《肿瘤及其标志物》PPT课件.ppt

1,肿瘤及其标志物曾玲莉,2,恶性肿瘤发生与分类,定义,肿瘤（tumor）又称新生物（neoplasma），是机体在各种致瘤因素的作用下，组织和细胞在基因水平上失去了对其生长的正常调控，导致的异常生长和分化。即指失去了正常生物调控的异常生长、分化的细胞和组织。,3,良性肿瘤：局部膨胀性生长，速度比较缓慢；常有较完整的包膜；压迫邻近组织器官，但不侵蚀破坏不向远处转移，危害性较小。,特点：细胞增殖、分化异常出现恶性生长；失去细胞与细胞间及细胞与组织间的正常联系，侵袭周围正常组织并发生转移,根据肿瘤的生物学行为和临床表现可分为：,恶性肿瘤：表现为细胞的无休止和无序的分裂，有侵袭性（向周围组织侵润）和转移性，危害性大,4,恶性肿瘤的分类,癌症（Carcinoma）起源于上皮细胞，约占恶性肿瘤的85%；恶性肉瘤（Sarcoma）:起源于组织细胞，如肌肉组织、骨骼及脂肪组织，约占肿瘤的6%左右；淋巴瘤和白血病（LymphomaandLeukemia）:起源于白细胞的产生组织，如骨髓、淋巴腺等，可发生于各年龄段，约占恶性肿瘤的5%左右；其它恶性肿瘤：包括脑瘤及其它罕见的癌症，约占恶性肿瘤的4%左右。,5,恶性肿瘤的发生的机制肿瘤是一种基因疾病，其发生是一个多因素、多阶段、多基因参与的复杂过程。,癌变正常细胞癌变细胞细胞生物大分子（DNA、RNA、蛋白质）结构与功能异常化学致癌剂环境因素致癌病毒放射线,引起细胞癌变外因通过内因起作用,6,细胞癌变的分子学基础：癌基因与抑癌基因其结构或表达异常细胞增殖生长调节系统：癌基因（正调节）（促进增殖，抑制分化和凋亡）（通过表达产物-生长因子发挥作用）抑癌基因（负调节）（抑制增殖，促进分化、成熟、衰老，最后凋亡）,当多个癌基因异常激活时或当抑癌基因缺失、突变或基因产物失活时可引起细胞癌变。,7,正常肠上皮细胞癌基因的激活抑癌基因的丢失K-ras的突变腺瘤级遗传型AFP突变级FAP丢失或息肉级基因丢失P53基因丢失（占70%）一部分人直接有息肉转变成癌C-myc的过量表达大肠癌P53基因突变使细胞增殖加速，若同时其等位转移人大肠癌癌变的分子机理,8,细胞癌变的免疫监视学说,1、机体免疫活化性细胞（T细胞、NK细胞、K细胞和巨噬细胞等）有识别肿瘤细胞的作用，在早期杀灭异常细胞，当机体免疫功能低下或受抑制时，肿瘤的发生率高。2、肿瘤细胞有逃脱免疫监视的能力，妨碍机体的免疫监视的功能。,9,（一）肿瘤标志物定义（TumorMarkers，TM）是指由恶性肿瘤细胞异常产生的或特征性存在于恶性肿瘤细胞的物质，或是宿主对肿瘤反应而产生的物质。当肿瘤发生、发展时，这些物质明显异常，标志肿瘤的存在。,肿瘤标志物的概念,TM或是大分子的蛋白质（包括肽类激素和酶），或是小分子的脂类或氨基酸衍生物；存在于肿瘤细胞和组织中，存在于血液和其它体液；能利用化学、免疫和分子生物学等技术进行定性或定量的检测,10,理想的肿瘤标志物条件,特异性高；灵敏度高；器官特异性，可对肿瘤进行定位；肿瘤标志物浓度变化与肿瘤的大小、生长、消退、转移、恶性程度有直接的定性或定量的比例关系；易检测出，取材方便，检出方法简单灵敏。