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文档简介
1.1dna重组技术的基本工具课下提能一、选择题1下列关于限制酶的说法正确的是()a限制酶主要是从真核生物中分离纯化出来的b一种限制酶通常只能识别一种特定的核苷酸序列c不同的限制酶切割dna后都会形成黏性末端d限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键解析:选b限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的,a错误;一种限制酶通常只能识别一种特定的核苷酸序列,b正确;dna分子经限制酶切割后会形成黏性末端或平末端,c错误;限制酶的作用部位是双链dna分子特定核苷酸之间的磷酸二酯键,d错误。2(2019扬州期末)下列有关限制酶和dna连接酶的叙述正确的是()a用限制酶剪切获得一个目的基因时得到两个切口,有2个磷酸二酯键被断开b限制酶识别序列越短,则该序列在dna中出现的概率就越大c序列catg和ggatcc被限制酶切出的黏性末端碱基数不同dt4dna连接酶和ecoli dna连接酶都能催化平末端和黏性末端的连接解析:选b用限制酶剪切获得一个目的基因时得到两个切口,有4个磷酸二酯键被断开,a错误;限制酶识别序列越短,则该序列在dna中出现的概率就越大,b正确;序列catg和ggatcc被限制酶切出的黏性末端碱基数相同,都是4个,c错误;t4dna连接酶和ecoli dna连接酶都能催化黏性末端的连接,其中只有t4dna连接酶还可以连接平末端,d错误。3(2019深圳期末)下列关于基因工程中的dna连接酶的叙述不正确的是()adna连接酶的化学本质是蛋白质bdna连接酶能够连接两个dna片段之间的磷酸二酯键c基因工程中可以用dna聚合酶替代dna连接酶d根据来源不同,dna连接酶可分为ecoli dna连接酶和t4dna连接酶两大类解析:选cdna连接酶的化学本质是蛋白质,根据来源不同可分为ecoli dna连接酶和t4dna连接酶两大类,dna连接酶连接的是两个dna片段之间的磷酸二酯键,而dna聚合酶连接的是dna片段与游离的脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键,因此在基因工程中不能用dna聚合酶替代dna连接酶。4下列关于dna连接酶的相关叙述,正确的是()adna连接酶需要模板,连接的是两条链碱基对之间的氢键bdna连接酶连接的是黏性(平)末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖ct4dna连接酶只能连接黏性末端两条链主链上的磷酸和核糖decoli dna连接酶既能连接平末端,又能连接黏性末端解析:选bdna连接酶不需要模板,催化形成的是磷酸二酯键,a错误;dna连接酶连接的是黏性(平)末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖,使两者之间形成磷酸二酯键,b正确;t4dna连接酶既可以连接黏性末端,也可以连接平末端,连接的是两条链主链上的磷酸和脱氧核糖,c错误;ecoli dna连接酶只能连接黏性末端,d错误。5(2019太原一模)研究人员想将生长激素基因通过质粒介导进入大肠杆菌细胞内,以表达产生生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因:a是抗链霉素基因,b是抗氨苄青霉素基因,且目的基因不插入到基因a、b中,而大肠杆菌不带任何抗性基因,则筛选获得“工程菌”的培养基中应加抗生素()a仅有链霉素b仅有氨苄青霉素c同时有链霉素和氨苄青霉素d无链霉素和氨苄青霉素解析:选c分析题意可知,质粒中存在两个抗性基因:a是抗链霉素基因,b是抗氨苄青霉素基因,且目的基因不插入到基因a、b中,即目的基因的插入不会导致标记基因失活。