《微生物学检验》复习思考题参考答案1

第1页共82页宜春学院医学院杨婧编写1微生物学检验复习思考题参考答案绪论1、微生物的概念、特点，微生物分哪三型八大类微生物是存在于自然界的一大群体形微小、结构简单、肉眼直接看不见，必须藉助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍、数千倍，甚至数万倍才能观察到的微小生物。包括细菌、病毒、真菌等三类。特点个体微小，结构简单比表面积大、吸收多、转化快代谢旺盛，繁殖迅速种类繁多，分布广泛适应力强，容易变易按结构和组成不同，可分为三型八大类非细胞型微生物病毒原核细胞型微生物（广义的细菌）包括细菌（狭义的细菌）、支原体、立克次体、衣原体、螺旋体及放线菌。真核细胞型微生物真菌2、简述临床微生物学检验的主要任务有哪些研究感染性疾病的病原体特征提供快速、准确的病原学诊断指导临床合理使用抗生素监控医院感染3、简述临床微生物学检验的目的和核心任务是什么临床微生物学检验的目的是为感染性疾病提供微生物学诊断，以达到治疗、控制和预防感染性疾病的扩散。微生物学检验的核心任务是快速、准确地进行病原学诊断和药敏检测，为临床感染性疾病的诊断、治疗提供依据。4、简述临床微生物检验的原则。确保临床标本可靠；全面了解机体正常菌群；保证检验质量、快速准确提供信息；微生物学定性、定量和定位分析，并结合病情（三定一结合）；加强与临床联系。5、填空题根据微生物能耐受不同的温度，人们常用、和第2页共82页宜春学院医学院杨婧编写2来保存菌种。细菌的具有高度抗热性，这常给消毒带来困难。生物学性状基本相同的细菌群体构成一个菌种，不同来源的同一菌种的细菌称为该菌的不同_；性状相近关系密切的若干菌种构成_；具有某种细菌典型特征的菌株称该菌的_。普通冰箱（4C）；低温冰箱（20C）；干冰（70C）；液氮（196C）；芽胞菌株、菌属、标准菌株（典型菌株）细菌的形态与结构1、名词解释细菌L型；中介体；质粒；芽胞；荚膜肿胀试验细菌L型是指细胞壁缺陷型的细菌。1935年KLIENEBERGER首先在LISTER研究所发现而得名。中介体细菌细胞膜向细胞质内陷、折叠、卷曲形成的囊状物，多见于G菌。中介体参与细菌的分裂和能量的产生，有类似于真核细菌纺锤丝与线粒体的作用。质粒存在于细胞质中的带有遗传信息、控制细菌的某些特定遗传性状、能够自我复制的染色体以外的闭环双链DNA。或细菌的胞质DNA。芽胞某些细菌在一定的环境条件下，胞质脱水浓缩，在菌体内形成一个圆形或卵圆形小体，是细菌的休眠形式，即为芽胞。其抵抗力强，衡量灭菌效果时，常以杀死芽胞作为判断指标。芽胞的大小、形态、位置等随菌种而异，有助于细菌鉴别。荚膜肿胀试验某些细菌的荚膜与同型抗血清作用后增厚变宽，此试验为荚膜肿胀试验。可作为肺炎链球菌等细菌的血清学诊断。2、细菌的基本结构与特殊结构以及它们的主要功能。G菌与G菌的细胞壁的比较。G菌与G菌细胞壁差异的临床意义。基本结构细胞壁、细胞膜、细胞质、核质细胞壁的功能维持菌体的固有形态，保护细菌抵抗外界低渗环境（主要功能）；参与菌体内外物质交换；带有多种抗原，决定细菌的免疫原性。诱发机体产生免疫应答并与血清分型有关。G菌外膜是一种屏障结构，阻止某些抗生素的进入，成为细菌耐药的机制之一。某些G有表面蛋白、G菌内毒素等与细菌的致病性有关。与细菌染色性密切相关。细胞膜的功能物质转运；生物合成；细胞呼吸；形成中介体，参与细菌分裂等。细胞质的功能是细菌合成蛋白质和核糖核酸的场所；是细菌进行新陈代谢的场所。核质的功能是细菌的遗传物质，控制细菌的各种遗传性状。细菌的特殊结构荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢。荚膜的功能抗吞噬作用；黏附作用；抗有害物质的损伤；具有抗原性。荚膜染色特点不易着色。常用墨汁负染法染色，可见菌体周围一圈未着色的透明圈，也第3页共82页宜春学院医学院杨婧编写3可用荚膜染色法。鞭毛的功能是细菌的运动器官；有些鞭毛（如霍乱弧菌、空肠弯曲菌）与细菌的致病性密切相关；具有抗原性，可籍此鉴定细菌及对细菌分类鞭毛的检测方法电子显微镜观察；经特殊染色（鞭毛染色）使鞭毛变粗后用光学显微镜观察；半固体培养基穿刺接种观察生长情况间接判断该菌有无鞭毛（这是鉴定细菌是否有动力最简单的常用的方法）。悬滴法或压滴法观察细菌的动力间接判断该菌有无鞭毛；菌毛的功能普通菌毛细菌的黏附结构，与细菌的致病性有关。性菌毛介导接合，细菌的毒力、耐药性等性状可通过此方式传递为某些噬菌体的受体。芽孢的功能根据芽孢形态、大小以及在菌体中的位置，有利于细菌的鉴别；杀死芽孢为灭菌的可靠指标（杀灭芽胞最可靠的方法是高压蒸气灭菌法）；可以成为某些传染病潜在的传染源芽孢本身不致病，但当它发芽转变为繁殖体后，可引起疾病。在人类，有四种常见的严重的传染病是由能形成芽孢的细菌引起的炭疽杆菌、肉毒梭菌、破伤风梭菌和产气荚膜梭菌。革兰阳性菌与革兰阴性菌细胞壁结构比较如下细胞壁革兰阳性菌革兰阴性菌组成聚糖骨架、肽侧链和肽交桥聚糖骨架、肽侧链结构类型三维空间结构二维平面结构强度较坚韧较蔬松厚度厚，2080NM薄，1015NM肽聚糖层数多，可达50层少，1层肽聚糖含量多，占细胞干重5080少，占细胞干重520磷壁酸外膜对溶菌酶、青霉素的敏感性敏感不敏感革兰染色性紫色红色G菌与G菌细胞壁差异的临床意义体现在细菌染色性、抗原性、致病性、对抗生素敏感性的不同。