,11,肿瘤标志物的研究概况肿瘤标志物的发展历史大体分为4个阶段：1846年1928年，本周氏蛋白的发现（第1个发现的肿瘤标志物，现已被确认为多发性骨髓瘤的标志）；,12,1929年1962年，发现一些激素、酶及同工酶等在恶性肿瘤的应用价值，1930年Zondek发现人绒毛膜促性腺激素（HCG）可辅助诊断绒毛膜癌等1932年Cushing等报道了促肾上腺皮质激素（ACTH）对恶性肿瘤的辅助诊断价值。40年代报道了一些酶在肿瘤病人的血清中增高，成骨肉瘤血清中有碱性磷酸酶的升高。1959年Markert等发现恶性肿瘤患者体液中可出现异常变化的同工酶谱,13,1963年1975年，现代肿瘤标志物研究以发现胚胎蛋白为标志物1963年Abelev发现甲胎蛋白（AFP）1965年Glod和Freeman发现癌胚抗原（CEA）,14,1976年至今，其研究进展及应用主要表现以下三方面：第一，1975年Kohler和Milstein成功地创建了淋巴细胞杂交瘤技术，1979年Koprowski用结肠癌细胞制备单克隆抗体，识别糖类抗原，建立了一系列特异性较强的肿瘤标志和CA系列，第二，发现肿瘤的基因标志，1976年Bishop和Varmug等发现癌基因与肿瘤的发生关系，是使肿瘤标志的研究从分子水平提高到基因水平第三，肿瘤标志的检测技术的灵敏度和特异性大为提高。免疫定量技术由半定量或灵敏度较低的过渡到高灵敏度并能准确定量的放射免疫测定或酶联免疫吸附测定单克隆抗体技术的广泛应用,15,肿瘤标志物的分类,按肿瘤标志物本身的化学特性可分为以下7类：肿瘤胚胎性抗原标志物；酶类标志物；糖类标志物；激素类标志物；微球蛋白类标志物；基因类标志物；其它类标志物。,16,肿瘤标志物检测及临床应用,17,一、肿瘤胚胎性抗原标志物,肿瘤胚胎性抗原是指癌瘤细胞重新表达某些在胚胎细胞才有的而在成人后逐渐下降、消失的蛋白质成分最常见的是AFPCEA,18,（一）甲胎蛋白（-fetoportein，AFP）,生化特性,是胎儿血中的主要蛋白质成分，主要由胚胎期的肝细胞和卵黄囊产生,妊娠6周开始合成；1214周合成达高峰（血清浓度为13g/L）；出生后下降，出生时的脐带血含量约10100mg/L，一年后约为5.8g/L,MW：70KD，由590氨基酸组成，含糖量为4%，糖链主要由甘露糖、半乳糖、N-乙酰葡萄糖和唾液酸组成的寡糖。糖链结构不同的AFP称AFP分子的异质体,19,1.AFP与肝癌诊断原发性肝癌；是目前公认早期诊断的主要标志物；（以血清含量400g/L作为诊断阈值）肝癌普查（但需注意AFP阴性不能排除HCC）,临床应用,判断分化程度；,用于病情监测、预后判断；AFP含量与肿瘤的大小呈正相关，,动态观察AFP含量和ALT酶活性的变化鉴别诊断良性肝脏疾病。(5)AFP异质体分析对AFP持续在50200g/L的原发性肝癌和良性肝病有鉴别诊断意义。常以小扁豆凝集素LCA结合型AFP25%作为原发性肝癌的诊断标准。,20,2.AFP与生殖细胞瘤AFP与HCG同时检测有利于生殖细胞瘤的分型和分期AFPHCG睾丸癌+卵巢癌+绒毛膜上皮细胞癌+畸胎瘤+,临床应用,21,（二）癌胚抗原（carcinoembryonicantigen,CEA）,生化特性,1、于结肠癌的提取物中发现，因此抗原也出现在胚胎细胞上，故称癌胚抗原。2、CEA是一种结构复杂的可溶性酸性糖蛋白，含糖量约为45%55%；CEA属细胞表面糖蛋白家族，不规则地分布于细胞表面，易被细胞分泌或脱落至血液或其它体液中；电泳位置于-球蛋白的位置；有5种互相不重叠的抗原决定族，分别命名为Gold15，其中13有很高的特异性，45有交叉反应,22,基因位于19号染色体上，由10个基因组成，可表达36种不同的糖蛋白，胚胎期主要由胎儿的消化道上皮、肝脏和胰细胞分泌，出生后消失。