组织学与胚胎学--绪论上皮1

1,组织学与胚胎学,2,组织学与胚胎学,HistologyandEmbryology,3,第一章组织学绪论,Chapter1IntroductionofHistology,1、组织学、组织、嗜酸性、嗜碱性的概念2、组织学学习方法要点3、石蜡切片术和超薄切片术的基本原理4、HE染色法,本章重点,5,绪论(Introduction)I.什么是组织学(Histology)?组织学是研究人体正常细微结构及其相关功能的科学。细胞、组织、器官、系统A.微观结构:1.光学显微镜(Lightmicroscope，LM):计量单位是微米(m)。(1m=0.001mm)。2.电子显微镜(Electronmicroscope，EM):计量单位是纳米(nm)。(1nm=0.001m)。,6,光学显微镜基本结构：1.照明灯(Lamp)2.聚光器(Condenser)3.载物台和切片夹(Mechanicalstageandspecimenretainer)4.推进器(Mechanicalstageadjustmentknob)5.物镜(Objectives)6.粗细螺旋(Courseandfinefocusknob)7.目镜(Oculars)8.照相机等接口(Connectiontocamera,etc.),7,几种特殊的光学显微镜,相差显微镜（phasecontrastmicroscope）倒置相差显微镜（invertedphasecontrastmicroscope）荧光显微镜(fluorescencemicroscope)暗视野显微镜（darkfieldmicroscope）共聚焦激光扫描显微镜(confocallaserscanningmicroscope,CLSM)偏光显微镜,8,图19免疫组织化学（荧光素标记）毛细血管内皮细胞呈vWF阳性,9,10,B.相关功能:微观结构和其功能相适应，反之亦然。C.人体结构的4个层次:1.细胞(Cell):人体结构的基本结构和功能单位。2.组织(Tissue):由一群结构和功能相同或相似的细胞(及其细胞间质)构成。人体内有4种基本组织：上皮组织，结缔组织，肌组织和神经组织。3.器官(Organ):由组织有机地结合起来而构成。4.系统(System):由结构相似且功能相关的器官构成。,11,人啊，认识你自己！,在科幻电影阿凡达中，人通过脑电波控制可以掌控克隆外星人“阿凡达”的躯体。,“阿凡达”异体操控成真科幻电影阿凡达中，人通过脑电波控制可以掌控克隆外星人“阿凡达”的躯体。美国科研人员18日报告说，他们首次在猴子身上实现了这种异体操控，这一成果有助于未来帮助瘫痪者重新控制自己的身体。,12,II.为什么要学习组织学?1.组织学又叫微观解剖学(Microanatomy)，是解剖学知识的进一步完善。2.结构是功能的基础，学好组织学是学好生理学(Physiology)的基础。3.只有了解正常结构，才能学习其异常变化。因此组织学是病理学(Pathology)的基础。,13,III.怎样学习组织学?A.LM技术:分辨率(Resolution)是指能够分辨相邻两点之间的最小距离。LM的分辨率约为0.2m。1.切片(Section):将组织切薄使光线可以透过。a.取材、固定(Fixation):为保存新鲜组织的微观结构，尽快将组织浸入到酒精，甲醛，苦味酸，Bouins液或Zenkers液等固定剂中。,14,b.石蜡包埋(Paraffinembedding):*脱水(Dehydration):用浓度逐渐升高的酒精(70100%)将组织中的水完全置换出来。*透明(Clearing):用二甲苯完全置换出酒精。*浸蜡(Infiltration):在6062C时，用液态石蜡完全置换出二甲苯。室温时石蜡凝固成固态，内含待切组织。,15,c.切片:用切片机将组织切成120m厚的蜡片，然后将其放到温水上，待其完全展开后，裱到有粘附剂的载玻片上。,16,除切片外，还有其他处理组织的方法：*铺片(Wholemount):用于很薄的组织，如肠系膜。