项目革兰阳性菌革兰阴性菌与细胞壁的关系染色性紫色红色细胞壁对酒精的通透性抗原性主要为磷壁酸主要为外膜细胞壁的化学组成不同毒性无内毒素（以外毒素为主）有内毒素内毒素为阴性菌细胞壁成分对青霉素的作用有效无效作用部位为肽聚糖五肽交联桥对溶菌酶的作用有效无效作用部位为肽聚糖聚糖骨架3、简述细菌L型的形成、主要生物学性状及其临床意义。形成第4页共82页宜春学院医学院杨婧编写4细菌细胞壁的肽聚糖结构受到理化或生物因素（溶菌酶、溶葡萄球菌素、青霉素、胆汁、抗体、补体等）的直接破坏或合成受到抑制后形成。G菌原生质外仅有细胞膜包住称原生质体，G菌尚有外膜保护称原生质球。主要生物学性状高度多形性；着色不匀，大多染成革兰阴性；培养条件要求高，必须在高渗低琼脂含血清的培养基中生长；生长缓慢（27天），菌落呈荷包蛋样；去除诱发因素后，有些L型可回复为原菌；生化反应与原菌有明显差异；存在于细胞壁的抗原减弱或丢失；临床意义可引起慢性和反复发作的感染，如尿路感染、骨髓炎、心内膜炎等，并常在使用作用于细胞壁的抗菌药物治疗过程中发生。治疗对作用于细胞壁的抗生素耐药性，而对作用于核酸或蛋白质合成的抗生素仍敏感。4、填空题细菌根据外形，主要有、三大类。细菌的基本结构为、。细菌的特殊结构为、。G菌细胞壁的肽聚糖由、组成。G菌细胞壁的肽聚糖由、组成；G菌的内毒素为。细菌细胞质中有、等重要结构。细菌荚膜的功能是、，普通菌毛的功能为，鞭毛的功能为。细菌的测量单位为。革兰染色的步骤为、，色为革兰染色阳性，色为革兰染色阴性。中介体的功能为、。能在光学显微镜下观察到的细菌特殊结构有、和。荚膜具有、作用和作用。荚膜一般在或形成。鞭毛与细菌的有关，霍乱弧菌的鞭毛还与有关。芽胞不是细菌的，而是细菌的。1个繁殖体只形成个芽胞，1个芽胞发芽也只生成个繁殖体。球菌杆菌螺形菌细胞壁细胞膜细胞质核质荚膜鞭毛菌毛芽孢聚糖骨架肽侧链肽交桥聚糖骨架肽侧链脂多糖荚膜鞭毛芽胞抗吞噬粘附抗有害物质的损伤机体内营养丰富的环境中运动器官致病性繁殖方式休眠状态1个1个第5页共82页宜春学院医学院杨婧编写5细菌的生理1、名词解释热原质；细菌素；内毒素；外毒素。热原质又称致热原，是细菌合成的一种注入人体或动物体内能引起发热反应的物质。细菌素某些细菌菌株产生的一类仅对近缘细菌具有抗菌作用的蛋白质称为细菌素。内毒素即革兰阴性菌细胞壁的脂多糖，其毒性成分为脂质A，当菌体死亡裂解后才释放，是革兰阴性菌的主要致病物质。外毒素是多数革兰阳性菌和少数革兰阴性菌在生长繁殖过程中释放到菌体外的蛋白质，其毒性强，为细菌重要的致病物质。2、简述细菌生长繁殖的基本条件有哪些为什么专性厌氧菌在有氧环境中不能生长繁殖细菌个体的生长繁殖方式二分裂繁殖；繁殖速度细菌分裂数量倍增所需时间，即代时，多数为2030分钟。TB（结核杆菌）约18小时，产气荚膜梭菌为8分钟。细菌生长繁殖的基本条件充足的营养物质包括水、碳源、氮源、无机盐、生长因子等；合适的PH值大多病原菌的最适PH值为7276；适宜的温度大多数病原菌的最适温度为37C；必要的气体环境。专性厌氧菌不能在有氧环境中生长繁殖的原因缺乏EH高的呼吸酶（细胞色素和细胞色素氧化酶）；缺乏分解有毒氧基团的酶（超氧化物歧化酶SOD、触酶、过氧化物酶）3、细菌的合成代谢产物种类及其在医学上的意义与致病性有关的合成代谢产物热原质/致热原、毒素和侵袭性酶；供治疗用的合成代谢产物抗生素、细菌素、维生素；与鉴别细菌有关的合成代谢产物色素。4、细菌的生长曲线可分为几期各自的主要特点是什么细菌生长曲线是将一定量的细菌接种于适宜培养基中进行培养，连续检测细菌在不同培养时间的活菌数目（以菌落形成单位CFU表示），以CFU为纵坐标，培养时间为横坐标，可以作出一条反映细菌生长数变化规律的曲线，即生长曲线。包括迟缓期、对数期、稳定期、衰退期这四个时期。迟缓期代谢活跃，菌体增大，积累酶、辅酶和中间代谢产物，不分裂繁殖，为细菌大量繁殖作好物质准备。对数期细菌繁殖迅速，菌数呈几何级数增长，细菌的生物学性状典型，对外界环境作用敏感，适用于研究细菌的生物学性状和进行药物敏感实验，一般在培养后818小时。稳定期细菌数仍在增加，死菌数与活菌数形成一种动态平衡。其特点形态、染色性等生物学性状常有改变；芽孢，毒素、抗生素等产生；若向培养系统补充营养物质，取走代谢产物，改善培养条件则可延长稳定期。衰亡期死亡菌数增多，超过活菌数，细菌形态显著改变，生理活动趋于停止。一般不用该期细菌作鉴定和研究工作。第6页共82页宜春学院医学院杨婧编写65、根据细菌代谢时对分子氧的需求与否，可将细菌分为哪几类根据细菌代谢时对氧气要求的不同，可将细菌分为专性需氧菌；微需氧菌；兼性厌氧菌；专性厌氧菌四大类。专性厌氧菌不能在有氧环境中生长繁殖的原因缺乏EH高的呼吸酶（细胞色素和细胞色素氧化酶）；缺乏分解有毒氧基团的酶（超氧化物歧化酶SOD、触酶、过氧化物酶）。细菌检验技术1、名词解释培养基；分离培养；纯培养；菌落；细菌的生化反应；IMVIC试验；KIA试验；CAMP试验；荚膜肿胀试验。培养基由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养物制品称为培养基。