脂肪鉴定的试验步骤

生物学基本实验,高二第一学期实验复习,一、考纲要求：1、理解所学实验的内容，包括实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能。2、具备验证相关生物学事实的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理。3、能对一些生物学问题进行初步的探究性研究。二、考试范围：实验1、书P1719生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验2、书P3031高倍显微镜的使用和观察叶绿体和细胞质的流动实验3、书P3940观察植物细胞的有丝分裂实验4、书P46比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率,实验5、书P47探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验6、书P5354叶绿体中色素的提取和分离实验7、书P5960观察植物细胞的质壁分离和复原实验8、书P7980植物向性运动的实验设计和观察实验9、书P84设计实验，观察生长素或生长素类似物对植物生长发育的影响实验10、书P8788动物饲喂小动物的实验（选做）实验11、书P101观察被子植物的花粉管实验12、补做：温度及H对酶活性的影响,实验复习方法概述：1、熟记基本的实验操作方法、基本实验仪器的使用要点和基本实验试剂的用途。2、明确科学研究的方法、原则和一般程序3、掌握实验设计的基本原则。4、明确实验设计的一般程序：（了解题目的要求）、明确实验目的、分析实验原理、确定实验思路、选择实验器材、设计实验步骤、预测结果与分析5、将每一章节的相关实验进行实验设计方面的分析四.复习重点：1、实验设计中的注意要点2、实验设计的过程3、实验分析思路五.学习难点：1、实验设计的合理性和科学性2、实验结果的分析,一、物质的鉴定实验,生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定（实验1）,（一）糖类物质的鉴定,1还原性糖的鉴定,斐林试剂：由质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05gmL的硫酸铜溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2与加入的葡萄糖在加热的条件下，能够生成砖红色的CuO2沉淀，而葡萄糖本身被氧化成葡萄糖酸。溶液的颜色变化过程为：,浅蓝色棕色砖红色（沉淀）。,葡萄糖、果糖、麦芽糖,淀粉、纤维素、蔗糖、糖元,鉴定可溶性还原糖的实验材料,为什么不用双子叶植物叶？,双子叶植物中，光合作用的主要产物葡萄糖形成后合成为淀粉，暂时储藏在叶子内，因此最好不用双子叶植物的叶子作实验材料。,为什么不用单子叶植物叶？,有些单子叶植物，如韭菜、鸢尾，并不将光合作用的初始产物转变为淀粉，因此叶内含有大量的可溶性单糖，但是，由于叶片中叶绿素的颜色较深，对于鉴定时的颜色反应起着掩盖作用，导致实验现象不明显，因此，也不宜用单子叶植物的叶子作实验材料。,本实验最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织（或器官）,而且组织的颜色较浅，或近于白色的，如：苹果和梨的果实。经试验比较，颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。,2鉴定葡萄糖的方法,尿糖试纸、血糖快速检测仪的原理：葡萄糖氧化酶催化葡萄糖形成葡萄糖酸、过氧化氢；过氧化氢分解产生氧气，使指示剂显示不同的颜色。