*磨片(Groundsection):用于很坚硬的组织，如骨和牙。涂片(Smear):用于液态组织，如血液，精液和唾液。火棉胶切片（celloidinsection）：较硬组织、时间长。冰冻切片(frozensection）：保持酶活性、迅速诊断。,17,2.染色(Staining):染料可以将微观结构显示不同的颜色以便观察鉴别。在染色前，需要脱蜡入水，因为染料是水溶性的。,18,图7HE染色（左上）苏木精（左下）伊红（下）染好的切片脱水后加盖玻片,19,a.最常用的染色方法是苏木素(Hematoxylin,H)伊红染色(Eosin,E)，简称HE染色。*苏木素是碱性染料，蓝紫色，可以使细胞核及细胞质中的核糖体着色。被苏木素着色的结构本身为酸性，具有嗜碱性(Basophilic)。,20,*伊红是酸性染料，粉红色。可以将大多数细胞的细胞质及细胞间质染成粉红色。被伊红着色的结构本身为碱性，具有嗜酸性(Acidophilic)。*不易被苏木素和伊红着色的结构具有嗜中性(Neutrophilic)。,21,肥大细胞的颗粒被甲苯铵蓝(一种蓝色染料)染成紫红色b.如果某结构显示的颜色和染料本身的颜色不同，该结构具有异染性(Metachromasia)。c.如果某结构能将银离子还原成银原子，并吸附银原子而使自身显示棕黑色，该结构具有嗜银性(Argyrophilic)。,22,网状纤维具有嗜银性，因此可以用银盐染色来显示。,23,H&E染色的中等动静脉d.不同的染色方法，其结果不同。,24,醛复红染色的中等动静脉,25,在染色后，重新进入酒精和二甲苯，最后用中性树胶封片，以便长期保存。*切片:固定梯度酒精二甲苯石蜡。*染色:石蜡二甲苯梯度酒精水。*保存:水梯度酒精二甲苯中性树胶。,26,二、电镜技术,1.透射电镜技术（transmissionelectronmicroscopeTEM）,a.标本制作5080nm的超薄切片b.染色重金属盐染色c.超微结构d.电子密度高、低,27,电子密度高:当电子束投射到密度大吸附重金属多的结构时,电子被散射的多,因此,射落到荧光屏上的电子少而呈暗像,电镜照片呈黑或深灰色,称为电子密度高。反之称为电子密度低。,28,2.扫描电镜技术(SEM),a.标本制作不需制作超薄切片b.染色重金属盐染色c.超微结构用于观察组织细胞表面结构，具有真实的立体感。,29,30,3.EM的组织的制备与LM的相似，但有以下不同:a.通常使用戊二醛和四氧化锇作双重固定。b.切片超薄(厚度小于90nm)，塑胶包埋。c.用重金属盐如醋酸铀或醋酸铅等染色。因此，所有原始的电镜图片都是黑白的。TEM：电子密度高、电子密度低,31,32,TEM显示胰腺腺泡细胞内部结构。,33,其它的显微镜技术,冷冻蚀刻(freezeetchinemethod)观察细胞断裂表面结构分析电镜X射线显微分析术(X-raymicroanalysis)研究细胞、组织内元素含量及分布,34,35,电镜:“两暗夹一明”,C膜:,36,C.特殊的染色方法:1.组织化学(Histochemistry,细胞化学)法:通过生物化学的方法在原位产生不溶解的有颜色的反应产物，来显示微细结构的位置，然后用显微镜观察。PAS反应:用来显示多糖及糖蛋白的糖链的分布。先用过碘酸(Periodicacid)将多糖氧化，在多糖表面形成戊二醛结构，然后用无色亚硫酸品红(Schiff试剂)还原戊二醛形成紫红色沉淀。脂类显示法、核酸显示法、酶类显示法,37,肝脏的PAS染色,38,2.免疫细胞化学(Immunocytochemistry)染色法:a.待测结构或化学物质被看作抗原(Antigen)，通过非常敏感和专一的免疫反应使抗原和被标记的抗体(Antibody)结合，然后显示标记物，在原位产生不溶有色的反应产物，最后用显微镜观察。,39,b.2种基本染色法:*直接法:第一抗体被标记。*间接法:第一抗体也被看作抗原，而第二抗体被标记。因为信号被放大，因此更加敏感。3.放射自显影(Autoradiography):给细胞所要代谢的物质分子上标记放射性物质如I125等，间隔照相，从而追踪该物质代谢途径。