分离培养临床标本中含有多种细菌，可经过划线接种到固体培养基表面分散开，经过1824小时培养后可得到单个菌落。这种将混杂的细菌在固体培养基表面分散开的培养方法称为分离培养。或将增菌培养物或含菌量多的标本如粪便、脓汁等，直接在平板上划线分离，将其中的目的菌分离出来的培养方法。纯培养挑取一个菌落移种到另一培养基中，长出的细菌为纯种，该方法称为纯培养。菌落单个细菌在固体培养基上生长繁殖形成的单一的肉眼可见的细菌集团，称菌落。许多菌落融合在一起形成菌苔。细菌的生化反应用生化试验的方法，检测细菌对各种基质（糖、蛋白质等）的代谢作用以及形成的代谢产物，从而对细菌鉴别的反应。（原理细菌内所具有的酶不同，因而对营养物质的分解能力也不同，产生的代谢产物也不同，据此可鉴别不同细菌。）IMVIC试验吲哚（I）、甲基红（M）、VP（V）及枸橼酸盐利用（C）四种试验，常用于肠道杆菌的鉴定，合称IMVIC试验。如大肠埃希菌的结果是；产气杆菌的结果是。KIA试验即双糖铁半固体培养基，它是一种复合性的检查生化反应的培养基，可检查4种反应，即葡萄糖、乳糖的发酵反应，是否产生H2S，有无动力等。目前多使用国产双糖铁琼脂粉（KIA），比较方便，效果也好，但只能配制成斜面培养基，不能配成半固体培养基，因而无法观察细菌的动力。KIA试验主要用于肠杆菌科细菌的鉴定和鉴别。CAMP试验B群链球菌产生一种细胞外CAMP因子，可增强金黄色葡萄球菌溶血素的活性，因此，血平板上，在两菌（B群链球菌与金黄色葡萄球菌）交界处出现箭头状溶血区。该试验主要用于B群链球菌的鉴定。荚膜肿胀试验某些细菌的荚膜与同型抗血清作用后增厚变宽，此试验为荚膜肿胀试验。可作为肺炎链球菌等细菌的血清学诊断。2、简述细菌染色标本检查的基本程序、复染色法基本程序与常用方法。细菌染色标本检查的基本程序涂片干燥固定染色。复染色法基本程序初染媒染脱色复染常用方法革兰染色法和抗酸染色法，尤其是革兰染色法在细菌学检验中有重要意义。3、革兰染色的原理、染液组成、染色方法、结果判断、影响因素与临床意义。第7页共82页宜春学院医学院杨婧编写7革兰染色原理通透性说主要是由于两类细菌的细胞壁成分和结构的不同。革兰阴性菌细胞壁中含有较多类脂质，而肽聚糖含量较少。当用酒精脱色时，溶解了类脂质，增加了细胞的通透性，使结晶紫和碘的复合物易于渗出，细胞脱色，经复染后，染上复染液复红的颜色；而革兰阳性菌细胞壁中肽聚糖含量多且交联度大，类脂质含量少，经酒精脱色后，肽聚糖层的孔径变小，通透性降低，酒精不易进入菌体脱色，故细胞仍保留初染液结晶紫的颜色。化学说G菌菌体含有大量的核糖核酸镁盐，可与碘、结晶紫牢固结合，使已着色的菌体不易脱色。等电点说G菌（PI23）低于G菌（PI45），G菌带负电荷比G菌要多，G菌易与带正电荷的碱性染料（结晶紫）结合牢固，因而不易脱色。革兰染色染液组成结晶紫染液、卢戈碘液、95乙醇、稀释石炭酸复红。染色方法结晶紫染液（初染）1分钟，水洗卢戈碘液（媒染）1分钟，水洗95乙醇（脱色）30秒至1分钟，水洗稀释石炭酸复红（复染）1分钟，水洗后，待干后用油镜进行观察。结果判断革兰阳性菌呈紫色，革兰阴性菌呈红色。影响革兰染色的因素操作因素涂片的厚、薄；标本是否固定好；染色与脱色时间的长短。染液因素卢戈碘液放置时间过长；95乙醇挥发；结晶紫与草酸铵混合时间太长等。细菌因素细菌种类；细菌菌龄。影响革兰染色的关键步骤是脱色。革兰染色的临床意义鉴别细菌；选择药物；与致病性有关。4、请写出抗酸染色的染液组成、染色方法及染色结果、原理。染液组成与染色方法固定加温35MIN脱色标本5石碳酸复红3盐酸酒精美蓝复染镜检染色结果红色抗酸性细菌如结核杆菌兰色非抗酸性细菌原理由于结核杆菌细胞壁中含大量脂质，一般不易着色，若经加温或延长染色时间而着色后又能抵抗强脱色剂盐酸酒精的脱色，故又称抗酸杆菌。5、简述细菌细胞壁染色的方法与结果。方法自然干燥固定15MIN35MIN制片10鞣酸05龙胆紫镜检水洗水洗结果有细胞壁的细菌仅菌体周边染成紫色，菌体内部无色；无细胞壁的细菌（如L型细菌）可见整个菌体浓染呈紫色。6、简述细菌不染色标本镜检的常用方法与用途。常用方法压滴法、悬滴法、（暗视野聚光法、相差显微镜检查法等）。应用主要用于观察活菌的动力和运动方式。第8页共82页宜春学院医学院杨婧编写8注意事项检测细菌动力时需注意其真正运动还是分子运动，前者时由于鞭毛引起的有方向性的位移，而后者只是在原地颤动，是由于水分子撞击细菌而引起的布朗运动，无鞭毛的细菌也可有此种分子运动。7、简述培养基制备的一般程序与原则。不同的培养基制备程序不尽相同，但配制一般培养基的程序基本相似，分为以下几个步骤调配熔化矫正PH值过滤澄清分装灭菌检定/质量检验保存。培养基的种类很多，但一般制备原则有三条足够和适当的营养成份。合适的酸碱度。绝对无菌。培养基灭菌要求基础培养基121高压蒸汽灭菌1530MIN。含糖/明胶培养基113灭菌15MIN。鸡蛋、血清培养基血清凝固器间歇灭菌3天3次（7530MIN8030MIN8530MIN）。不耐高温的液体成分如血清、尿素、细胞培养液等滤过除菌。8、简述在细菌学检验中常用的接种方法有哪些细菌接种时，应根据待检标本的种类、检验目的及所用培养基的类型选择不同的接种方法。