由于“工程菌”中具有两种标记基因即抗性基因,所以在培养基中同时加入这两种抗生素,即可挑选出相应的工程菌。6下列有关基因工程的叙述,错误的是()a最常用的载体是质粒b工具酶主要有限制性核酸内切酶和dna聚合酶c该技术人为地增大了生物变异的范围,实现了种间遗传物质的交换d基本原理是基因重组解析:选b基因工程中最常用的载体是质粒,a正确;基因工程的工具主要有限制性核酸内切酶、dna连接酶和运载体,其中限制性核酸内切酶和dna连接酶是两种工具酶,b错误;基因工程可按照人们的意愿定向改造生物的性状,这人为地增大了生物变异的范围,实现了种间遗传物质的交换,c正确;基因工程的基本原理是基因重组,d正确。7(2019河西三模)如图为限制酶bamh和bgl的识别序列及切割位点,实验中用bamh切割dna获得目的基因,用bgl切割质粒,并将它们拼接得到重组质粒。下列相关叙述正确的是()a在酶切过程中,要控制好酶的浓度、温度和反应速率等因素b经两种酶处理得到的重组质粒不一定能再被这两种酶所识别c目的基因经bgl切割后形成的黏性末端是ctacgd分别用两种限制酶切割,保证了目的基因定向插入质粒解析:选b影响酶促反应的因素有温度、ph、酶浓度、底物浓度等,因此酶切过程中,需控制好酶浓度、温度和反应时间等因素,a错误;经两种酶处理得到的重组质粒不一定能再被这两种酶所识别,b正确;目的基因经bgl切割后形成的黏性末端是ctag,c错误;分别用两种限制酶切割dna和质粒,由于形成的黏性末端相同,因此并不能保证目的基因定向插入质粒,d错误。8(2019启东期末)如图为dna分子的某一片段,其中分别表示某种酶的作用部位,则相应的酶依次是()adna连接酶、限制酶、解旋酶b限制酶、解旋酶、dna连接酶c限制酶、dna连接酶、解旋酶d解旋酶、限制酶、dna连接酶解析:选d是氢键,是解旋酶的作用位点;是磷酸二酯键,限制酶可将其断裂;是dna连接酶,可将dna片段之间的磷酸二酯键连接起来。9如图是4种限制酶的识别序列及其酶切位点,下列叙述错误的是()a不同类型的限制酶切割后,有的产生黏性末端,有的产生平末端b不同类型的限制酶切割后可能产生相同的黏性末端c用酶1和酶2分别切割目的基因和质粒,连接形成重组dna分子后,重组dna分子仍能被酶2识别d用酶3和酶4分别切割目的基因和质粒后,其产物经t4dna连接酶催化不能连接形成重组dna分子解析:选d不同类型的限制酶切割后,有的产生黏性末端(酶1和酶2),有的产生平末端(酶3和酶4),a正确;不同类型的限制酶切割后可能产生相同的黏性末端,如题图中的酶1和酶2,b正确;用酶1和酶2分别切割目的基因和质粒,形成的末端序列相同,连接形成重组dna分子后,重组dna分子仍能被酶2识别,c正确;用酶3和酶4分别切割目的基因和质粒后,其产物经t4dna连接酶催化可以连接形成重组dna分子,这是因为t4dna连接酶既能连接黏性末端又能连接平末端,d错误。10下列四条dna片段中可能是由同一种限制酶切割而成的是()abcd解析:选d只有和的黏性末端的碱基是互补的,可能是由同一种限制酶切割而成的。11图甲、乙中的箭头表示三种限制性核酸内切酶的酶切位点,ampr表示氨苄青霉素抗性基因,neo表示新霉素抗性基因。下列叙述正确的是()a图甲中的质粒用bamh切割后,含有4个游离的磷酸基团b在构建重组质粒时,可用pst和bamh切割质粒和外源dnac用pst和hind 切,可以保证重组dna序列的唯一性d导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长解析:选c甲中的质粒只有一个bamh切割位点,切割后形成一个直链dna,含2个游离的磷酸基团,a错误;bamh切割位点在目的基因上,不能用该酶切割外源dna,b错误;用pst和hind切割质粒切成两个片段,用pst和hind 能将外源dna切开,只有含目的基因的片段通过dna连接酶与质粒连接形成的重组质粒符合要求,从而保证重组dna序列的唯一性,c正确;导入目的基因的大肠杆菌,其重组质粒是用pst和hind 切割的,其中的ampr(氨苄青霉素抗性基因)已被破坏,d错误。