血红蛋白检测的临床意义PPT课件

血红蛋白检测的临床意义PRESENTS,2,血红蛋白的结构,血红蛋白分子是由4条多肽链(珠蛋白链)和4个可以结合铁和氧气的血红素组成.,GlOBIN(珠蛋白)-由多肽链组成的蛋白,根据其不同的氨基酸序列进行分类(主要分四类:a,b,g及d)。-这几类多肽链上的大部分结构都是相似的。,血红蛋白的化学特性及酶活性,与氧气的结合:通过将氧气分子固定在二价铁原子上，血红蛋白是将氧气从肺部运输到人体组织中。CO2的运输:与CO的结合:碳氧血红蛋白的形成(Carboxyhemoglobinformation)。血红蛋白的氧化作用:形成高铁血红蛋白酶活性:氧化酶特性,过氧化酶特性,脆化酶特性.,血红蛋白的电泳条带正常范围,Formsobtainedbyglycation,5to8%,HbA1:a2b2,新生婴儿体内的血红蛋白主要成分,3.5%),T/N,CapillaryHemoglobinElectrophoresis,HbE,AmJClinPathol2008;130:824-831,二种仪器性能比较,琼脂糖血红蛋白电泳,毛细管血红蛋白电泳,Chenetal.TheNewEnglandJournalofMedicine2000;343(8):544550,谷氨酰胺,31,非缺失型-地贫的人群筛查,确定筛查人群当一方为SEA携带者时，应筛查另一方是否携带非缺失型-地贫。,非缺失型-地贫的人群筛查,筛查方法,MCV（MCH）？Hb分析？基因诊断？,Hb分析筛查CS,HPLC敏感性76.2%,76.2%,76.2%,(Liaoetal.Hemoglobin201034:175),Hb分析筛查CS,Capillaryelectrophoresis(SebiaCapillarys2)敏感性100%,(Liaoetal.Hemoglobin201034:175),SEBIACAPILLARYS2,血红蛋白异常变异体的电泳原理在电场作用下，不同的带电属性的分子移动能力也各有不同。HYDRAGELHbandCAPILLARYSHb有助于检测出具有临床意义的各类主要血红蛋白疾病。HYDRAGELACIDHb根据血红蛋白在不同酸碱度的琼脂糖胶体上的移动性的差异，从而对血红蛋疾病进行检测。各类血红蛋白的鉴定HbS,HbC,HbD,HbE,excessHbF,HbH,HbBart(inthalassemia)arethemostcommonabnormalhemoglobins.完整的血红蛋白鉴定，需要在两种琼脂糖胶体上电泳条带进行对比。,正常条带,3周新生儿的电泳条带,8周新生儿的电泳条带,AFSC电泳监控条带,HbF,HbA52,7%HbF21,4%HbS18,8%HbA21,3%HbC5,8%,HbS,HbA,HbA2,HbC,“S”型血红蛋白SickleCellsdisease,常见区域:地中海区域国家,非洲赤道区域国家(40%),美洲非裔人群(10%),印度西部,特征:变异体位置b6谷氨酸Glu(negative)缬氨酸Val(neutral),生物学症状:红细胞形状出现变异,形成镰刀型红细胞血红蛋白与氧气结合能力出现下降极易出现溶血现象和贫血症,临床特征:依照形态的不同有所改变.,杂合子:镰刀状细胞(一般无症状)HbA条带:5070%HbS条带:3050%HbA2条带:正常,纯合子:严重的溶血症状HbA条带:缺失HbS条带:80100%HbA2条带:正常或增加(HbF条带大约占020%),伴随HbS型血红蛋白，会同时出现:+地中海贫血+HbC(或其他变异体)+HPFH,脐带血的”S”纯合子,AFSCcontroloverlaying,S,HbA2,HbS,HbF,HeterozygousS/C,AFSCcontroloverlaying,HbC,HbS,HbF,HbA2,HeterozygoteA/S,HomozygoteSwithpresenceHbF,血红蛋白C,发现区域:在黑人出现的非常普遍,非洲的西部和北部,意大利南部,西西里岛.,描述:B6的突变：谷氨酸(negative)赖氨酸(positive)碱性缓冲液:总电荷减少移动变慢,在琼脂糖中和A2在同一水平,在毛细管中比A2更靠近阴极。,临床和生物学特性:形成靶型红细胞,杂合子:(无症状)HbA条带:6070%HbC条带:3040%,纯合子:中度溶血性贫血,巨脾症HbA条带:缺失HbC条带:95100%,如果同时出现HbS:和纯合子的镰刀细胞病一样病理学特征,杂合子A/C,HbA2,HbA,HbC,HeterozygoteA/C,HeterozygoteS/C,血红蛋白D-Punjab,发现区域及频率:多发现在印度.,描述:B121的突变谷氨酸(negative)谷氨酰胺(neutral)(D-LosAngeles=D-Punjab)(根据变异体的突变位置不同，会有6种HbD)碱性缓冲液:总电荷减少在琼脂糖中比HBS移动的慢,在毛细管中比S更靠近阳极,临床和生物学特性:,杂合子:(无症状,仅仅在电泳中符合诊断)HbA条带:6070%HbD条带:3040%,纯合子:非常轻微的贫血HbA条带:缺失HbD条带:100%,HeterozygoteA/D-Punjab,HEMOGLOBINE,常见区域:主要集中在东南亚地区.,特性:变异出现位置b26谷氨酸Glu(negative)赖氨酸Lys(positive),临床表现和生物学特征:,基因杂合体:(无症状)HbAfraction:6570%HbEfraction:3035%,基因纯合体:(轻微异常)HbAfraction:absenceHbEfraction:100%,HomozygousHbE,AFSCcontroloverlaying,HbE,HbA2,HeterozygoteA/E,HomozygoteHbE,HbLepore,b和d链重新组合形成的新型血红蛋白.