008临床医学本科1-2班授课内容第六章细胞骨架 学时数3教学目的了解细胞骨架的定义、细胞骨架的种类；掌握微丝组装的动态调节，了解微丝的功能了解微管、中间纤维的组成、形态结构、功能和组装，掌握微管组装的的动态调节重点微丝组装的动态调节难点微丝组装的动态调节自学内容微丝结合蛋白，微丝功能中的作用机制使用教具多媒体课件相关学科知识生理学相关知识教 学 法对比法、举例法、讲述法讲授内容纲要、要求及时间分配复习旧课，导入新课。第六章 细胞骨架细胞骨架的定义，及类型第一节微丝一、 微丝的组成：1 微丝的基本组成单位：肌动蛋白2 肌动蛋白的存在方式：二、 微丝的结构：三、 微丝的组装四、 微丝组装的动态调节 非稳态动力学模型五、 微丝结合蛋白及其功能（自学）六、 微丝的功能：1 维持细胞形态2 参与肌肉收缩5分钟5分钟20分钟20分钟20分钟 讲授内容纲要、要求及时间分配（附页）3 参与细胞分裂4 参与细胞运动5 参与细胞内物质运输6 参与细胞内信号转导第二节 微管一、 微管的化学组成：微管蛋白，二、 微管的形态结构： 存在形式：单管、二联管、三联管三、 微管结合蛋白（自学）四、 微管的组装五、 微管组装动态调节非稳态动力学模型六、 微管的功能1 维持细胞形态2 构成纤毛、鞭毛和中心粒等细胞运动器官，参与细胞运动3 维持细胞器的位置，参与细胞器的位移4 参与细胞内的物质运输5 参与染色体的运动，调节细胞分裂6 参与细胞内信号转导第三节 中间纤维一、 中间纤维的化学组成二、 中间纤维的形态结构三、 中间纤维的组装四、 中间纤维组装的动态调节五、 中间纤维结合蛋白及其功能（自学）六、 中间纤维的功能第四节 细胞骨架与疾病小 结15分钟15分钟20分钟15分钟10分钟5分钟教 案9姓名齐冰_2006 2007学年第二学期 时间2007/5/3（第8周补课）节1-3节课程名称细胞生物学授课专业及层次2008临床医学本科1-2班授课内容线粒体与细胞的能量转换学时数3教学目的掌握线粒体的半自主性、细胞呼吸及特点、细胞能量转化的三个步骤、氧化磷酸化、底物水平磷酸化、呼吸链。了解能量转化的过程，及线粒体与医学关系。重点线粒体的半自主性、细胞的能量转换难点细胞的能量转换自学内容核编码蛋白的线粒体转运、ATP的合成使用教具多媒体课件相关学科知识生物化学糖酵解、三羧酸循环等教 学 法讲述法、比较法、讲授内容纲要、要求及时间分配复习旧课细胞骨架-导入新课第七章 线 粒 体 与 能 量 转 换一、 线粒体的生物学特征：（一）线粒体的结构：外膜；内膜膜间腔，基粒；基质（重点讲解线粒体内膜的高度不通透性及线粒体的基粒）线粒体的化学组成 （二）线粒体基因组线粒体的半自主性。（细胞内的第二套遗传系统，受核基因的控制，绝大多数蛋白由核基因编码）（三）核编码的线粒体转运（框架前体蛋白在线粒体外去折叠，多肽链穿越线粒体膜，多肽链在线粒体基质内重新折叠）二、 细胞呼吸与能量分子细胞呼吸细胞呼吸的特点（1.本质是线粒体中进行的一系列由酶系所催化的氧化还原反应，2所产生的能量储存在ATP中，3分步进行，能量逐步释放，4恒温恒压条件5需要有水参与。）细胞能量转换分子ATP5分钟20分钟20分钟5分钟20分钟10分钟 讲授内容纲要、要求及时间分配（附页）三、 细胞的能量转换以糖的氧化为例：糖酵解细胞质基质 三羧酸循环线粒体基质 电子传递和氧化磷酸化线粒体内膜底物水平磷酸化。