,3鉴定淀粉的方法,碘碘化钾溶液,（二）脂肪的鉴定,1苏丹III或苏丹IV,2鉴定脂肪的实验材料,最好选择富含脂肪的种子，如花生种子（取其子叶）。,3、脂肪鉴定的实验步骤：取材制片观察结论取材：将子叶削成薄片制片：取理想的薄片：染色：去浮色：制成临时装片观察：先低后高结论：,实验关键：,子叶应切成薄片,（三）蛋白质（多肽、二肽）的鉴定,1斐林试剂与双缩脲试剂有何区别？,2鉴定蛋白质的实验材料,最好选用富含蛋白质的生物组织（或器官），植物材料常用的是大豆，动物材料常用的是鸡蛋（卵白）。,3探究课题(1)果实成熟前后营养成分的变化多糖变成单糖，还原性糖增加；蛋白质是增加还是减少？(2)种子萌发过程中营养成分的变化还原糖、蛋白质、脂肪的含量变化；要解决如何定量的问题，比色的方法。,二：叶绿体中色素的提取和分离（实验6）,1实验原理：提取：研磨二氧化硅：碳酸钙：有机溶剂，如丙酮、酒精，溶解色素。分离：纸层析，几种色素在层析液中的溶解度不同。2注意事项：剪去滤纸条的两角;划滤液线要直、细、齐;层析液不能没及滤液细线。3扩展探究：不同植物叶绿体中的色素提取和分离；色素溶液吸收光谱的实验；能否进行光反应？,加速研磨；,中和酸性物质，防止叶绿素分子受到破坏;,三、观察实验,（一）用高倍显微镜观察叶绿体和细胞质流动（实验2）,1高倍显微镜的使用（实验21）,镜筒,压片夹,载物台,遮光器与光圈,反光镜,镜座,镜柱,镜臂,细准焦螺旋,粗准焦螺旋,物镜,目镜,原理：叶绿体主要在叶肉细胞、保卫细胞和幼茎的皮层细胞中。光照强度会影响叶绿体在细胞内的排列方向和分布位置。在弱光下，叶绿体椭球形的正面面向光照；而在强光下，叶绿体的椭球形的侧面朝向光照。（适应性）不同种类的植物，叶绿体的形态、大小及每个细胞中数量的多少有很大差别。（多样性）,3观察叶绿体（实验22）,2光学显微镜下的细胞结构可见到细胞壁、细胞核、染色质（体）、液泡、叶绿体、经特殊染色后可见到线粒体、高尔基体、细胞骨架等。,实验材料：藓类的叶、君子兰叶、黑藻叶、菠菜叶、水绵、天门冬的叶状枝,4细胞质流动（实验23）,实验材料：黑藻水生被子植物取材部位：幼嫩的小叶,原理：促进细胞内物质转运，促进细胞器之间的联系。细胞质流动是一种消耗能量的生命现象。细胞质的流动会受到一定的外界条件的影响。,观察细胞质流动可用哪种细胞器作为标志？,叶绿体,环流式,廻旋式,探究课题如何使细胞质流动的加快？,注意事项：黑藻事先应放在光照充足、水温较高条件下培养34小时。选取幼嫩小叶。选择靠近叶脉或接近叶片基部部位观察。临时装片内的材料应始终保持有水状态。,光照1520调节水温到25左右切伤部分叶片,（二）观察植物细胞的有丝分裂（实验3）,2制片步骤：解离漂洗染色制片,1有哪些植物细胞可观察到有丝分裂？根尖、芽尖的生长点、茎形成层、愈伤组织,3观察：先用低倍镜：找分生区细胞，特点：细胞正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂。高倍镜观察：各时期细胞内染色体的变化情况,4绘图（用铅笔）作为一种记录实验结果的方式，要求：准确；抓住主要特征；按绘生物图的要求绘制。,醋酸起什么作用？2%醋酸是染料的溶剂，在染色时增加了细胞的通透性，而不引起细胞膨胀，利于染液的离子进入细胞而使细胞核内的染色体着色。,5探究课题实验条件的探索：如不同取材时间、不同植物材料等对实验效果的影响。药物对细胞周期影响的研究：间期的细胞多说明什么？某药物对于纺缍丝有抑制作用，会对间期细胞所占比例有何影响？解离的目的？压片的目的？（分离、分散？）,（三）观察植物细胞的质壁分离与复原（实验7）,1实验原理细胞液浓度外界溶液浓度时，细胞吸水，质壁分离复原。,3方法步骤注意：先观察正常细胞（作为自身前后对照）；再观察质壁分离，最后观察质壁分离复原现象。