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文档简介
.,1,土壤微生物的分离筛选,.,2,一,微生物筛选原理及介绍,二,微生物筛选的流程,三,微生物筛选的操作,content,.,3,一、微生物筛选介绍,1、概念2、筛选及纯化的方法3、培养基的选择,.,4,概念:在混杂的微生物群体中,按照微生物的代谢特征,分离出特定功能的微生物,并进行纯化直至获得单一菌株的操作过程。土壤是微生物的大本营,混杂着大量的微生物,从中分离可得到只含有一种微生物的纯培养。,概念筛选及纯化的方法培养基的选择,.,5,微生物筛选的方法有:稀释涂布法和平板划线法。稀释涂布法:将土壤溶液稀释成一定的梯度,将其涂布到固体平板培养基上。平板划线法:挑取稀释涂布后长出的菌落,在固体平板培养基上划线培养,获取纯菌落。,概念筛选及纯化的方法培养基的选择,.,6,.,7,细菌的筛选:选择性培养基根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。其功能是使混合菌样中的劣势菌变成优势菌,从而提高该菌的筛选效率。,概念筛选及纯化的方法培养基的选择,.,8,细菌的保存:牛肉膏蛋白胨培养基配方(g):牛肉膏3,蛋白胨10,氯化钠5,琼脂15,蒸馏水1000ml,pH7.2。,概念筛选及纯化的方法培养基的选择,.,9,二、微生物筛选纯化的流程,样品,富集培养,梯度稀释,涂布培养,平板划线纯化,斜面保存,.,10,三微生物筛选纯化的操作,注意事项:筛选之前,提前制作好试验用的培养基。与培养微生物相关的试验器材需要灭菌,方法为在121的条件下高压灭菌20分钟。与微生物相关的操作需要在无菌操作台上进行。操作之前15分钟打开紫外灯。,.,11,样品,富集培养,梯度稀释,涂布培养,划线纯化,斜面保存,采样:土壤样品,梅花形布点采样,取得的用四分法进行取样,将样品放入4冰箱中保存待用。,.,12,富集培养:指从微生物混合群开始,对特定种的数量比例不断增高而引向纯培养的一种培养方法。在适于目标微生物而不适于其他微生物生长的条件下继续培养,则目标微生物将成为优势种而得到纯培养。,样品,富集培养,梯度稀释,涂布培养,划线纯化,斜面保存,.,13,以筛选产DMS功能微生物为例:取2.5g土样置于50ml改良基础盐液体培养基中,28震荡培养4天。,样品,富集培养,梯度稀释,涂布培养,划线纯化,斜面保存,.,14,样品,富集培养,梯度稀释,涂布培养,划线纯化,斜面保存,.,15,样品,富集培养,梯度稀释,涂布培养,划线纯化,斜面保存,将菌种用无菌水制成悬液。取若干只无菌试管,每只内盛9ml无菌水。吸取上述菌悬液lml加入第1只含有无菌水的试管内。也就是10-1。从第1只试管内(10-1)吸取lml注入第2只含有无菌水的试管内,也就是10-2。用同样方法,制成10-310-8的菌悬液。,.,16,样品,富集培养,梯度稀释,涂布培养,划线纯化,斜面保存,划线目的:逐步纯化,直至出现单菌落,获得纯菌株。35次。,.,17,样品,富集培养,梯度稀释,涂布培养,划线纯化,斜面保存,.,18,样品,富集培养,梯度稀释,涂布培养,划线纯化,斜面保存,.,19,样品,富集培养,梯度稀释,涂布培养,划线纯化,斜面保存,.,20,将接种菌株的斜面放入4冰箱
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