成人CEA主要是由结肠粘膜细胞分泌到粪便中，少量重吸收入血。健康成人血中CEA浓度小于2.5g/L。,生化特性,23,临床应用,CEA是一种低器官特异性肿瘤标志物。不适合作某种恶性肿瘤的诊断和筛查，但对预后判断、疗效观察及辅助诊断是一个有效的监测指标，也是发现复发的理想指标,1、用于辅助诊断：肿瘤名称阳性率结肠癌70%90%胰腺癌（中晚期）88%91%，肺癌76%，乳腺癌70%2、检测胃液中的CEA对胃癌有一定的诊断意义。,24,3、CEA比正常持续升高510倍（如20g/L）往往提示有恶性肿瘤特别是肠癌的存在。4、注意排除非癌性CEA升高。良性疾病如吸烟者、酒精性肝硬化、肺气肿、结肠息肉、非特异性结肠炎、胰腺炎、良性乳腺疾病等也可引起CEA的上升,临床应用,25,二、酶类肿瘤标志物,恶性肿瘤患者酶活力改变原因：肿瘤细胞恶变时引起基因表达的改变，肿瘤细胞产生异常含量的酶；肿瘤细胞的破坏或通透性增加，导致细胞内酶释放入血；肿瘤特异的生长方式及代谢改变而导致酶的异常尤其是同工酶谱的改变；肿瘤组织压迫管腔使某些酶返流入血；肿瘤的存在或转移机体某些组织诱导并生成大量的酶。,26,1、PAS是一种由前列腺上皮细胞分泌的单链糖蛋白2、具有酶活性，与精液液化有关。3、基因结构分析表明，PSA与激肽释放酶KLK1和KLK2高度同源，4、血中总的PSA(t-PSA)包括两种形式，游离型（f-PSA）20%结合型（cPSA）80%，,（一）前列腺特异性抗原（prostatespecificantigen,PSA）,生化特性,27,PSA-ACT（1抗胰蛋白酶）复合物cPSA形式2巨球蛋白（2MG）结合的复合物目前可以测定的是：f-PSAACT-cPSAt-PSA=（f-PSA+ACT-cPSA）,28,PSA是前列腺癌的特异性标志物,临床应用,前列腺癌的筛查和早期诊断；一般以4.0g/L作为参考值的上限，t-PSA4g/L判断为阳性,应用血清中的f-PSA/t-PSA比值来鉴别良、恶性前列腺肿瘤；f-PSA/t-PSA比值为0.15可作为前列腺肥大和前列腺癌的鉴别要点，比值0.25,提示前列腺肥大；,病情、疗效监测和预后判断；,29,（二）神经元特异性烯醇化酶(neuronspecificenolase,NSE),生化特性,是烯醇化酶的一种同工酶有5种形式，即、。二聚体是该酶的活性形亚基主要存在于肝、肾等组织；亚基主要存在于骨骼肌和心肌组织中；亚基组成的同工酶和存在于神经元和神经内分泌组织中，故称为NSE。,30,临床应用,NSE水平升高还可见于某些神经内分泌肿瘤如嗜铬细胞瘤、黑色素瘤、胰岛细胞瘤，甲状腺髓样瘤等。,NSE是小细胞肺癌和神经母细胞瘤的标志物。,NSE对小细胞肺癌敏感度为80%，特异性为80%90%，应用于疗效观察、预报复发及预后判断,NSE对儿童型的神经母细胞阳性率为90%,31,AFU存在于多种细胞的溶酶体及体液中，为一种酸性糖蛋白，是水解糖蛋白或糖脂中-L岩藻糖苷键的酶，参与糖脂、糖蛋白、糖的代谢,临床意义,1、主要用于遗传性AFU缺乏引起的岩藻糖贮积病的诊断2、又可作为原发性肝癌又一敏感、特异的新标志物。