平板划线接种法分离培养，主要用于固体培养基的接种。目的使混合的细菌呈单个分散生长，形成单个菌落，以便获得纯菌。方法分区划线法适用于含菌量较多的标本如粪便、脓汁连续划线法适用于含菌量较少的标本琼脂斜面接种法用于纯种增菌、保存菌种或生化反应。半固体培养基接种法（穿刺接种法）用于观察细菌动力或生化反应。液体培养基接种法用于纯种增菌或生化反应。倾注平板法用于水、牛乳、饮料、尿液等液体标本及药物、化妆品等的细菌计数。方法是将经灭菌生理盐水适量稀释通常作101105稀释的标本LML，置于灭菌平皿内。注入1015ML已融化并冷至50左右的适宜培养基，凝固后，将平板倒置于37培养1824H，计算菌落形成单位（COLONYFORMINGUNIT,CFU）。求出每毫升或每克标本中所含活菌数。1ML标本中活菌数全平板CFU稀释倍数。我国规定生活饮用水的标准是1ML水中细菌总数100CFU。涂布接种法用于纸片药敏试验和生物制品菌苗的生产。9、简述细菌的培养方法有哪些根据不同标本及培养目的的不同，可采取不同的方法进行培养，常用的有普通（一般）培养法（又叫需氧培养法）、二氧化碳培养法、微需氧培养法及厌氧培养法。普通培养（需氧培养）培养温度3537（采用恒温培养箱）培养时间1824H（个别细菌例外）二氧化碳培养法510CO2。第9页共82页宜春学院医学院杨婧编写9烛缸培养法能自动调节CO2的含量和温度，使用较为方便。二氧化碳培养箱取有盖磨口标本缸或玻璃干燥器，在盖及磨口处涂以凡士林。将接种细菌的培养基放入缸中，加盖密封。随燃烧产生的CO2增加，蜡烛自行熄灭，此时缸内CO2浓度约为510。置37孵箱孵育。化学法（重碳酸钠盐酸法）按每升容积重碳酸钠04G与1MOL/L盐酸035ML比例，分别取两试剂置于容器内，放置于标本缸或干燥器内，密封后倾斜容器，使盐酸与重碳酸钠接触产生CO2。微需氧培养法56O2、510CO2和85N2有些微需氧菌，如空肠弯曲菌、幽门螺杆菌等，在低氧分压的条件下生长良好。可用抽气换气法即用真空泵先将容器内的空气排尽，然后注入56O2、510CO2、85N2气体，然后放入37孵箱孵育。厌氧培养法厌氧培养箱、厌氧袋、厌氧罐、疱肉培养法、硫乙醇酸盐法等。10、按物理性状不同可将培养基分哪几种各有何主要用途并简述细菌在其中的生长现象。培养基按其物理性状可分为固体培养基、半固体培养基与液体培养基三种。分别观察下列生长现象固体培养基细菌得以分离培养生成菌落从而获得纯种，主要用于细菌的分离纯化、鉴定以及药敏试验。菌落分为三型光滑型菌落（S型菌落）；粗糙型菌落（R型菌落）；粘液型菌落M型菌落。半固体培养基多用来检查细菌的动力和短期保存细菌。有鞭毛的细菌可由穿刺线向四周运动播散，培养后穿刺线模糊不清，呈羽毛状或云雾状混浊生长；无鞭毛的细菌，不能运动，仅沿穿刺线生长，穿刺线清晰，穿刺线以外的培养基仍透明澄清。液体培养基主要用于大量繁殖细菌（增菌培养）和观察某些细菌的生化反应。细菌在液体培养基中生长呈三种状态。混浊生长，见于大多数细菌；沉淀生长；菌膜生长，多为专性需氧菌，在培养液表面生长，形成菌膜。11、按用途不同可将培养基分为哪几种请各列出一种常用的培养基。基础培养基如营养肉汤、营养琼脂、蛋白胨水等增菌培养基通用增菌培养基如血平板、血清肉汤等。专用增菌培养基如碱性蛋白胨水用于霍乱弧菌的增菌。选择培养基如SS平板、伊红美兰琼脂平板、亚碲酸钾血琼脂平板、TCBS等。鉴别培养基如糖发酵管、双糖铁培养基等。厌氧培养基如庖肉培养基、硫乙醇酸盐肉汤等。12、简述甲基红试验、VP试验、七叶苷水解试验、靛基质（吲哚）试验、硫化氢试验、尿素酶试验、枸橼酸盐利用试验的原理、培养基、方法、结果与应用。甲基红试验原理葡萄糖丙酮酸大量混合酸PH降至44以下加入甲基红试剂，培养基变红为阳性。培养基葡萄糖蛋白胨水试剂甲基红试剂方法将待检菌接种于葡萄糖蛋白胨水培养基中，培养24D，于培养基内加入甲基红指第10页共82页宜春学院医学院杨婧编写10示剂2D，立即观察结果。结果呈现红色为阳性；橘红色为弱阳性；黄色为阴性。应用主要用于肠杆菌科细菌的鉴别。如大肠埃希菌为阳性，产气肠杆菌为阴性。VP试验原理葡萄糖丙酮酸脱酸生成中性的乙酰甲基甲醇在碱性环境中被空气中的氧氧化成二乙酰二乙酰再与培养基内蛋白胨中的精氨酸所含的胍基反应，生成红色化合物为阳性。培养基葡萄糖蛋白胨水方法将待检菌接种于上述培养基中，于35培养48H后加入甲液5萘酚酒精溶液和乙液40KOH溶液03肌酐，振摇。结果在数分钟内出现红色为阳性；如无红色出现且于354H后仍如故者即为阴性。应用主要用于肠杆菌科细菌的鉴别。该试验常与甲基红试验一起使用，因为前者阳性的细菌，后者通常为阴性。七叶苷水解试验原理某些细菌可将七叶苷分解成葡萄糖和七叶素，七叶素与培养基中枸橼酸铁中的二价铁离子反应，生成黑色的化合物，使培养基呈黑色。培养基七叶苷培养基、胆汁七叶苷培养基。方法将待检菌接种于七叶苷培养基中于35培养48H后观察结果。结果培养基变为黑色为阳性，不变色者为阴性。应用主要用于D群链球菌与其它链球菌的鉴别，前者阳性，后者阴性。也可用于革兰阴性杆菌（克雷伯菌属、肠杆菌属和沙雷菌属）、肠球菌及厌氧菌的鉴别。