呼吸链：复合物、，CoQ，CytC呼吸链三个主要的能量释放部位：氧化磷酸化偶联机制化学渗透偶联假说四、 能量转换与医学的关系小 结10分钟10分钟5分钟20分钟10分钟10分钟5分钟教 案10姓名_齐冰_ 2006 2007学年第 二 学期 时间2007/5/10 节次1-3节课程名称细胞生物学授课专业及层次2008临床医学本科1-2班授课内容内膜系统（一）学时数3教学目的掌握内膜系统的概念，掌握核糖体的活性位点，掌握核糖体的存在形式，掌握粗面型内质网和滑面型内质网的结构特点，核糖体在内质网上的附着机制。蛋白质在粗面内质网腔内的糖基化， 重点内膜系统，核糖体的活性位点。内质网的分泌蛋白合成功能难点核糖体的活性位点，信号假说自学内容蛋白质的合成过程，蛋白质由内质网向高尔基复合体的运输，使用教具多媒体课件相关学科知识生物化学相关知识蛋白质合成教 学 法讲述法、比较法讲授内容纲要、要求及时间分配一、 内膜系统绪论内膜系统的概念内膜系统的功能二、 核糖体 1、核糖体的化学组成a) 真核细胞核糖体的化学组成i. 完整核糖体为80sii. 大亚基60s，rRNA组成为28s、5.8s和5siii. 小亚基40s，rRNA组成为18sb) 原核细胞核糖体的化学组成i. 完整核糖体为70sii. 大亚基50s，rRNA组成为23s和5siii. 小亚基30s，rRNA组成为16s2、核糖体的存在状态a) 从位置和功能上看：i. 游离核糖体及合成蛋白的种类ii. 附着核糖体及合成蛋白的种类b) 从形态上看i. 大小亚基分离状态ii. 完整核糖体状态iii. 多聚核糖体状态15分钟10分钟s10分钟s 讲授内容纲要、要求及时间分配（附页）3、核糖体上与蛋白质合成有关的活性部位a) 小亚基上mRNA结合部位，小亚基上，与mRAN结合b) A位点：大亚基上，氨酰tRNA的结合部位c) P位点：大亚基上，肽酰tRNA的结合部位d) 转肽酶活性部位，催化肽键形成的酶所在的部位e) GTP酶活性部位，为移位提供能量的部位f) E位点：多肽链转运通道4、核糖体上蛋白质的合成a) 起始起始复合物的形成b) 肽链延伸c) 肽链合成终止三、内质网（一）内质网的形态结构与类型粗面内质网滑面内质网（二）内质网的化学组成标志酶：葡萄糖6磷酸酶，电子传递体系（三）内质网的功能、粗面内质网的功能1、 分泌蛋白的合成信号假说，、 信号肽引导核糖体到内质网膜相关结构：信号肽，信号密码，SRP，SRP受体，核糖体结合蛋白，核糖体的附着机制：i 信号肽在胞质游离状态的核糖体上合成ii 信号肽与SRP的结合，SRP与核糖体A为结合iii SRP与内质网膜上的SRP受体结合iv 核糖体大亚基与内质网膜上的核糖体结合蛋白结合，SRP释放，肽链继续合成 新生肽链到内质网腔的跨膜转运协同翻译运转（重点讲）翻译后运转 蛋白质在内质网腔内的折叠分子伴侣折叠机制 蛋白质在内质网腔内的糖基化N连接的糖基化：N乙酰葡萄糖胺，甘露糖，葡萄糖，天冬酰胺糖基转移酶 蛋白质由内质网到高尔基体的运输（自学）小 结15分钟15分钟10分钟5分钟10分钟20分钟5分钟5分钟20分钟5分钟5分钟教 案11（实验教案3）姓名 齐冰 20062007学年第 二学期 时间 07/5/17_ 节次1-3课程名称细胞生物学实验授课专业及层次2008临床医学本科1-2班授课内容细胞骨架的显示学时数3教学目的掌握组织化学法显示以微丝为主的细胞骨架纤维的原理和步骤。重点细胞骨架的显示难点细胞骨架的显示自学内容无使用教具试验器材相关学科知识细胞生物学教 学 法示教讲授内容纲要、要求及时间分配（一）原理：洋葱鳞茎表皮细胞经一定浓度的tritonX-100处理时，可破坏细胞壁及细胞内的蛋白质，而细胞骨架系统的蛋白质被保留下来，经固定和染色后能在光镜下观察到细胞骨架的结构。