,（三）-L岩藻糖苷酶（AFU）,生化特性,32,异常血清酶名称相关肿瘤,乙醇脱氢酶（Alcoholdehydrogenase）肝醛缩酶（Aldolase）肝碱性磷酸酶（ALP）骨、肝、白血病、肉瘤、卵巢等淀粉酶（Amylase）胰腺等肌酸激酶（CKBB）前列腺、小细胞肺癌、乳腺、结肠、卵巢-谷氨酰转肽酶（-GT）肝乳酸脱氢酶（LD）肝、淋巴瘤、白血病神经元特异性烯醇化酶（NSE）小细胞肺癌、神母细胞瘤、类癌、黑色素瘤5-核苷酸酶（5Nucleotidase）肝酸性磷酸酶（ACP）前列腺-L-岩藻糖苷酶（AFU）肝芳香硫酸酯酶结肠、乳腺,33,异常血清酶名称相关肿瘤,半乳糖转移酶（Galactosyltransferase）结肠、膀胱、胃肠、卵巢丙酮酸激酶（PyruvateKinase）肝、卵巢胸腺苷激酶（Terminaldeoxytransferase）淋巴瘤、白血病、小细胞肺癌亮氨酸氨基肽酶（Leucineaminopeptidase）胰腺、肝核糖核酸酶（Ribonuclease）卵巢、肺、乳癌,34,三、糖类抗原（Carbohydrateantigen，CA）,定义：是当正常细胞转化为恶性细胞时，细胞表面糖蛋白发生变异而形成的一种与正常细胞不同的特殊抗原物质，或是由肿瘤细胞分泌的含糖的复合物。,命名：CA后面的数字代表的是制造该抗原的肿瘤细胞株的编号,分类：CA125、CA15-3、CA594、CA27-29是哺乳动上皮细胞分泌的大分子量粘蛋白，其中有些如CA15-3、CA549、CA27-29实际上是异构体，是乳癌的肿瘤标志物；CA19-9、CA50、CA72-2、CA242是唾液酸岩藻糖的衍生物，常是消化道肿瘤的标志物。,35,（一）卵巢、乳腺肿瘤标志物,1、CA125,生化特性,是用人类卵巢浆液性囊腺癌细胞系作抗原免疫小鼠通过淋巴细胞杂交而获得的单克隆抗体OC125识别而得名，主要在卵巢癌中，又称为卵巢相关抗原。,CA125是一种分子量200KD的高分子糖蛋白。主要存在于上皮性卵巢癌组织和病人的血清中，健康人群血清中CA125的含量很低，其上限为35KU/L。,36,临床意义,2、其他恶性肿瘤及其他妇科肿瘤CA125也可升高，胰腺癌、肺癌、乳腺癌、直肠癌及子宫内膜癌等3、鉴定良性和恶性骨盆肿块较好的标志物某些良性疾病如子宫内膜异位症，盆腔炎、卵巢囊肿等疾病也有不同程度升高，但阳性率较低，,1、主要作为卵巢癌肿瘤标志，早期诊断卵巢癌可用于监查已诊断为卵巢癌病人，评价疗效果及预报肿瘤复发,37,2、CA15-3,是一种在乳腺癌细胞表面含量较高的细胞表面糖蛋白，是监测乳腺癌的重要抗原。对乳腺癌具有较高特异性，但灵敏度较差，不适用于早期诊断和肿瘤筛查，主要用于治疗评价、预后判断和转移、复发监测。被认为是诊断转移性乳腺癌的首选指标，/期乳腺癌复发检测指标故是监测病程其他多种腺癌也有CA15-3升高，包括有胰腺癌、肺腺癌、卵巢癌、直肠癌、肝癌等。,38,（二）消化道肿瘤标志物,1、CA19-9,是一种大分子量的低聚糖类粘蛋白抗原用人结肠癌细胞株SW-1116制备的单克隆抗体116-NS-19-9识别糖类抗原CA19-9分布于正常胎儿的胰腺、胆囊、肝、肠等组织中及正常人胰、胆管上皮处，在血清中以唾液粘蛋白的形式存在,是一种与胰腺癌、胆囊胆管癌、结肠癌、胃癌相关的肿瘤标志物，又称为胃肠癌相关抗原。消化系癌肿患者血清CA19-9明显增高。