用高倍镜。,4扩展探究细胞液浓度测定鉴定细胞死活的方法之一：染色法（大分子染料、活体染料）质壁分离影响因素：不同种类的离子、不同温度；,2实验选材紫色洋葱鳞片叶；如果是其它细胞液无色的细胞，可用活体染色剂染色后观察。,2实验设计：假设：如果不同波长的光或光的强度对植物向光生长有影响，那么植物向光生长的速度或弯曲的角度会不同；方法步骤：分组：把长势相同的的刚萌发的玉米胚芽鞘分成若干组。条件控制：甲组用红色单侧光照射；乙组用绿色单侧光照射；丙组用白光单侧光照射；丁组在黑暗状态下。结果记录：用尺子测量胚芽鞘生长的长度；用量角器等测量茎（胚芽鞘）弯曲的角度。,（四）植物向性动物的实验设计和观察（实验8）,1原理：向性运动是植物受单向外界因素的刺激而引起的定向运动。它的运动方向随刺激的方向而定。如单侧光、重力。,（五）设计实验，观察生长素或生长素类似物对植物生长发育的影响（实验9）,例如：课题不同浓度的生长素对月季扦插枝条生根的作用,1实验原理：适宜浓度的生长素能够促进扦插枝条生根；生长素的生理作用具有两重性，即低浓度促进生长，浓度过高抑制生长。,探究课题：不同浓度生长素对无根豆芽菜生产的作用（记录根的长度）不同浓度生长素对防止草莓落花落果的作用（记录花、果实的数量）,2材料用具：月季枝条、不同浓度生长素；3方法步骤：分组：处理：除浸泡枝条下端的生长素溶液浓度不同，其余条件均相同。定期测量生根的条数和长度；4结果：生根速度和数量；5结论：生长素在浓度低于时促进月季枝条生根；高于时抑制月季枝条生根。（注意：该浓度不是最适浓度）,（六）观察被子植物的花粉管（实验12）,1、目的要求：学会花粉管的培养方法，观察被子植物的花粉管及花粉管中的生殖细胞或精子。,2、实验原理：不同植物的花粉所需蔗糖溶液的质量分数不同。同样浓度不同温度的条件或同样温度不同时间的条件下，花粉萌发情况不同。用显微镜观察时，可以用醋酸洋红染色。3、注意点：对花粉管进行培养时，一定要将花粉撒落在溶液表面上悬浮培养，切忌猛烈晃动，以免花粉下沉，影响萌发。,例：以小麦花粉萌发为例（小麦花粉在0.08/mL的蔗糖溶液表面可以萌发）证明：小麦花粉萌发的温度为20。,实验设计步骤为：1、取8只烧杯编号并分别加入0.08/mL的蔗糖溶液；2、分别在5、10、15、20、25、30、35、40水浴中保温5分钟；3、向8只烧杯中撒入等量的小麦花粉培养2后，分别用各烧杯中的花粉制成临时装片（用醋酸洋红染色）；4、显微镜观察并记录。5、分析处理数据。,思考：如要探究温度对花粉管萌发的影响，应如何设计？,四、有关酶的实验,（一）比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率（实验4）,1酶的活性与温度、酸碱度等有关，但与底物浓度无关。2酶的催化效率在有酶活性的前提下考虑酶的活性；与无机催化剂相比，具有高效性；衡量标准：单位时间内，相同分子数量的的催化剂，催化同一化学反应时生成产物的量，或反应物减少的量。3方法步骤1）取洁净试管编号；2）处理：注意实验与对照之间的单一因素差异；3）观察结果：气泡多少、余烬复燃的剧烈程度；4）分析，得出结论：酶具有高效性,（二）探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用（实验5）,1如何说明酶对底物是否起作用？用产物的出现还是用底物的消耗作指标。2为什么选用蔗糖与淀粉？便于检验淀粉酶是否催化了反应的进行：蔗糖不具有还原性，而分解成的葡萄糖、果糖具有还原性；淀粉不具有还原性，而分解成的麦芽糖、葡萄糖具有还原性。材料比较易得。3方法步骤：1）取洁净试管编号；2）处理：注意实验与对照之间的单一因素差异；3