靛基质（吲哚）试验原理细菌产生色氨酸酶，可分解蛋白胨中的色氨酸，生成靛基质（吲哚），靛基质与试剂对二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰靛基质。培养基蛋白胨水培养基试剂靛基质试剂（含对二甲基氨基苯甲醛）方法挑取纯培养物接种蛋白胨水培养基，于35培养2448H后，沿管壁徐徐加入靛基质试剂05ML，使成两层，观察结果。结果加入试剂后，两者液面接触处出现红色为阳性；无色为阴性。应用用于肠杆菌科细菌的鉴定。硫化氢试验原理某些细菌分解蛋白质中的含硫氨基酸（如胱氨酸、甲硫氨酸），生成硫化氢，硫化氢与培养基中的铁盐（硫酸亚铁）或铅盐（醋酸铅）结合生成黑色硫化物（硫化亚铁或硫化铅）。培养基克氏双糖铁培养基或醋酸铅培养基结果培养基变黑为阳性，不变为阴性。应用常用于肠道杆菌的鉴别。沙门菌属（甲型副伤寒沙门菌为阴性）、爱德华菌属、亚利桑那菌属、枸橼酸杆菌属和变形杆菌属等多为阳性，其他菌书呈阴性。尿素酶试验原理产生脲酶的细菌，能水解尿素生成氨和CO2，氨使培养基呈碱性变色。培养基尿素培养基（PH6568）试剂酚红指示剂方法将被检菌接种于相应的尿素培养基，于35培养1824H后观察结果。阴性时应继续观察4天。第11页共82页宜春学院医学院杨婧编写11结果培养基变红者为阳性；培养基不变色者为阴性。应用肠杆菌科中的变形杆菌属、摩根菌属和普罗威登菌属的鉴定。奇异变形杆菌和普通变形杆菌、雷极普罗威登菌和摩根菌为阳性；克雷伯菌为弱阳性；大肠埃希菌、斯氏和产碱普罗威登菌为阴性。枸橼酸盐利用试验原理某些细菌能利用培养基中的枸橼酸盐作为唯一的碳源，也能利用其中的铵盐作为唯一氮源，细菌生长过程中分解枸橼酸盐产生碳酸盐和分解铵盐生成的氨，使培养基变碱，使指示剂呈碱性反应。培养基枸盐酸盐琼脂斜面培养基试剂溴麝香草酚蓝（PH60以下呈黄色，PH76以上呈蓝色）方法在枸盐酸盐琼脂斜面上浓密划线，大量接种被检菌，于35培养14天，逐日观察结果。结果枸盐酸盐琼脂斜面上有细菌生长，培养基变成深蓝色为阳性；无细菌生长，培养基颜色不变（淡绿色）为阴性。应用有助于肠杆菌科属间的鉴别。埃希菌属、志贺菌属、爱德华菌属和耶尔森菌属均为阴性；产气肠杆菌、沙门菌属、克雷伯菌属、黏质和液化沙雷菌、某些变形杆菌以及枸橼酸杆菌为阳性。13、填空题在形态和染色性上具有特征的致病菌常用方法作初步诊断。如和菌。鉴定细菌常用凝集试验。此方法是用已知检测未知。直接涂片镜检结核分枝杆菌白喉棒状杆菌直接玻片抗体抗原14、综合分析题实验室在对细菌培养时，需先制备培养基，根据所培养的细菌不同，选择不同类型的培养基，如培养营养要求高的细菌时，需制备含血清培养基（即在培养基中加入血清）。细菌的保存常用细菌保存液，有时也用牛奶保存，如幽门螺杆菌。思考题制备培养基过程中应注意什么制备含血清培养基时，基础培养基和血清如何进行消毒灭菌用于保存菌种的牛奶又如何进行消毒灭菌提示1培养基制备过程中应注意无菌操作，以防止微生物的污染。提示2基础培养基通常使用高压蒸汽灭菌法灭菌，以杀灭包括细菌繁殖体和芽胞在内的所有微生物。含血清培养基和用于保存细菌的牛奶，既要对其进行灭菌处理，又不能破坏营养成分，故常用间歇蒸汽灭菌法。提示3在制备培养基过程中，应注意无菌操作，通常可在经紫外线照射后的无菌罩或实验室中进行培养基的分装。提示4在准备含血清培养液时，通常使用过滤除菌法除菌，以确保血清中的营养成分不被破坏。细菌与环境第12页共82页宜春学院医学院杨婧编写121、名词解释正常菌群；条件致病菌；菌群失调症；重叠感染；消毒；灭菌；无菌；无菌操作；噬菌体；前噬菌体；毒性噬菌体；溶原性细菌；滤过除菌法正常菌群定居于正常人体体表及其开放性腔道中的微生物群。在正常情况下对机体有益无害。由于在正常微生物群中以细菌为主，而且对细菌研究得较多而深入，所以将正常微生物群通称为正常菌群。条件致病菌正常情况下不致病，在特定条件下可致病的正常菌群，称条件致病菌（或机会致病菌）。菌群失调症宿主某部位正常菌群中各菌种间的比例发生较大幅度改变并超出正常范围的状态称为菌群失调。由此而引起的病症称为菌群失调症。重叠感染或称为二重感染，是一种后果较为严重的菌群失调症，即在抗菌药物治疗原感染性疾病或预防某些微生物感染的过程中，发生的一种新感染。消毒杀死物体上或环境中的病原微生物的方法。但不一定能杀死含芽孢的细菌或非病原微生物。灭菌杀灭物体上所有微生物的方法。灭菌比消毒要求高，包括杀灭细菌芽胞在内的全部病原微生物和非病原微生物。无菌不存在活的微生物的意思。无菌操作防止微生物进入人体或其他物品的操作技术。噬菌体是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的病毒。前噬菌体整合在细菌染色体上的噬菌体基因。毒性噬菌体能在宿主细胞内复制增殖，产生许多子代噬菌体，并最终裂解细菌的噬菌体，称毒性噬菌体。溶原性细菌染色体上带有前噬菌体的细菌。滤过除菌法用物理阻留的方法除去液体或空气中的细菌，达到无菌的目的。适用于不耐高温灭菌的物品如血清、毒素、抗生素及空气等的除菌。生物安全柜也是根据这个原理，利用高效空气过滤器的过滤作用，除去空气中的微生物，以达到保护操作对象、保护操作者、保护环境的目的。但滤过除菌法只能除去细菌，一般不能除去病毒、支原体、衣原体和细菌的L型。