,39,2、CA50,CA50是一种与CA19-9密切相关，以唾液酸脂和唾液酸糖蛋白为主要成分的糖类抗原遍布于结肠、胃肠道、肺、胰腺、肝脏、胆囊、脑膜等恶性肿瘤组织中；细胞正常代谢过程中不分泌CA50成分。可用结肠、直肠癌COCO205细胞制成的单克隆抗体CA50来进行检测，不同的方法测得血清CA50的正常参值不同。临床应用与CA19-9有良好的相关性，诊断胰腺癌、胆管癌，肝癌、胃癌、结直肠癌、肺癌、卵巢癌等亦有较高的价值。CA50和其它肿瘤标志物如CA19-9、CA242、CEA、AFP等联合测定，可有效提高恶性肿瘤检测的特异性和敏感性。,40,名称性质相关肿瘤常用单克隆抗体,CA125糖蛋白，分子量200KD卵巢、子宫内膜癌OC125CA15-3糖蛋白，分子量400KD乳腺、卵巢癌DF3115D3CA549高分子量糖蛋白乳腺、卵巢癌BC4E549,BC4N154CA27.29高分子量糖蛋白乳腺癌B27.29CA19-9唾液酸化Lexa胰腺、胃肠、肝116NS19-9CA19-5唾液酸化Lea和Leag胰腺、卵巢、胃肠116NS19-5CA50唾液酸化Lea胰腺、胃、结肠Colo-50CA72-4唾液酸化Tn胰腺、直肠、胃肠道B27.3，CC49CA242唾液酸化CHO结肠、直肠、胰腺C242,常用糖类抗原标志物一览表,41,四、激素肿瘤标志物,激素类肿瘤标志物分类：原位激素（eutopicdhormone）：具有分泌激素功能的细胞癌变导致其所分泌的激素量发生异常，这些异常的原位激素具有高度的腺体特异性，有助于该内分泌腺或内分泌细胞肿瘤的诊断。异位激素（ectopichormone）：是指在正常情况下，不产生激素的细胞癌变后所生成的激素，这些激素几乎都是肽类激素，具有与原位激素相同或相似的结构，和天然激素有相同的免疫原性，可用天然激素的抗体检测出来。,42,异位激素作为肿瘤标志物特点：1、许多产生异位激素的恶性肿瘤能分泌一种或多种激素或类激素，或者几种肿瘤可分泌同一种异位激素；2、恶性肿瘤异位激素分泌量少且不恒定的，激素类标志很少用于恶性肿瘤的诊断。3、最易产生异位激素的肿瘤是肺癌，特别是小细胞癌，最常见的异位激素是ACTH及其衍生物。,43,人绒毛膜促性腺激素（humanchorionicgonadotrophin,HCG）,生化特性,HCG是由胎盘滋养层细胞所分泌的糖蛋白激素，由a和两个亚基组成，每个亚基上有两条N-糖链。a亚基的生物特性与促黄体生成素（LH）、促卵泡激素（FSH）、促甲状腺激素（TSH）的a亚基氨基酸排列顺序基本相同，亚基决定了各类激素的免疫学性质和激素的特异性，现行的许多测定HCG的分析方法都是专为检验HCG分子的链而设计。,44,临床意义,1、用于早孕诊断及用于了解胚胎生长情况及随访观察。2、是睾丸肿瘤和胎盘肿瘤最基本的标志物。良性葡萄胎、恶性葡萄胎、绒癌患者血清HCG有不同程度增高。腺癌、前列腺癌、肺非小细胞癌、肝癌、白血病及淋巴瘤等其他肿瘤患者HCG也可见升高。,45,激素相关肿瘤,儿茶酚胺类（CA）嗜铬细胞瘤促肾上腺皮质激素（ACTH）肺小细胞癌、胰岛癌、胸腺癌生长激素（GH）垂体腺瘤、肺癌、肾癌抗利尿素（ADH）肺小细胞、肾上腺皮质瘤、胰腺癌5-羟色胺（5-HT）原发性类癌降钙素（CT）甲状腺髓样癌、肺小细胞癌、嗜铬细胞瘤绒毛膜促性腺激素（hCG）绒毛膜癌、睾丸癌、肺癌、乳腺癌、肝母细胞瘤人胎盘催乳素（HPL）滋养层细胞癌、性腺腺瘤、肺癌、乳腺癌甲状旁腺素（PTH）肺癌、肾癌、乳腺癌、肝癌、卵巢癌促红细胞生成素肝癌、子宫癌胰高血糖素肾癌,激素与肿瘤关系一览表,46,五、微球蛋白肿瘤标志物,（一）铁蛋白（Ft）,结构：核心（结晶状的氢氧化高铁）外壳（去铁蛋白，呈球状，由24亚基组成）其亚基分为H和L两类，心铁蛋白主要为H亚基，肝铁蛋白主要为L亚基，胎儿和癌组织中以H型为主。