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文档简介

.,1,环境工程微生物学实验实验五:空气微生物的检测,适用范围:环境工程专业实验教师:李宁顾彦,.,2,一、目的,1、通过实验了解一定的环境空气中微生物的分布状况。2、学习并掌握检定和计数空气微生物的基本方法。,.,3,二、器材,1、采样器:盛有200mL无菌水的高脚三角瓶(500mL)5个盛有10L水的蒸馏水瓶(15L)5个。,2、培养基和器具:肉膏蛋白胨培养基查氏培养基高氏一号培养基无菌平皿无菌吸管天平称量纸恒温箱,.,4,三、操作步骤,1、过滤法安装空气采样器。滤过法检查一定体积的空气中所含细菌的数量。按梅花形布点法将五套空气采样器分放在5个点上。打开蒸馏瓶的水阀,使水缓慢流出,这时外界的空气被吸入,经喇叭口进入盛有200mL无菌水的三角瓶中,至10L水流完后,则10L体积空气中的微生物被截留在200mL水中。将5个三角瓶的过滤液充分摇匀,分别从中各吸1mL过滤液于无菌培养皿中(平行做3个皿),然后加入已熔化而冷至45的肉膏蛋白胨琼脂培养基,摇匀,凝固后置372培养。培养24h后,按平板上长的菌落数计算出每L空气中细菌的数目。先按下列式分别求出每套采样器的细菌数,再求五套采样器细菌数的平均值。,.,5,三、操作步骤,2、落菌法将牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、查氏琼脂培养基、高泽氏琼脂培养基熔化后,三种培养基各倒15个平板,冷凝。在一定面积的房间内,按梅花形布点法布点,每种培养基每个点放三个平板,打开盖,放置30min或60min后盖上盖子,肉膏蛋白胨琼脂培养基培养细菌的,置37恒温箱培养24h。查氏琼脂培养基、高泽氏琼脂培养基分别培养霉菌和放线菌,置于28恒温箱中培养2448h。观察菌落形态、颜色。,.,6,测定空气微生物的5点采样法,三、操作步骤,2、落菌法,.,7,(3)计算每m3空气中微生物的数量。奥梅梁斯基曾建议:面积为100cm2的平板培养基,暴露在空气中5分钟相当于10升空气中的细菌数。奥氏公式:,式中:C空气细菌数;A捕集面积,cm2;t暴露时间,min;N菌落数,个。,三、操作步骤,2、落菌法,.,8,根据落菌法,记录空气中微生物的种类和相对数量,填写下表,推算出1m3空气中细

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