2、正常菌群的生理作用有哪些正常菌群转化为机会致病菌的条件有哪些（简要说明微生态失调的主要原因有哪些）正常菌群的生理作用生物拮抗；营养作用；免疫作用；抗衰老作用；抑肿瘤作用。正常菌群转化为机会致病菌的条件有抗生素的使用导致菌群失调；正常菌群寄居部位改变；宿主免疫功能低下如免疫抑制剂使用、激素、射线照射、细胞毒物的使用导致宿主免疫功能低下。3、常用湿热灭菌方法的种类及其效果与适用范围。巴氏消毒法用较低温度杀灭液体中的病原菌或特定微生物（如结核杆菌）、保持物品中所需不耐热成分不被破坏的消毒方法。持续法61162830分钟；瞬间法7171530秒；常用于消毒牛奶、酒类。煮沸法常用于消毒食具、刀剪、注射器等繁殖体煮沸100，5MIN；芽孢煮沸100，13H。第13页共82页宜春学院医学院杨婧编写13流动蒸气消毒法阿诺蒸锅或蒸笼。繁殖体煮沸100，1530MIN间歇蒸气灭菌法如血清培养基的灭菌。高压蒸气灭菌法一种最有效、最彻底的灭菌方法。在1034KPA（105KG/CM2）蒸气压下，温度1213，维持1520MIN，可杀灭包括芽胞在内的所有微生物。是普通培养基、生理盐水、手术敷料等耐高温、耐湿物品的最佳灭菌法。4、高压蒸汽灭菌法所要求的条件和用途各是什么高压蒸气灭菌法是一种最常用、最有效的灭菌方法，是在密闭的蒸气容器中进行。随着压力升高，蒸气的温度也相应升高，在1034KPA蒸气压下，温度达到1213，维持1520MIN，可杀灭包括细菌芽胞在内的微生物。适用于耐高温、耐潮湿物品的灭菌，如一般培养基、生理盐水、手术用品等。但该温度还不足以灭活朊粒和热原质。5、请叙述紫外线的杀菌作用机制、特点和注意事项。紫外线（UV）的杀菌机制主要是损伤细菌DNA构型，使一条DNA链上相邻的两个胸腺嘧啶共价结合而形成二聚体，从而干扰DNA的复制与转录，导致细菌死亡。特点与注意事项UV的杀菌作用与波长有关240300NM波长的紫外线有杀菌作用，其中以265266NM最强，因其正好与DNA的吸收光谱一致。紫外线的穿透力极弱不能透过玻璃或纸张等，故一般只用于空气消毒及物体表面消毒。杀菌波长的UV对人体皮肤、眼睛有损伤作用，使用时应注意防护。一般用低压水银蒸气灯做紫外线杀菌处理。6、简述乙醇、碘酊、过氧化氢、过氧乙酸、戊二醛、环氧乙烷消毒灭菌的主要特点。乙醇消毒灭菌的机制、特点及主要用途机制去除菌细胞膜中的脂类，并使菌体蛋白质变性与凝固。特点与主要用途以浓度为7075时杀菌力最强。易挥发，需加盖保存，定期调整浓度。主要用于皮肤消毒和浸泡体温计。2025碘酊、05碘伏多用于皮肤黏膜、体温计以及其他物品的表面消毒。过氧化氢机理导致酶蛋白SH基转变为SS，导致酶活性丧失。36过氧化氢KILLMOSTBACTERIA10过氧化氢KILLALLMICROORGANISMINCLUDINGSPORE用途可用于物品表面和皮肤黏膜消毒（如口腔、创口的消毒、厌氧菌感染的消毒）。但对金属制品有腐蚀作用。0203过氧乙酸类似于过氧化氢。2戊二醛机理细菌蛋白和核酸的烷化作用。特点广谱，高效，快速。用途戊二醛以03NAHCO3调整PH至7585，配成2水溶液，浸泡5MIN，适用于精密仪器、内窥镜（不能用热力灭菌法进行灭菌）等的灭菌。环氧乙烷种类杂环类化合物，沸点108，气体消毒剂。机理细菌蛋白和核酸的烷化作用。第14页共82页宜春学院医学院杨婧编写14特点能穿透包裹物，广谱高效，杀灭芽胞，易燃，对人有毒性。用途已广泛用于医疗器械、一次性用具的灭菌。常用的灭菌要求是浓度8001200MG/L；相对湿度5560；50；6H。7、影响消毒灭菌效果的因素有哪些消毒剂的性质、浓度和作用时间消毒剂种类不同，其杀菌效果亦有很大差别，大多数浓度越高，杀菌效果越好，但醇类例外，作用时间越长，杀菌效果越好。微生物的种类与数量菌龄、有无特殊构造等。同种消毒剂对不同的微生物杀菌效果也不一致，且微生物数量越多，所需消毒的时间就越长。温度、湿度温度升高可提高消毒效果。酸碱度酸碱度可影响消毒剂的杀菌效果。有机物环境中有机物的存在，可影响消毒剂的效果。生理盐水清洗污染创口表面。8、化学消毒剂的杀菌机制有哪些各自种类的代表是什么使菌体蛋白变性或凝固，导致细菌死亡酚类（高浓度）、醇类、重金属盐类、酸碱类、醛类干扰细菌的酶系统和代谢某些氧化剂、重金属盐类低浓度与细菌酶蛋白的SH基结合而使有关酶失去活性，导致细菌代谢发生障碍而死亡；损伤细胞膜，能降低菌细胞的表面张力并增加其通透性，胞外液体内渗，导致细菌破裂酚类（低浓度）、表面活性剂、脂溶剂9、毒性噬菌体增殖以何种方式增殖它的增殖过程包括哪几个阶段毒性噬菌体以复制方式增殖。它的增殖过程包括吸附，穿入，生物合成和装配、成熟与释放等步骤。10、填空题正常菌群的组成和数量发生明显改变时，可出现，由此产生的一系列临床症状称为。当正常菌群发生或时，可成为菌。正常菌群对机体的有益作用是、和。引起微生态失调动主要原因是、和。毒性噬菌体以方式进行增殖，增殖过程包括、几个阶段。噬菌体参与的基因转移与重组的方式有和。噬菌体的化学组成主要为_、_。温和噬菌体有三种存在形式_、_、_。