（二）方法与步骤：1、 取洋葱鳞茎内表皮细胞于6mM的PBS中浸泡10分钟。（磷酸缓冲液的作用：为 tritonX-100的处理提供缓冲环境）2、 去处PBS，tritonX-10037处理20分钟。（tritonX-100的作用：破坏细胞壁及细胞内的蛋白质，而细胞骨架系统的蛋白质被保留下来）3、 吸去tritonX-100，加M-缓冲液冲洗。（M-缓冲液冲洗的作用：对 tritonX-100的清洗；为下一步戊二醛的固定提供缓冲环境）4、 吸去M-缓冲液，加戊二醛固定10分钟。（戊二醛固定的作用：使大分子交联在一起，经过处理后，不致使细胞内的结构发生大的变形，以最大限度的保证细胞正常生理状况下的形态及结构）5、 吸去戊二醛，加PBS冲洗。（磷酸缓冲液的作用：对乌二醛的清洗；为考马斯亮蓝的染色提供缓冲环境）6、 吸去PBS，加考马斯亮蓝染色1530分钟。（考马斯亮蓝的作用：考马斯亮蓝不是特异的对细胞骨架进行染色，但由于经 tritonX-100处理已消化掉骨架蛋白质外的蛋白质，所以经考马斯亮蓝染色的即为细胞骨架）实验报告要求： 学生实验5分钟10分钟5分钟130分钟教 案12姓名_齐冰_ 2006 2007学年第 二 学期 时间2007/5/24 节次1-3节课程名称细胞生物学授课专业及层次2008临床医学本科1-2班授课内容内膜系统（二）学时数3教学目的掌握高尔基复合体的结构分区和功能，掌握溶酶体的结构及特点，初级溶酶体、次级溶酶体、自嗜性溶酶体、异嗜性溶酶体的概念及来源，溶酶体的功能、溶酶体与疾病的关系重点高尔基体的功能，溶酶体的功能、溶酶体与疾病的关系难点高尔基复合体与溶酶体的形成，溶酶体与疾病的关系自学内容过氧化物酶体使用教具多媒体课件相关学科知识生理学、医学教 学 法讲述法、讨论法讲授内容纲要、要求及时间分配复习旧课内质网，导入新课一、内质网的功能2、 膜整合蛋白的嵌插机制（经提示后自学）3、 蛋白质合成的质量控制UPR非折叠蛋白应答（经提示后自学）4、 粗面内质网与膜脂的合成（二）滑面内质网的功能：1、 固醇类激素的合成和脂类代谢2、 糖原的合成与分解3、 肝细胞解毒作用4、 肌细胞内特化的滑面内质网一、 内质网的病理变化高尔基复合体一、 高尔基复合体的形态结构顺面高尔基网络CGN，扁平囊区，反面高尔基网络TGN二、 高尔基复合体的分布特征1、胰腺细胞等分布再接近细胞核的细胞一极2、肝细胞等则沿胆小管分布至细胞边缘3、其他细胞呈分散状三、 高尔基复合体的化学组成 特征酶糖基转移酶四、 高尔基复合体的功能5分钟10分钟5分钟15分钟5分钟10分钟10分钟讲授内容纲要、要求及时间分配（附页）（一） 分泌蛋白的加工和修饰1. 糖蛋白的合成和修饰：N连接的糖基化的修饰。O连接的糖基化糖链与AA的OH基团相连。2. 蛋白质的加工改造：胰岛素的加工（二） 高尔基复合体与蛋白质的分选和运输 受体 挽救受体（三） 高尔基复合体与溶酶体的形成 M-6-P的形成是关键，TGN处的分选信号，在高尔基复合体内运输时保护M不被水解。磷酸转移酶的识别位点信号斑。（四） 高尔基复合体与细胞内膜的交通五、 高尔基复合体的病理变化溶酶体一、 溶酶体的形态特点由一层单位膜包围的内含多种酸性水解酶的细胞器二、 溶酶体的化学组成a) 含有核酸酶、蛋白酶、糖苷酶、脂酶、磷酸酶和硫酸酶六大类。b) 其最适pH为5.0c) 膜上有质子泵三、 溶酶体的类型自噬性溶酶体、异噬性溶酶体、残余小体四、 溶酶体的功能a) 对细胞内物质的消化i. 细胞自身物质的消化ii. 