,40,4、细胞培养术和组织工程细胞培养术(cellculture),41,组织工程(tissueengineering)是应用组织学方法和工程学原理在体外模拟构建机体的组织或器官的技术。基本要素：种子细胞细胞外基质（生物学材料）信息分子体外构建组织或器官移植于体内。,42,组织化学技术,(1)一般组织化学(histochemistry)技术原理：待检物试剂有色沉淀（原位）常用技术：a.多糖和糖蛋白的糖链:过碘酸希夫（pariodicacidSchiffreactionPAS）反应原理：多糖过碘酸多醛希夫试剂紫红色沉淀b.脂类：苏丹、油红、尼罗蓝等c.酶：酶对底物作用原理d.核酸：盐酸处理，再用Schiff试剂检测,43,44,2.免疫组织化学(immunohistology)技术免疫细胞化学（immunocytochemistry)技术,根据抗原、抗体特异性结合原理，检测组织切片中的肽和蛋白质.特异性强、敏感度高。用标记的抗体与组织中的抗原结合，标记物可于显微镜下观察。标记物有荧光素（荧光显微镜观察）、辣根过氧化物酶（光镜或电镜观察）、胶体金（多用于电镜观察）分为：直接法间接法,45,免疫组织化学原理模式图,46,3.原位杂交技术（insituhybridization）即核酸分子杂交组织化学术,检测基因（DNA片段）的有无基因的表达活性（mRNA）。原理：用带标记物的已知碱基顺序的核酸探针与细胞内待测核酸按碱基配对原则进行特异性原位结合（杂交），并通过对标记物的显示而获知待测核酸的有无及相对量。常用标记物：放射性核素、地高辛,47,4、细胞培养(cellculture)、组织培养技术5.干细胞（stemcell）和组织工程(tissueengineering)6、图像分析术(imageanalysis)又称形态计量术（morphometry),体视学(sterology)流式细胞仪技术等。,其它技术,48,实验中的组织工程耳,49,D.学习组织学应注意的问题:1.体内结构为立体的，三维的，而课本、讲义和显微镜下的结构均为平面的，二维的。2.学习组织学应注意静态与动态、理论与实践相结合、前后联系对比、结构与功能联系。,50,本章测试,1.名词解释：,HE染色（HEstaining）PAS反应（PASreaction）,2.填空：在电镜照片上呈黑色或深灰色称电子密度，呈浅灰色称电子密度。关于石蜡切片技术切片厚度一般为；透射电镜技术切片厚度一般为_。,51,52,本章重点,掌握上皮组织的一般特点和分类。掌握各种被覆上皮的结构特点分布和功能。掌握微绒毛、纤毛、紧密连接、缝隙连接、桥粒、基膜、质膜内褶的超微结构与功能。了解腺细胞、腺上皮和腺的概念，外分泌腺的主要形态特点。,53,上皮组织(EpitheliumTissue)组织由一群结构和功能相同或相似的细胞(及细胞间质)构成。人体内有四大基本组织。,54,概述:A.来源：上皮组织来自胚胎时期的三个胚层B.分类:根据功能分4类-被覆，腺，感觉，肌上皮。C.被覆上皮的特性:1.细胞多、排列紧密,间质很少。2.有基膜、无血管，但神经末梢丰富。3.被覆上皮分布于体表管、腔、囊的内外表面。有极性。极性:细胞的游离面和基底面的结构和功能不同。4.功能:保护、分泌和吸收、排泄等。,55,56,II.被覆上皮的一般结构:A.分类依据:细胞排列的层数和表层细胞的形态。B.被覆上皮的类型和结构:1.单层:由单层细胞构成。a.单层扁平上皮(Simplesquamousepithelium):由单层扁平状细胞构成。,57,*内皮(Endothelium):分布于心血管和淋巴管内表面。*间皮(Mesothelium):衬于体腔内表面。*特点：表面光滑,减少器官间磨擦，利于液体流动和物质通透.其他类型:分布于肾小体、和肺等处。,58,b.单层立方上皮(Simplecuboidalepithelium):特点：由单层立方细胞构成。细胞呈立方形（侧面观）或多角形（表面观），核圆居中。