菌群失调菌群失调症寄居部位改变菌群失调条件致病菌生物屏障作用营养作用免疫作用抗衰老作用抗肿瘤作用正常菌群寄居部位改变滥用抗生素导致菌群失调机体免疫功能降低复制吸附穿入生物合成成熟与释放第15页共82页宜春学院医学院杨婧编写15转导溶原性转换核酸蛋白质游离的具有感染性的噬菌体颗粒宿主胞质内类似质粒形式的噬菌体核酸前噬菌体细菌的遗传与变异1、名词解释转化；接合；转导；溶原性转换；耐药性变异；卡介苗（BCG）转化是供体菌裂解游离的DNA片段被受体菌直接摄取，使受体菌获得供体菌的遗传性状。（转化是指受体菌直接摄取供体菌游离的DNA片段，从而使受体菌获得供体菌的遗传性状的过程。）接合是细菌通过性菌毛相互沟通，将遗传物质（主要是质粒DNA）从供体菌转移给受体菌，使受体菌获得新的性状。转导是以温和噬菌体为载体，将供体菌的一段DNA转移到受体菌内，使受体菌获得新的性状。溶原性转换噬菌体感染细菌时，噬菌体作为供体，宿主菌染色体中整合了噬菌体的DNA片段，而获得新的遗传性状。耐药性变异细菌对某种抗菌药物由敏感变成耐药的变异称耐药性变异卡介苗卡介二氏将有毒力的牛型结核分枝杆菌接种在含有胆汁、甘油、马铃薯培养基上，经过13年传230代，终于获得一株毒力减弱但仍保持免疫原性的变异株，即卡介苗。2、常见的细菌变异现象有哪些形态、结构变异如L型细菌的产生；荚膜、芽孢、鞭毛的形成与缺失。菌落变异细菌SR变异毒力变异毒力增强的变异与毒力减弱的变异抗原性变异O抗原与H抗原变异；H抗原的I相与II相的互变。耐药性变异细菌对某种抗菌药物由敏感变成耐药的变异称耐药性变异。酶活性变异3、简述细菌耐药性获得的主要机制有哪些钝化酶的产生药物作用靶位发生改变细胞壁的通透性的改变，抗菌药物的渗透障碍主动外排机制细菌主动外排系统的过度表达4、医学上重要的质粒的种类有哪些简述质粒的主要特征。医学上重要质粒的种类致育质粒（F质粒），耐药质粒（R质粒），毒力质粒（VI质粒），细菌素质粒如COL质粒，代谢质粒。质粒的主要特点具有自我复制的能力；编码产物赋予细菌某些性状特征如SEXPILUS、细菌素、毒素和耐药性等；可自行丢失与消除，非生命活动所必需；质粒的转移性可通过接合、转化或转导等方式在细菌间转移；质粒的不相容性与相容性。第16页共82页宜春学院医学院杨婧编写165、细菌基因的转移与重组方式有几种细菌基因转移与重组的方式有转化、接合、转导、溶原性转换和原生质体融合等。6、简述F菌、F菌、HFR的区别以及F菌和HFR的共同特点。F菌带有F质粒具有性菌毛的细菌，这种细菌可通过性菌毛将遗传物质传递给F菌。F菌不带有F质粒无性菌毛的细菌。HFR当F质粒进入受体细菌并将质粒DNA整合到染色体上，这种细菌称为HFR（染色体上整合有F质粒的细菌）。F菌和HFR菌的共同特点是两者都有性菌毛，均可通过接合方式进行基因转移。7、填空题F菌亦称，可经方式变为F菌。R质粒可通过、和等基因转移和重组的方式在细菌间传递耐药性，其中最主要的方式为。通常把细菌的鞭毛从有到无的变异，称为变异，把细菌因受青霉素、免疫血清等作用而致细胞壁缺陷称为变异。雌菌，接合转化，接合，转导，接合HO，细菌L型细菌的感染与免疫1、名词解释侵袭力；毒血症；脓毒血症；败血症；菌血症；外源性感染；内源性感染侵袭力致病菌能突破宿主皮肤、粘膜生理屏障等免疫防御机制，进入机体定居、繁殖和扩散的能力。毒血症是指致病菌侵入宿主机体后，只在机体局部生长繁殖，病菌不进入血循环，但其产生的外毒素入血。外毒素经血到达特定的靶器官和组织，引起特征性的毒性症状。例如白喉、破伤风等。脓毒血症是指化脓性细菌侵入血流后，在其中大量繁殖，并通过血流扩散到机体其他组织器官，产生新的化脓性病灶。例如金黄色葡萄球菌（SAUREUS）引起肝脓肿、肾脓肿、肺脓肿。败血症是指病原菌侵入血流并在其中大量繁殖，产生毒性代谢产物（包括内毒素和外毒素等）所引起严重的全身性中毒症状。例如高热、皮肤和粘膜瘀斑、肝脾肿大等。菌血症是指病原菌由局部入血，一过性从血流到达易感部位后再行繁殖而致病，例如伤寒早期有菌血症。外源性感染病原菌来源于宿主体外的感染。内源性感染病原菌来自病人自身的体内或体表。多数由正常菌群引起；少数是以潜伏状态存在于体内的致病菌引起，如结核分枝杆菌、HSV、CMV。2、细菌性感染的发生与哪些因素有关（细菌的致病机制如何）侵入体内的微生物（细菌）的数量侵袭力菌体表面结构与侵袭性酶等侵入体内的微生物（细菌）的毒力毒素内、外毒素侵入途径呼吸道、消化道、皮肤（创伤）、血液、人畜共患病的传播（节支动物媒介第17页共82页宜春学院医学院杨婧编写17传播）、性接触等机体免疫力3、内毒素与外毒素的比较。区别点外毒素内毒素来源G菌和部分G菌G菌存在部位从活菌分泌出，少数菌崩解后释出CELLWALL成分，菌裂解后释出化学成分蛋白质，分子结构为AB模式脂多糖稳定性6080，30MIN被破坏160，24H才被破坏毒性作用强，对组织器官有选择性毒害效应，可分为神经毒素、细胞毒素和肠毒素三大类，引起特殊临床表现较弱，各菌的毒性效应大致相同，引起发热、白细胞增多、微循环障碍、休克、DIC等。抗原性强，刺激机体产生抗毒素；甲醛液处理脱毒形成类毒素弱，刺激机体产生的中和抗体作用弱；甲醛液处理不形成类毒素4、简述细菌性感染的类型有哪些全身细菌性感染类型有哪些细菌性感染的类型有根据临床症状可分为隐性感染、显性感染、。