细胞吞噬物质的消化b) 对细胞外物质的消化顶体反应精子细胞的顶体是由溶酶体特化而来的c) 溶酶体的姿容作用于器官发育两栖动物蝌蚪变态时的尾部吸收与溶酶体的自溶作用D）溶酶体与激素分泌的调节五、 溶酶体与疾病a) 先天性溶酶体病糖原沉积病，脂质沉积病，粘多糖沉积病b) 溶酶体与矽肺i. 矽肺的发病机制ii. 矽肺的治疗c) 溶酶体与类风湿性关节炎d) 溶酶体与肿瘤第五节 过氧化物酶体（经提示后自学）小结15分钟5分钟20分钟5分钟5分钟20分钟15分钟5分钟教 案13（实验教案4）姓名_齐冰_ 20062007 学年第二学期 时间 07/5/31 节次1-3课程名称细胞生物学授课专业及层次2008临床医学本科1-2班授课内容细胞组分的分离和鉴定学时数3教学目的了解通过细胞匀浆和差速离心的方法分级分离细胞组分的原理及过程；熟悉离心机、匀浆器的使用方法重点细胞组分分离的原理和方法难点不同离心机的使用自学内容无使用教具显微镜、离心机、匀浆器相关学科知识生物技术教 学 法讲授法、示教讲授内容纲要、要求及时间分配一、实验原理：细胞内各种结构的比重和大小不同，在同一离心场内的沉降速率不同，据此可用不同的转速将细胞内各种碎片和细胞起分级分离。利用细胞核与线粒体在一定介质中的沉降速度的差异，可采取分级差速离心的方法，将细胞核与线粒体逐级分离出来。二、方法与步骤：(一) 血涂片的制作方法：1 采血针眼处挤出绿豆大小血滴，用清洁玻片面的一端轻轻接触血滴，使血滴附于玻片面上，注意勿触及皮肤，否则血在玻片上就不能成滴。 2另取边缘平滑的玻片作为推片：以推片的一端放在血清的前方，逐渐后移，接触血滴并待血滴沿推片边缘均匀展开，然后将推片与玻片保持 30 45 度角，轻轻用力，均匀而迅速地将推片沿玻片表面推至玻片另一端，形成头体尾明显的舌形血膜。立即将玻片摇动，使其快速干燥，忌热力干燥。 （二）低速离心分离细胞核1小鼠处死，取肝脏，剪成小块，迅速放置于预冷的生理盐水中洗净；2滤纸吸去肝组织表面的溶液，称取肝组织1g加入8ml预冷的蔗糖溶液，匀浆器5分钟25分钟讲授内容纲要、要求及时间分配（附页）中匀浆。八层纱布过滤，弃去滤渣，滤液-1800rpm离心10分钟，上清制作涂片，其余上清冰水中待用。沉淀加冷的蔗糖溶液重悬，1800rpm离心10分钟 ，上清制作涂片，沉淀重悬，制作涂片。3 涂片1-3，晾干，95%乙醇固定5，甲基绿-哌罗宁染色20分钟，水洗，丙酮分化2-3s，镜检。（三）高速离心分离线粒体：将冰水中的上清13,000rpm离心10分钟，弃去上清，沉淀重悬，13,000rpm离心10分钟，沉淀重悬。取两张玻片滴加中性红-詹姆斯绿B，分别加一滴上清、重悬液，染色2-3分钟，加盖片，镜检。三、实验报告要求：写出实验题目、原理、分离操作程序流程图解，描述各种涂片显微镜下观察到的结果。四、学生实验120分钟教 案14姓名 齐冰 2006 2007 学年第 二 学期 时间_07/6/7_ 节次1-3节课程名称细胞生物学授课专业及层次2008临床医学本科1-2班授课内容第九章 细胞信号转导（一）学时数3教学目的掌握受体、配体的概念，受体的基本类型及各自的结构特点。G蛋白的概念及共同特征，G蛋白的作用机制重点受体、配体的概念，受体的基本类型、G蛋白的概念及作用机制难点G蛋白的作用过程自学内容G蛋白的类型使用教具多媒体课件、卡通、flash相关学科知识生理学、分子生物学教 学 法案例引入式教学法讲授内容纲要、要求及时间分配（可加附页）复习旧课，导入新课一、细胞信号转导的概念及过程1、 细胞信号转导的概念2、 细胞信号转导的过程 信号分子即第一信使 细胞表面或内部的受体 受体将第一信使在胞内转换为第二信使 胞内的信号途径，产生生物学效应。