分布：肾近曲小管和甲状腺等处。作用：分泌、吸收,59,c.单层柱状上皮(Simplecolumnarepithelium):特点：由单层柱状细胞构成，细胞呈柱状（侧面观）或多角形（表面观），核长圆形、位于基底部。分布：胃、肠、胆囊、子宫等处。作用：吸收、分泌,60,杯状细胞(Gobletcell):杯状。胞质顶部被大量分泌颗粒占据，颗粒内含粘液。胞核位于基部，小，染色深。分泌粘液，润滑表面。,61,d.假复层纤毛柱状上皮(pseudostratifiedCiliatedcolumnarepithelium):分布于气管内表面。由柱状，梭形和锥体细胞构成，常夹有杯状细胞。,62,细胞核高低不同；所有的细胞均位于基膜上，但只有柱状和杯状细胞可以达到游离面。只有柱状细胞顶部有纤毛。作用：分泌、保护,63,2.复层(由复层细胞构成)：a.复层扁平上皮(Stratifiedsquamousepithelium):由3种细胞构成。表层细胞扁平形；中层细胞多边形，基底层细胞立方或柱状，排列凹凸不平，且增殖能力强。,64,未角化(Nonkeratinized)的复层扁平上皮：分布于食道。所有的细胞均是活细胞。角化的(Keratinized)复层扁平上皮:分布于表皮。角化层内的细胞已死亡。作用：保护,65,b.变移上皮(Transitionalepithelium):特点：细胞为多层，细胞形状和层数因器官功能状态不同而异排空的膀胱上皮厚，细胞层数增多，细胞呈大的立方形充盈的膀胱上皮薄，细胞层数减少，细胞呈扁梭形分布：肾盏、肾盂、输尿管、膀胱,66,变移上皮光镜图（膀胱空虚态）,变移上皮光镜图（膀胱充盈态）,67,被覆上皮的类型和主要分布,上皮类型主要分布单层上皮单层扁平上皮内皮:心、心血管和淋巴管间皮:胸膜、腹膜和心包膜单层立方上皮肾、甲状腺等单层柱状上皮胃、肠、子宫等假复层纤毛柱状上皮呼吸管道复层上皮复层扁平上皮口腔、食管和阴道皮肤复层柱状上皮男性尿道等变移上皮肾盂、输尿管和膀胱,68,Originateandclassificationofgland,69,III.腺体(Glands):腺上皮为主的器官。A.概述:1.分类:两类。a.内分泌腺(Endocrineglands)：无导管。分泌物由血管和淋巴管运送。甲状腺、肾上腺、胰腺中的胰岛等。b.外分泌腺(Exocrinegland)：有导管。汗腺、唾液腺、胰腺。,70,71,B.几种腺上皮细胞:1.浆液性细胞(Serouscell):即蛋白质分泌细胞。a.多边形或锥形，极性明显。b.基底部嗜碱，含大量的RER。c.顶部嗜酸，含大量的分泌颗粒，内有蛋白质(酶)。d.通过胞吐释放颗粒内容物。,72,2.粘液性细胞(Mucus-secretingcell):即糖蛋白分泌细胞。a.细胞顶部有大量分泌颗粒。b.颗粒内有强亲水性粘液。c.杯状细胞是体内典型的粘液性细胞。,73,浆液性细胞粘液性细胞,74,3.类固醇分泌细胞(Steroid-secretingcell):分泌类固醇类激素的内分泌细胞。嗜酸性细胞质内有大量脂滴，发达的SER和丰富的管状嵴MT。,75,IV.上皮组织的特殊结构:通常存在于上皮组织的细胞之间，也可存在于其他组织的细胞之间。A.游离面(Freesurface):1.微绒毛(Microvillus):a.细胞游离面伸出的微细指状突起，外覆细胞衣。长约1m，直径约80nm。,76,b.内含2030根由终末网发出的纵行微丝。c.扩大细胞表面积，有利于吸收。*纹(刷)状缘(Striated(brush)border):密集排列的微绒毛在光镜下的结构。分布于小肠内表面(肾近曲小管)。,77,2.纤毛(Cilium):a.细长毛发样结构，可运动。510m长。直径0.2m。协调摆动时象风吹麦浪。,78,b.“9+2”结构:内部由周边的纵行9组2联微管和居中的2条纵行单独微管构成，含肌动蛋白丝。,79,B.侧面(Lateralsurface):电镜结构。1.紧密连接(Tightjunction)：a.带状。相邻细胞的细胞膜内蛋白质“嵴