其中显性感染又可根据病情缓急分急性感染、慢性感染；根据感染部位分局部感染和全身感染，其中全身感染又可分为毒血症、内毒素血症、菌血症、败血症和脓毒血症。5、病原菌标本的采集与送检要注意什么采集细菌标本的一般原则是无菌操作。避免杂菌污染标本；因时取材。根据疾病特点采集不同标本（不同病期取不同标本）；在采取局部病变标本处，不可用消毒剂；尽早取材。在使用抗生素之前采集，对已用抗菌药患者的标本，应注明药物名称；因地取材。尽可能采集病变明显部位的材料；标本必须新鲜。采集后尽快送检（多数细菌标本可冷藏保存或运送）。【附】病毒性疾病标本的采集与送检方法原则基本，病毒感染性疾病实验室诊断标本采取基本原则与细菌相似，即早期采样，冷藏速送。但还要特别注意下列原则被杂菌或易受污染的标本，在进行分离培养时应该使用抗生素（加入高浓度青霉素、链霉素或庆大霉素处理）；标本的运输和保存若标本采集地点离病毒实验室较远，可将标本置甘油缓冲盐水中低温保存送检；进行病毒血清学诊断时，应采取双份血清即在发病初期和病后23W内各取一份血清，以对比抗体效价变化。6、填空题感染的后果与病原菌本身的、侵入的和密切相关。细菌的毒力由和构成。第18页共82页宜春学院医学院杨婧编写18内毒素主要是菌细胞壁中的成分。其他微生物如、和中亦存在类似物质。内毒素引起发热的机制是作用于机体的细胞，使之产生具有的细胞因子。因为外毒素的化学成分是，所以可用处理制备成用于预防疾病。根据外毒素的作用机制不同，可将其分为、和三类。多数外毒素的分子结构由和亚单位组成，其功能前者是，后者是，二者缺一既无致病作用。毒力数目侵入部位侵袭力毒素革兰阴性脂多糖（LPS）螺旋体衣原体立克次体巨噬内源性致热原蛋白质甲醛类毒素神经毒素细胞毒素肠毒素AB毒素活性部分（决定毒性效应）与特殊受体结合（介导毒素进人靶细胞）细菌对抗菌药物的敏感试验1、简述抗菌药物敏感性试验（AST）的意义。可预测抗菌治疗的效果。即AST试验结果为“敏感”时，治疗可能有效；试验结果为“耐药”时，使用该药物治疗大多失败。指导医生合理使用抗菌药物（提供所选择药物的依据）。AST的结果往往在给予病人经验性治疗2448H之后，若AST结果为“敏感”该治疗为有效，若结果为“耐药”，即应更换药物。监测常见病原菌的耐药状况并将结果定期通报临床，分析耐药菌变迁，掌握耐药菌感染病流行病学，控制和预防耐药菌感染发生和流行。评价新抗菌药物的抗菌谱及抗菌活性等药效学指标。2、简述常规药敏试验抗菌药物选择原则。选择原则应考虑到药物临床疗效、耐药菌株流行情况、预防耐药菌株产生和经济等综合因素，最终目的是达到控制感染病。目前，我国主要遵循美国NCCLS（NATIONALCOMMITTEEFORCLINICALLABORATORYSTANDARDS,NCCLS）制定的抗菌药物敏感性试验执行标准。在标准中分成A、B、C、U四组A组（所列的抗生素）为首选药敏试验并常规报告的抗菌药物（简称首选/一级试验并常规报告的抗菌药物即常规首选药物）。B组为临床使用主要抗生素,尤其在医院感染时使用的抗生素（简称一级/首选试验并选择报告的抗菌药物）。该类抗生素可在下列情况下使用对A组同类抗生素耐药；标本来源不同时，如三代头孢菌素使用于脑脊液中的肠杆菌，磺胺甲恶唑使用于尿道分离的细菌；多种微生物感染；多部位感染；感染流行的控制；对A组抗生素过敏、耐受或无反应。C组药物用于对A组药物耐药的流行菌株或对A组药物过敏的病人和某些不常见的细菌（如肠外分离的沙门菌属或耐万古霉素肠球菌）。即C组为补充实验，有选择报告的抗微生物药物。U组仅用于尿道中分离的细菌，不作为尿道外分离菌的常规药敏试验。即U组仅用第19页共82页宜春学院医学院杨婧编写19于泌尿道的补充实验的抗微生物药物。3、药物敏感试验（AST）结果如何解释简述常用的药物敏感试验（AST）方法有哪些不论是抑菌圈的量取或MIC、IC值的读取，根NCCLS标准，药物敏感试验（AST）结果最终以“敏感”、“耐药”和“中介”报告。常用的药敏试验方法包括纸片扩散法（KB法）、稀释法、抗菌药物梯度法（ETEST）和自动化仪器法。稀释法是体外定量测定抗菌药物抑制细菌生长活性的方法。分为肉汤稀释法和琼脂稀释法。稀释法所测得的某抗菌药物能抑制待测菌肉眼可见生长的最低药物浓度为最低抑菌浓度（MIC）。肉汤稀释法分为常量稀释法（使用无菌试管，每一浓度抗菌药物的量通常为2ML）和微量稀释法（使用微量稀释孔，每孔有01ML肉汤）。原理是用MH肉汤将抗菌药物作不同浓度的稀释后，再接种待测菌，定量测定抗菌药物抑制或杀灭待测菌的最低抑菌浓度或最低杀菌浓度（MBC）。琼脂选择法是将不同浓度药物混匀于琼脂培养基中，配制含不同浓度药物平板，使用微量多头接种器接种细菌，经孵育后观察细菌在含不同浓度药物的平板上的生长情况，以抑制细菌生长的琼脂平板所含的药物浓度测得MIC。该法的特点是可同时做多株细菌的MIC测定，结果的重复性优于肉汤稀释法，且易于发现耐药突变株或污染，是验证新药体外抗菌活性时常用的参照标准。ETEST法是一种新型的检测细菌或真菌对抗菌药物敏感性的方法，是稀释法和扩散法原理的结合。E试条是一条5MM50MM无活性的无孔塑料薄条（无孔试剂载体），一面固定有预先制备的，浓度呈连续指数增长稀释抗生素，另一面有以G/ML为单位的读数和判读刻度