12(2019宜春联考)限制酶mun和限制酶ecor的识别序列及切割位点分别是caattg和gaattc。如图表示四种质粒和含目的基因的dna片段,其中,箭头所指部位为限制酶的识别位点,质粒的阴影部分表示标记基因。适于作为图示目的基因载体的质粒是()解析:选a由图可知,质粒b上无标记基因,不适合作为载体;质粒c和d的标记基因上都有限制酶的识别位点;只有质粒a上具有与目的基因两端相同的识别序列,且限制酶ecor不会破坏标记基因。二、非选择题13根据基因工程的有关知识,回答下列问题。(1)限制酶切割dna分子后产生的片段,其末端类型有_和_。(2)质粒运载体用ecor切割后产生的片段如下:为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的dna除可用ecor切割外,还可用另一种限制性内切酶切割,该酶必须具有的特点是_。(3)按其来源不同,基因工程中所使用的dna连接酶有两类,即_dna连接酶和_dna连接酶。(4)基因工程中除质粒外,_和_也可作为运载体。解析:(1)dna分子经限制酶切割产生的dna片段末端通常有两种形式,即黏性末端和平末端。(2)若用不同的酶切割目的基因,形成的末端一定要与ecor切割运载体产生的末端相同,这样才能互补连接。(3)根据酶的来源,可将dna连接酶分为ecoli dna连接酶和t4dna连接酶两类。(4)基因工程中常用的运载体有质粒、噬菌体的衍生物和动植物病毒等。答案:(1)黏性末端平末端(2)切割产生的dna片段末端与ecor切割产生的相同(3)ecolit4(4)动植物病毒噬菌体的衍生物14如表所示为几种限制酶的识别序列及其切割位点,图1和图2表示基因工程部分操作过程。请回答下列问题:限制酶bamhhind ecorsma识别序列及切割位点(1)从表中四种酶的切割位点看,可以切出平末端的酶是_。(2)将目的基因与质粒dna缝合时,两条链上的磷酸、脱氧核糖在_酶的作用下连接起来,形成磷酸二酯键;两条链间的碱基对通过_连接起来。(3)图2中的质粒分子可被表中_酶切割,切割后的质粒含有_个游离的磷酸基团。(4)若对图中质粒进行改造,插入的sma酶切位点越多,质粒的热稳定性越_。(5)在相关酶的作用下,甲与乙_(填“能”或“不能”)拼接起来。说明理由_。解析:(1)由表格中四种限制酶切割位置可知,sma可切出平末端。(2)目的基因与质粒缝合时用dna连接酶进行连接,形成磷酸二酯键,两条链之间的碱基通过碱基互补配对原则形成氢键连接起来。(3)根据质粒的碱基序列可知,质粒分子可被ecor酶切割,切割后形成链状dna,有2个游离的磷酸基团。(4)dna分子中cg碱基对越多,热稳定性越高,由题中表格可知,sma酶切割的序列中碱基对都是cg,所以sma酶切位点越多,质粒的热稳定性越高。(5)由图可知,甲和乙的黏性末端相同,在dna连接酶的作用下可以拼接起来。答案:(1)sma酶(2)dna连接氢键(3)ecor2(4)高(5)能二者具有相同的黏性末端15如图为大肠杆菌及载体质粒的结构模式图,据图回答下列问题。(1)a代表的物质和质粒的化学本质相同,都是_,二者还具有其他共同点,如_,_(写出两条即可)。(2)若质粒dna分子的切割末端为,则与之连接的目的基因的切割末端(用同种限制酶切割产生)应为_;可使用_把质粒和目的基因连接在一起。(3)氨苄青霉素抗性基因在质粒dna上称为_,其作用是_。(4)下列可在基因工程中作为载体的是_(多选)。a苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因b噬菌体的衍生物c大肠杆菌的质粒d动植物病毒e动物细胞的染色体
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