作用：贮铁和供铁，,47,1、衡量有无严重铁代谢失调和体内铁贮存水平，正常人铁蛋白300g/L为增多指标，SF是诊断体内缺铁最敏感、最特异的指标，也是铁负荷过多性疾病的诊断和鉴别诊断2、是一种新的肿瘤标志物急性白血病患者SF显著升高，其它的恶性肿瘤的患者如霍奇金病、肝癌、胰腺癌、乳腺癌肺癌、卵巢癌等SF含量升高，升高的程度与肿瘤的活动及临床床分期有关。,应用：,48,（二）2微球蛋白（2-microglobulin,2-M）,2-M是一种分子量为11.8KD的单链多肽，存在于除成熟红细胞和胎盘滋养层细胞以外的几乎所有有核细胞表面，特别是淋巴细胞表面尤其丰富。血清2-M2.5mg/L，尿平均值为98g/L，上限为320g/L。应用：1、评估肾功能2、监测肿瘤病情变化淋巴细胞增生性肿瘤如多发性骨髓瘤、慢性淋巴性白血病等病人血清中2-M浓度可明显增高，在确诊的肝癌病人血清2-M与AFP有良好的相关性，,49,（三）角蛋白（cytokeratin，CK）,细胞角蛋白是一类分子量为4070KD的细胞结构蛋白应用双向电泳可将角蛋白分离出20条区带，分别命名为CK1CK20，肿瘤细胞中最丰富的是CK18和CK19。CYFRA21-1-是指的单层上皮细胞癌变时，可释放CK19的片段进入血循环，此可溶性的片段称为CYFRA21-1。CYFRA21-1水平测定是磷状上皮细胞肺癌患者诊断和疗效观察的首选指标。CYFRA21-1和NSE组合测定可提高诊断肺癌的灵敏度而不降低特异性。,50,六、肿瘤基因标志,癌基因的激活实质：结构异常；表达异常癌基因的激活途径：,抑癌基因的失活：一是抑癌基因的缺失或突变二是抑癌基因产物失活。,51,52,癌基因相关肿瘤,C-myc乳腺癌、胃癌、肺癌（巨细胞型）、急性粒细胞白血病、结肠癌N-myc神经、视网膜母细胞瘤、肺癌（小细胞）C-erb-2胃癌、肾癌、乳腺癌N-ras胃腺癌H-ras黑色瘤、膀胱癌、皮肤鳞癌K-ras结肠癌、骨肉瘤、膀胱癌、胰腺癌、卵巢癌,常见癌基因类肿瘤标志物,53,抑癌基因相关肿瘤,RB视网膜母细胞瘤、骨肉瘤、乳腺癌、肺癌P53肺癌、结肠癌、胃癌WT1Wilms肿瘤NF-1神经纤维瘤Erb-B-2乳腺癌,常见抑癌基因类肿瘤标志物,54,肿瘤基因标志检测方法,1、定量病理学：原位图像分析（确定细胞中总DNA含量）细胞测量学方法（用于研究小肿瘤）2、免疫组织化学法（利用单克隆抗体检测其相关的蛋白质以检测癌基因和抑癌基因的产物）3、分子生物学方法：聚合酶链反应（PCR）技术：PCR-ASO法；PCR-SSCP；PCR-RFLP；直接测序法。