二、受体1、 受体的概念2、 配体的概念3、 配体的种类 脂溶性的 水溶性的4、 受体的类型（1） 酪氨酸激酶受体 概念 作用 此类受体的配体（2） 配体闸门离子通道5分钟5分钟5分钟5分钟5分钟5分钟20分钟讲授内容纲要、要求及时间分配（附页） 乙酰胆碱受体的结构 作用特点（3） G蛋白耦联受体 共同结构特征 作用特点三、G蛋白1、 G蛋白的概念2、 G蛋白的共同特征 由、等三种不同的亚基构成异聚体 具有结合GTP或GDP的能力，并具有GTP酶的活性 其本身的构象改变可进一步激活效应器酶，实现胞内信号传递3、 G蛋白的类型和分子组成（1） 类型（2） 种类4、 G蛋白的作用机制 配体与相应受体结合，受体蛋白构象发生改变，与G蛋白的亚基结合，使亚基与GTP结合 GTP-亚基构象改变，与亚基分离；GTP-亚基与受体分离，此为G蛋白的活性状态； GTP-亚基激活效应器蛋白 GTP-亚基一旦与效应器蛋白结合激活其GTP水解酶活性水解GTP形成GDP-亚基，并与效应器蛋白分离； GDP-亚基又与亚基结合恢复到静息状态下的G蛋白。5、 亚基对G蛋白活性的调节5分钟10分钟5分钟20分钟10分钟教 案15（实验教案5）姓名_齐冰_ 20062007 学年第二学期 时间 07/6/14 节次1-3课程名称细胞生物学授课专业及层次2006临床医学本科5-8班授课内容染色体制备与分析学时数3教学目的了解人体外周血淋巴细胞短期培养的原理及方法、初步掌握人外周血淋巴细胞染色体的制备技术、重点人外周血淋巴细胞染色体的制备难点人外周血淋巴细胞染色体的制备自学内容无使用教具显微镜等试验器材相关学科知识细胞生物学教 学 法示教讲授内容纲要、要求及时间分配外周血淋巴细胞染色体的制备：一、 实验目的：1、 了解人外周血淋巴细胞短期培养的原理及方法；2、 初步掌握人外周血淋巴细胞染色体制备的技术二、 实验原理：1、 细胞增殖类型：（1） 周期性细胞：即连续分裂的细胞。如：胚胎细胞、干细胞、肿瘤细胞等；（2） 暂时不增殖细胞：细胞停留在G1期，条件合适又会进入细胞周期进行增殖，又称G0细胞。如肝细胞、肾细胞等实体细胞。（3） 终端分化细胞：永久失去增殖能力。如表皮角化细胞、肌肉细胞、成熟红细胞等。2、 在外周血淋巴细胞中以小淋巴细胞为主，属于第二种增殖类型，即G0细胞。3、 PHA：植物血凝激素，可刺激淋巴细胞转化成淋巴母细胞重新进入细胞周期进行有丝分裂。4、 培养条件：（1） 培养液：模拟机体内细胞的营养环境；（2） 小牛血清：为细胞生长、增殖提供生长因子；（3） 培养温度：37。（4） pH：中性。5分钟20分钟讲授内容纲要、要求及时间分配（附页）5、 培养时间：体外培养72小时左右时，大多是细胞处于第二个细胞周期分裂期的中期。6秋水仙素：有丝分裂阻断剂，可影响微管的聚合与解聚，不能使有丝分裂中期染色体分开而使有丝分裂中止。三、方法与步骤：a) 用品处理及采血、接种、培养均在实验前完成。2实验前34h加秋水仙素，使终浓度为0.05ug/ml，继续培养4h3终止培养，取培养物1000r/分钟810分钟,弃去上清液。4低渗处理：在沉淀中加入37的0.075mol/ml的KCl8ml，3720分钟（低渗的作用：使细胞吸水膨大，经过处理后，在滴片时细胞破碎，染色体散开；是染色体吸水膨大，利于观察）5固定：加固定液1ml，混匀，离心1000r/分钟810分钟,弃上清，在沉淀中再加固定液6ml，静置15分钟，离心，1000r/分钟810分钟，弃上清。（固定的作用：使大分子交联在一起，经过处理后，不致使细胞内的结构发生大的变形，以最大限度的保证细胞正常生理状况下的形态及结构）