高敏肌钙蛋白的应用

高敏肌钙蛋白T的应用,Contents,为何要使用肌钙蛋白为何要使用高敏肌钙蛋白为何要使用高敏肌钙蛋白T如何解读高敏肌钙蛋白T检测结果,Contents,为何要使用肌钙蛋白为何要使用高敏肌钙蛋白为何要使用高敏肌钙蛋白T如何解读高敏肌钙蛋白T检测结果,急性心肌梗死(MI)后心脏标志物的分泌心脏标记物升高量与心肌坏死程度成正比,French J and White H Heart 2004; 90(1): 99106.,心脏标志物检测的历史,AST, angiotensin sensitivity test; CK, creatine kinase; INH, immunoassay; LD, lactate dehydrogenase,肌钙蛋白生理 (Troponin),肌纤维由平行的粗丝和细丝组成网状结构。粗丝是肌球蛋白复合体；细 丝由肌动蛋白，原肌球蛋白和肌钙蛋白组成 肌钙蛋白在骨骼肌和心肌中广泛存在:肌钙蛋白C结合Ca离子 存在于骨骼肌和心肌肌钙蛋白I是肌动蛋白抑制亚基 仅存在于心肌中肌钙蛋白T是原肌球蛋白结合亚基, 推动肌肉收缩仅存在于心肌中,心 肌 纤 维,肌钙蛋白是特异性最好的心脏标志物,43名马拉松选手奔跑3天后，血液中肌钙蛋白浓度未有升高肌红蛋白和CKMB则有升高,Clin Chem 43;3:458-466; 1997,心肌损伤后，肌钙蛋白T浓度升高时间早，持续时间长是理想的心肌损伤标志物,French J and White H Heart 2004; 90(1): 99106.,*症状出现后时间,肌钙蛋白是诊断心梗的最佳生物标志物2007年NACB指南推荐,不稳定心绞痛和非ST段抬高心肌梗死患者的管理 2007年ACC/AHA 指南,早期危险分层推荐Class I 对于所有表现为胸部不适的怀疑ACS患者均应进行心脏标志物检测心脏特异性肌钙蛋白是最佳的标志物症状出现6小时内心脏标志物检测阴性的患者，应在812小时内复测心脏标志物Class IIa心脏标志物至少应连续检测23次，间隔68小时，以评估梗死范围和坏死程度Class IIb患者症状出现6小时内，肌钙蛋白可以与早期心脏损伤指标 （如肌红蛋白）联合检测患者症状出现6小时内，应综合判断肌钙蛋白2小时变化情况和肌红蛋白2小时变化情况患者症状出现6小时内，可同时检测肌红蛋白与肌钙蛋白基线水平和90分钟变化趋势,肌钙蛋白是最佳诊断心肌损伤标志物 2007年ESC 指南,心脏肌钙蛋白是最佳的诊断心肌损伤的标志物比传统心脏酶谱（如CK和CKMB）有更好的灵敏度和特异性肌红蛋白对于心肌细胞损伤的灵敏度和特异性不佳，ESC不推荐用于常规诊断和危险分层肌钙蛋白诊断心肌梗死的参考值应使用健康人群99百分位参考值99百分位参考值的检测偏异度应小于10肌钙蛋白检测的血样应正确采集应在60分钟内得到检测结果如果初次检测阴性，应在612小时内复查 结合其他心肌缺血症状（胸痛，ST段改变），肌钙蛋白阳性可诊断心梗,ACS 诊断过程中肌钙蛋白的使用2007年ESC指南推荐 诊断流程,Europeon Heart Journal (2007)28,1598-1660,Contents,为何要使用肌钙蛋白为何要使用高敏肌钙蛋白为何要使用高敏肌钙蛋白T如何解读高敏肌钙蛋白T检测结果,MI早期诊断所遇到的挑战,肌红蛋白/CKMB敏感性特异性,高敏肌钙蛋白T敏感性特异性,肌钙蛋白敏感性 特异性,为何要使用高敏肌钙蛋白,高敏肌钙蛋白带来检验的进步 更高的敏感性更佳的准确度高敏肌钙蛋白带来临床的获益提前诊断心梗时间发现更多心梗患者,为何要使用高敏肌钙蛋白,高敏肌钙蛋白带来检验的进步 更高的敏感性更佳的准确度高敏肌钙蛋白带来临床的获益提前诊断心梗时间发现更多心梗患者,制作工艺不断进步，肌钙蛋白检测水平不断提高,cTnT-hs与第四代肌钙蛋白T比较更低的检测阈值，更精确的检测参考值,cTnT-hs沿用了最先进的电化学发光技术,先进的检测技术 电化学发光技术 电化学发光免疫测定法（Elecsys）发展于 1996年，它在发光反应中加入了电化学反应，是继放射免疫、酶免疫、化学发光免疫测定之后的新一代标记免疫测定技术，是电化学和免疫测定相结合的产物。世界公认的 最先进 的临床免疫检测技术,肌钙蛋白：先进的电化学发光法,以三明治模式应用2个cTnT特异性鼠单克隆抗体作为抗原结合片段（FAB）。抗体识别位于cTnT分子中部的表达位（氨基酸位125-131和135-147）。检测基于电化学发光免疫分析应用钌的三联啶金属错合物（II）作为标记,高敏肌钙蛋白T：更先进的检测技术,生物素捕获抗体保持不变。