碱性缓冲液:总电荷减少在琼脂糖中移动的比S慢,在毛细管中比S更靠近阳极,杂合子:HbLepore条带:515%比b地贫的临床症状轻微,纯合子:HbLepore条带:大约30%和b地贫的临床症状相似,发现区域及频率:Lepore(-波士顿华盛顿):主要在意大利家庭发现;也曾经在罗马尼亚澳大利亚以及墨西哥发现过.描述:,HbLepore,AFSCcontroloverlaying,N,Ac.,A0+Lepore,A1,HbA2,HbA,HbF,HbLepore,异常结果分析,-,82,Case2:31YFemale,血红蛋白12.8,红细胞压积37.4(I),A=84.1%F=1.5%A2=5.5%,-,83,31YFemale,Hgb12.8,Hematocrit37.4(II),Alk,Acid,F,S,C,A2,C,S,F,-thalassemia-轻型,A2,A,A,A,A,C,P,C,P,A=93.4%,F=1.1%,A2=5.5%,HbA92.5%HbF2.6HbA24.9%,HbF,HbA,HbA2,67YfemalefromTunisia,Hgb9.1,hematocrit28,MCV62,小红细胞症;betathalassemia轻型,HbH4%HbA94.7%HbA21.3%,HbA,HbA2,HbH,Child9Y,fromLaos,Hgb8,hematocrit27.9,MCV54.1,严重小红细胞症;血红蛋白H病，需要基因筛查,HbHandBarts-Alpha-thalassemia,HBarts,-,87,Case1:13YMale,Hgb8.1,Hct24.0(I),A2=6.1%S=82.8%,-,88,Case1:13YMale,Hgb8.1,Hematocrit24.0(II),Alk,Acid,F,S,C,S,A2+F,C,S,F,S,HgbF/S,A2=4.6%+betathalassemiaminor,A2,A,F,A,C,P,C,P,-,89,Case2:65YMale,Hgb9.4,Hematocrit27.3(I),Co-migrationwithA2,A=62.1%A2=31.7%*,Case2:HbEMigratesSeparatelyFromHbA226GluLys,21Y,pregnantwoman,Hgb13.1,hematocrit38.6,HbA95%HbF2.1%HbA22.9%,Normalpattern,HbFslightlyincreased(pregnancy),Baby2monthsold,fatherfromMartinique,motherfromCentralAfrica,Hgb11,hematocrit29.8,HbF49.5%HbS25.9%HbA21.8%HbC22.8%,HbF,HbS,HbA2,HbC,SCcompoundheterozygoty,Diabeticpatient,54Y,Hgb14.5,hematocrit43.5,MCV88,HbA1cmeasurement(HPLCTosoh),HbA54.7%HbX41.7%HbA23.6%,HbA,HbA2,HbX,Normalhemogram;compatiblewithheterozygoteA/D;Tobeidentifiedbygenotyping,HbA51.8%HbA22.9%HbC35.9%,HbA,HbA2,HbC,Diabeticpatient,61Y,Hgb11.6,hematocrit34.8,MCV85,Slightanemia;compatiblewithheterozygoteA/CTobeidentifiedbygenotyping,Adoptedchild,4Y,originatedfromHaiti,Hgb10.9,Hematocrit31.3,MCV76.9,HbA97.5%HbA21.4%HbX1.1%,HbA,HbA2,HbX,Slightanemia;heterozygousDeltamutation,asymptomatic,Diabeticpatient,73Y,Hgb10.2,hematocrit30.8,MCV87.3,Alphachainmutation;genotypingconfirmation:HbWinnipega75AspTyr,HbA-Wi,HbA2-Wi,HbA,HbA2,HbA90.3%HbF3.8%HbA25.9%,HbA,HbF,HbA2,HbA64%HbS33.1%HbA22.9%,HbA,HbS,HbA2,HbA2.2%HbF67.3%HbS29.1%HbA21.4%,HbA,HbF,HbS,HbA2,Father:BetathalassemiaminorMother:HeterozygoteAS,Baby2monthsold:AssociationS-betathalassemia,HbLeporeonMinicap/Capillarys,N,Ac.,A0+Lepore,A1,HbA2,HbA,HbF,HbLepore,AFSCcontroloverlaying,HbLepore,b和d链重新组合形成.在碱性缓冲液下电泳:总体带电荷下降电泳位置出现在S型血红蛋白附近,基因杂合体:HbLeporefraction:515%Clinicalsignsofminorbthalassemia,基因纯合体:HbLeporefraction:about30%Clinicalsignsofhomozygousbthalassemia,常见区域:Lepore(-BostonWashington):常见于意大利人群;同样常见于在罗马尼亚,澳大利亚和墨西哥人群.特点:,a47AspHis,HbHasharon,HbA,HbA2,HbF