噬菌体侵染细菌的实验误差分析

.噬菌体侵染细菌的实验误差分析贵州省思南中学勾华强 在噬菌体侵染细菌的实验中，赫尔希和蔡斯分别用35S和32P标记的T2噬菌体侵染大肠杆菌，在理论上，用35S标记的T2噬菌体侵染大肠杆菌后，上清液具有很高的放射性，下层沉淀物中不含放射性。用32P标记的噬菌体侵染大肠杆菌后，上清液中不含放射性，下层沉淀物中具有很高的放射性；而实际上，实验的最终结果显示：用35S标记的T2噬菌体侵染大肠杆菌后，在离心的下层沉淀物中，具有一定的放射性，而上清液中的放射性强度比理论值略低。用32P标记的T2噬菌体侵染大肠杆菌后，在离心的上层清液中，具有一定的放射性，而下层沉淀物中的放射性强度比理论值略低。 在此实验中，是什么原因导致实验数据与理论数据之间存在着误差呢？我们不妨来对此实验过程进行一下误差分析： 一、误差的主要来源： （一）35S标记的T2噬菌体侵染大肠杆菌的误差来源： 1、在实验中，35S标记的T2噬菌体与大肠杆菌混合培养后，在搅拌器中搅拌不充分，使吸附在大肠杆菌外被35S标记的噬菌体蛋白质外壳没有与大肠杆菌完全分离开，所以离心后下层沉淀物中存在放射性，而上清液中的放射性比理论值略低。 2、在实验中，被35S标记的一部分噬菌体没有侵染到大肠杆菌细胞内，经离心后少量存在于沉淀物中，使沉淀物中出现放射性，而上清液中的放射性比理论值略低。 （二）32P标记的T2噬菌体侵染大肠杆菌的误差来源： 1、在实验中，32P标记的噬菌体和大肠杆菌混合培养的时间过长，噬菌体在大肠杆菌细胞内增殖后释放出来，经离心后分布于上清液，使上清液出现放射性，而下层的放射性强度比理论值略低。 2、在实验中，仍然有一部分噬菌体没有侵染到大肠杆菌细胞内，经离心后少量分布于上清液中，使上清液出现放射性，而下层沉淀物中的放射性强度比理论值略低。 二、减小误差的主要方法： 在此实验中要减小实验数据和理论数据之间的误差，应注意以下几点。 1、用被35S和32P标记的T2噬菌体侵染大肠杆菌时，要控制好条件，使之让T2噬菌体处于最适于侵染的环境中，达到充分侵染的目的。 2、严格控制好从噬菌体和大肠杆菌混合培养到用离心机分离的时间，时间过短未充分侵染，时间过长侵染进入大肠杆菌细胞内的噬菌体增殖后释放出来，都会使实验误差增大，故严格控制好时间是减小误差的关键因素之一。 3、在搅拌器中搅拌时一定要迅速、充分，使被35S标记的噬菌体蛋白质外壳与大肠杆菌完全分离开，减小误差。综合练习题：在赫尔希和蔡斯的噬菌体侵染细菌实验中，用32P标记的噬菌体侵染大肠杆菌，在理论上，上清液中不含放射性，下层沉淀物中具有很高的放射性；而实际上，实验的最终结果显示：在离心上层液体中，也具有一定的放射性，而下层的放射性强度比理论值略低。 （1）在赫尔希和蔡斯的噬菌体侵染细菌实验中，用32P标记噬菌体的DNA所体现的实验方法是。 （2）在理论上，上层液体放射性应该为0，其原因是。 （3）由于实验数据和理论数据之间有较大的误差，由此对实验过程进行误差分析： a、在实验中，从噬菌体和大肠杆菌混合培养，到用离心机分离，这一段时间如果过长，会使上层液的放射性含量，其原因是。 b、在实验中，如果有一部分噬菌体没有侵染到大肠杆菌细胞内，是否是误差的来源呢？。理由是：。 （4）噬菌体侵染细菌实验证明了。（5）请设计一个方法，来大量制备用35S标记的噬菌体（简要说明）。 答案：（1）同位素标记法（同位素示踪法）（2）噬菌体将含32P的DNA全部注入到大肠杆菌内（3）a、升高；噬菌体在大肠杆功菌内增殖后释放出来，经离心后分布于上清液。b、是；没有侵入大肠杆菌的