检测抗体的基因经过重新设计，用人IgG C1区域取代鼠单克隆抗体FAB片段的连续C1区域，形成人鼠嵌合型检测抗体获益：进一步减少易受嗜异性抗体（HAMAs）的干扰 ，提高了检测的准确度样本量由15L增加到50L，增加检测抗体的钌浓度，和通过缓冲区优化降低背景信号来实现 获益：提高了分析检测的灵敏度，最低检测阈值由0.01ng/ml降低到0.003ng/ml,高敏肌钙蛋白检测过程,生物素捕获抗体（2.5g/mL），钌标记检测抗体（2.5g/mL），样本在均相中培养4.5分（Elecsys 2010/cobas e 411；STAT应用）或9分钟（Modular E170/cobas e 611；正常应用）。添加链霉亲和素包裹的珠，在第二个4.5或9分钟的培养期内所形成的免疫复合物结合成微粒物。在第二次培养期后，反应混合物被转送入测量单元，其中珠被磁极捕获至电极表面。清洗测量单元去除未绑定的标记并注满包含三丙胺的检测缓冲液。给电极施以电压后，释放出的化学发光可以由光电倍增器检测到。结果通过2点校准曲线确定且具有仪器特异性。,cTnT-hs比第四代肌钙蛋白T有更好的检测灵敏度TnT gen 4th (10% CV) &TnT-hs (99th percentile),507位超过20分钟胸痛患者,每个心脏标志物都应建立参考决定范围，且是基于正常健康无心脏疾病史的人群（参考人群）对于心脏肌钙蛋白和CK-MB值的升高应定义为测量值超过参考对照组的第99百分位数每个检测第99百分位数变异系数CV应 10%,NACB/IFCC指南对于ACS心脏标志物检测的建议检测99百分位参考值变异系数(CV)10%,Apple F et al. NACB Practice Guidelines in ACS; Circulation 2007, 352-355,NACB： National Academy of Clinical Biochemistry美国临床生化科学院 IFCC：international federation of clincal chemistry and laboratory medicine国际临床化学学会,初步结果 (445 人) 第99百分位数 = 0.014 ng/ml,cTnT-hs正常人群中第99百分位数:0.014 ng/ml,Confidential: For Internal Use Only,来自546位健康志愿者,TnT-hs检测10% CV为0.013 ng/ml小于99百分位参考值,符合指南对于检测标准的要求,10% CV at 0.013ng/ml,TnT-hs 在第99百分位数的URL值时能小于10% CV (高敏肌钙蛋白T 0.014ng/ml结果解读： 肌钙蛋白异常升高，存在心肌坏死。是否为心肌梗死，应连续检测高敏肌钙蛋白T，并结合病史体征、ECG和影像学证据综合判断后续步骤： 间隔3，6，9，12小时，连续检测高敏肌钙蛋白T，并结合病史体征、ECG和影像学证据。若高敏肌钙蛋白T持续升高幅度 20%,则急性心肌梗死可能性大,高敏肌钙蛋白T升高的非缺血性心脏病原因,急性神经系统疾病,包括卒中或蛛网膜下腔出血浸润性疾病,如淀粉样变性、血色病、肉状瘤病、硬皮病炎症性疾病,如心肌炎、心肌扩张性疾病、心内膜炎、心包炎 药物毒性或毒素危重患者,尤其是呼吸衰竭或脓毒症患者烧伤患者,尤其是烧伤30%体表面积者过度劳累者,心脏挫伤,或由手术、消融、起搏器等引起的心脏创伤急性或慢性充血性心力衰竭主动脉夹层主动脉瓣膜疾病肥厚型心肌病快速或缓慢性心律失常,或心脏传导阻滞心尖球形综合征横纹肌溶解伴心肌损伤肺栓塞、严重肺动脉高压肾功能衰竭,如何解读高敏肌钙蛋白T检测结果,检测结果： 高敏肌钙蛋白T 0.014ng/ml结果解读： 肌钙蛋白结果正常，未提示有心肌坏死。仍应连续检测高敏肌钙蛋白T，并结合病史体征、ECG和影像学证据综合判断。连续两次，间隔为612小时的高敏肌钙蛋白T检测阴性方能排除急性心肌梗死后续步骤：连续两次，间隔为612小时的高敏肌钙蛋白T检测阴性方能排除急性心肌梗死,总结,肌钙蛋白检测已成为各种指南诊断急性心肌梗死的“金标准”高敏肌钙蛋白T的最低检测浓度仅为0.003pg/ml，是目前灵敏度最佳的肌钙蛋白高敏肌钙蛋白T第99百分位参考值的检测变异系数(CV) 10%,完全符合NACB/IFCC/ESC/ACC的检测要求高敏肌钙蛋白T能比第四代肌钙蛋白更早发现心梗，且连续检测能进一步提高其检测的灵敏度和特异性,Thank you for your attention,Roche Diagnostics (Shanghai) Limited Shanghai 200031China,This presentation is our in