,55,（一）癌基因肿瘤标志物,1.ras基因家族与肿瘤的关系2、myc基因家族成员与肿瘤的关系,（二）抑癌基因,1RB基因2、P53基因,56,肿瘤类型临床意义,乳腺癌c-Ha-ras基因mRNA水平升高结直肠癌50%的肿瘤出现c-Ki-ras基因点突变肺癌20%30%肿瘤出现ras基因家族成员点突变，其中c-Ki-ras基因突变与预后不良相关胰腺癌90%左右的肿瘤出现c-Ki-ras基因点突变胃癌p21表达水平明显升高，c-Ha-ras基因编码的12位氨基酸突变与肿瘤的转移及预后不良有关髓性白血病10%50%的肿瘤出现c-N-ras基因突变膀胱癌部分病例可出现c-Ha-ras基因点突变及P21蛋白表达过度,ras基因家族与肿瘤的关系,57,肿瘤类型临床意义,神经母细胞瘤在20%肿瘤中有N-myc基因扩增，是预后的预测因子乳腺癌6%57%的肿瘤中可见c-myc基因扩增,c-myc基因mRNA水平升高与预后不良有关结直肠癌10%20%的肿瘤中可见c-myc基因扩增小细胞癌30%的肿瘤可见L-myc基因过度表达宫颈癌c-myc过度表达与预后不良有关胶质母细胞瘤均见N-myc基因扩增Burkitti淋巴瘤几乎100%的病人均有c-myc基因异位,myc基因家族成员与肿瘤的关系,58,（二）抑癌基因,1RB基因（retinoblatoma，RB）基因产物为P105蛋白，P105磷酸化修饰对细胞的生长、分化起重要的调节作用，非磷酸化的P105能促进细胞分化，抑制细胞增殖。RB基因失活见于成视肉膜细胞瘤、骨肉瘤、小细胞肺癌、乳腺癌、膀胱癌等许多肿瘤,59,基因产物：53KD蛋白功能：野生型的P53蛋白维持细胞正常生长；时刻监控基因的完整性“基因卫士”抑制恶性增殖检测：应用多种P53的单克隆/多克隆抗体来检测野生型/突变型P53蛋白，一般测得的只是突变型P53蛋白。,2P53基因,60,肿瘤临床意义,结肠癌50%80%表现P53突变肺癌45%70%P53水平升高，57%的小细胞癌过度表达P53肝癌50%的有P53点突变膀胱癌61%有P53基因突变乳腺癌40%有P53突变，9%的病人血清有P53蛋白卵巢癌50%的肿瘤有P53基因的突变食管癌35%44%有P53突变骨肉瘤33%76%的肿瘤有P53基因的突变胃癌37%有P53基因突变神经纤维瘤30%肿瘤有P53基因突变非霍奇金淋巴瘤61%有P53蛋白增加甲状腺癌24%肿瘤有P53基因突变,P53基因与肿瘤的关系,61,七、其它肿瘤标志物,唾液酸、多胺、羟脯氨酸、假尿嘧啶核苷、新蝶呤等低分子量的生化物质也被作为肿瘤标志物，归类于其它肿瘤标志物。,（一）肿瘤标志物的评价指标,表15-9,62,第三节恶性肿瘤标志物实验室诊断,一、肿瘤标志物临床判断值确定（一）常见的评估肿瘤标志物的指标（二）ROC工作曲线确定肿瘤标志物判断值,二、检验方法和质量控制（一）肿瘤标志研究及检测的常用技术（二）质量控制,三、常用肿瘤标志物的联合应用,63,评价指标计算公式,敏感度（真阳性数/所有肿瘤病人数即真阳性+假阴性）100%特异性（真阴性数/所有非肿瘤病人数即真阴性+假阳性）100%阳性预测值PV（+）（真阳性数/真阳性例数+假阳性例数）100%阴性预测值PV（-）（真阴性数/真阴性例数+假阴性例数）100%准确率（有效率）（真阳性+真阴性）/总例数100%,64,（二）ROC工作曲线确定肿瘤标志物判断值,TM临界值的决定：根据金标准确定患者和对照组二组例数相似的人群，并测出各组的实验数据。使用该实验数据的不同的域值来区分阳性和阴性的不同分界点，并分别计算其灵敏度和特异性。绘制受试者工作曲线（receiveroperatingcharacteristiccurve,ROC曲线）以接近左上角的点即为最佳诊断临界值。,65,乳癌时CA15-3的ROC曲线,66,前列腺癌PSA试验和P