血液成分制备的操作规程.docx

血液成分制备的操作规程血液成份的制备目前国内外最常用的方法是手工分离法，它是根据血液成份的比重不同，用物理的方法分离各种血液成份。1设备和器材1.1 设备低温大容量离心机高频热合机计算机、打印机速冻冰箱（-50）贮血冰箱（42）血小板保存箱（振荡仪）净化室或净化台（百级）托盘天平分离支架或分浆夹板1.2器材 采血单袋、转移袋及无菌接头 三联输血袋 四联输血袋子、洗涤生理盐水联袋、止血钳、手术剪、软塑料片（配平物）2各种血液成份的制备2.1红细胞悬液制备用三联袋采集的血液（有效期内），经3500rpm、4、加速9、减速5、离心8分钟。离心操作详见离心机操作规程，离心完毕后挂在分浆支架上，利用虹吸作用将全部血浆分至转移袋，再把另一袋红细胞保养液加入红细胞袋内，混匀热合后输入计算机进行红细胞生成，检验合格后贴上标签即成红细胞悬液。2.2洗涤红细胞制备选用有效期内的全血或红细胞悬液，3500 rpm、4、8分钟离心，详见离心机操作规程。在100 级净化室内连接空袋转移出血浆和白膜层，剩余红细胞中加入同血浆等量的生理盐水，热合后混匀，再以3500 rpm、4、8分钟离心，去除上层盐水及白膜层，重复操作三次以上，最后一次红细胞内加入约等于红细胞量的1/2的生理盐水（要求洗涤后白细胞清除率80%，血浆蛋白清除率98%，红细胞回收率70%），混匀热合后，输入计算机，生成洗涤红细胞，贴上标签即可。2.3浓缩血小板制备泰尔茂三联袋采集的新鲜全血（要求4-6小时内的全血），以1600rpm、22、加速4、减速2、离心10分钟（轻离心），离心完毕后将血液轻轻拿出，切忌晃动，放在分浆支架上，利用虹吸作用分出上层的全部血浆（PRP），热合后，将血浆再以3200 rpm、22、加速9、减速5，分离出上层乏血小板血浆，留下少量血浆（不保存20-30ml，保存的50-70m1）与剩下的血小板混匀，接上全血小样，输入计算机生成血小板，放入血小板保存箱。2.4浓缩白细胞十血小板四联袋采集新鲜全血（4-6小时内的全血）。3200 rpm、22、离心10分钟。分离出上层血浆至一个转移袋，留下约15-20ml血浆，然后将剩下的血浆连同白膜层及白膜层下0.5-1.0cm的红细胞层分离至另一转移袋中，将此转移袋热合混匀，输入计算机生成，即为浓缩白细胞十血小板。2.5少白细胞的红细胞制备有效期内的全血，以3500rpm、4、加速9、减速5、离心10分钟，然后将全部血浆连同血白膜层一并分出，再将红细胞保养液放入红细胞袋中混匀，热合后输入计算机生成少白细胞的红细胞即可。2.6新鲜冰冻血浆制备三联袋采集新鲜全血，以3500rpm、4、加速9、减速5、离心8分钟，分离出上层血浆。将分离的血浆再同样离心一次，分出上层无红细胞及其它碎片的血浆，称出重量输入计算机生成，贴上标签，立即放入-50冰冻贮存，要求采集后6小时内冰冻成块，有效期1年。2.7普通冰冻血浆制备全血在保存超过6-8小时或有效期内的任何时候经重离心（操作同新鲜冰冻血浆），分离出来的血浆，并于-20以下冰冻贮存或保存期超过1年后的新鲜冰冻血浆，即可成为普通冰冻血浆，有效期为5年。2.8冷沉淀的制备 制备冷沉淀的原料为带有转移袋的新鲜冰冻血浆（FFP），把新鲜冰冻血浆放入42冷藏箱中融化，待FFP基本融化，尚有少量冰渣时取出，迅速以3500 rpm、4、加速9、减速5、离心10分钟，在较低的室温下迅速分离上层血浆，剩下不溶解的