标准解读

《GB/T 34738-2017 蜜蜂囊状幼虫病荧光PCR检测方法》是一项国家标准，专门针对蜜蜂中囊状幼虫病的检测制定了详细的荧光定量PCR技术规范。该标准适用于对蜜蜂样本进行囊状幼虫病毒（Chronic bee paralysis virus, CBPV）感染状态的快速准确鉴定。

标准首先定义了适用范围、术语和定义等基本内容，为后续操作提供理论基础。其中明确了“囊状幼虫病”是由特定病毒引起的一种蜜蜂疾病，主要影响幼龄阶段的蜜蜂，并通过直接接触传播给其他个体。

接着，《GB/T 34738-2017》详细描述了实验所需材料与试剂的选择要求，包括但不限于核酸提取试剂盒、反转录酶、Taq DNA聚合酶以及特异性引物探针设计原则等关键组分。这些成分对于确保实验结果准确性至关重要。

在样品处理方面，本标准提供了从采集到保存再到前处理的具体步骤指导，强调了正确采集方法的重要性及如何避免交叉污染等问题。此外还特别指出了不同类型的样品（如活体成年蜜蜂、死亡蜜蜂或疑似受感染区域）应采用相适应的方法来进行处理。

关于PCR反应体系建立，《GB/T 34738-2017》给出了推荐使用的反应条件参数设置建议，比如退火温度、延伸时间长度等，同时也允许根据实验室具体情况适当调整以达到最佳扩增效果。同时，在数据解释部分，则是基于Ct值来判断样本是否含有目标病毒序列，并设定了阳性对照和阴性对照作为质量控制手段之一。


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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2017-11-01 颁布
  • 2018-05-01 实施
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GB∕T 34738-2017 蜜蜂囊状幼虫病荧光PCR检测方法_第1页
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ICS11220 B41 . 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 GB/T347382017 蜜蜂囊状幼虫病荧光 PCR 检测方法 Methodofthereal-timePCRforthedetectionofhoneybeessacbrooddisease2017-11-01发布 2018-05-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发 布 中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会 GB/T347382017 前 言 本标准按照 给出的规则起草 GB/T1.12009 。 本标准由中华人民共和国农业部提出 。 本标准由全国动物卫生标准化技术委员会 归口 (SAC/TC181) 。 本标准起草单位 中华人民共和国吉林出入境检验检疫局 吉林大学 中华人民共和国福建出入境 : 、 、检验检疫局 。 本标准起草人 宋战昀 冯新 孟日增 刘金华 魏春艳 牟峻 王振国 郑腾 孟庆峰 蔡阳 肖成蕊 : 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、王伟利 。 GB/T347382017 蜜蜂囊状幼虫病荧光 PCR 检测方法1 范围 本标准规定了蜜蜂囊状幼虫病荧光 检测方法 PCR 。 本标准适用于蜜蜂及其幼虫中囊状幼虫病的检测 。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 凡是注日期的引用文件 仅注日期的版本适用于本文 。 , 件 凡是不注日期的引用文件 其最新版本 包括所有的修改单 适用于本文件 。 , ( ) 。 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T6682 出入境动物检疫采样 GB/T18088 3 试剂和材料 除非另有规定 仅使用分析纯试剂 所有试剂均用无 酶污染的容器 用焦碳酸二乙酯水处理 , 。 RNA ( 后高压灭菌 分装 ) 。31 水 三级 . ,GB/T6682, 。32 蜜蜂囊状幼虫病毒 . 。33 引物和探针 上游引物 下游引物 . , F1(10pmol/L):5-AAGTTGGAGGCGCGY ATTTG-3, 探针R1(10pmol/L):5-CAA ATG TCTTCTTAC DAG AAG YAA GGA TTG-3, P1(5pmol/L):5-FAM-CGGAGTGGA AAG AT-TAMRA-3。34 磷酸盐缓冲盐水 配制方法见 . , A.1。35 总 抽提试剂 . RNA 。36 氯仿 . 。37 异丙醇 . 。38 乙醇 . 75% 。 注 用新开启的无水乙醇和焦碳酸二乙酯水配制 : 。39 焦碳酸二乙酯处理的水 . 。310 反转录酶 . 。311 酶抑制剂 . RNA (40U/L)。312 反转录酶缓冲液 . 5 。313 反应缓冲液 含镁离子 . 10PCR ( )。314 聚合酶 . DNA (5U/L)。315 三磷
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