马丽萍+血小板与炎症-10-5-14.ppt

血小板与炎症中山大学孙逸仙纪念医院马丽萍,传统观点的挑战,血小板无细胞核，长期以来认为其缺乏基因表达及蛋白合成的功能直到上世纪70年代，用活化后的血小板再次注入到血液循环中仍有正常的存活曲线及聚集功能，一些残存于血小板胞浆中的mRNA具有完整的蛋白质翻译功能血小板在某种环境下合成新的蛋白质，使其自身形态和/或功能发生变化，参与除止凝血以外的其它功能血小板仅仅是细胞碎片，不具有复杂分子途径的能力这种观点正在慢慢改变、进步,血小板是炎症细胞和/或免疫细胞,问题的提出,1999年RussellRoss动脉动粥样硬化-一种炎症性疾病炎症反应贯穿于AS的发生、发展及斑块破裂、血栓形成的整个过程血小板并不是被动的参与了AS中简单的血栓形成，而是通过释放大量的促炎物质如PF4、IL-1、RANTES启动AS在AS斑块模型中发现，血小板早于WBC出现在AS斑块局部血小板具有抗感染的作用,血小板具有抗感染的作用血小板保留了原始炎症细胞的特性，和他们享有共同的表面抗原：FcRII/RI受体、C-反应蛋白受体、CD36、趋化因子（CCR1、CCR3、CCR4，CXCR4）血小板连接先天性和获得性免疫血小板可产生诱导性受体，如toll-like受体（TLRs），监测感染信号并发生反应Clark等人在感染模型中发现，血小板TLR4捕获血中同源配体，引起血小板聚集，随后粒细胞聚集，形成粒细胞胞外围捕，尤其在有窗孔的组织如肝血窦、肺毛细管中。提示血小板可能通过识别分子模式和感染早期预警信号，直接或间接地监测病原菌，从而促进免疫，导致血小板-粒细胞相互作用以增强对细菌的清除。,血小板能与很多种类的病原微生物相互作用，产生抗微生物的应答和机制血小板是数量最多、最早累积到血管感染部位血小板聚集到血管内皮感染的部位，并表现为对内皮细胞损伤或微生物入侵产生应答的最迅速、最大量的炎症细胞与抗微生物效应有关的血小板特异性分子的证实血小板有抗微生物蛋白（PMPs）与阳离子抗菌肽双重趋化因子以及抗微生物效应的功能,血小板功能,正常人血小板100300109/L，仅次于红细胞含量第二丰富的细胞；不仅拥有大的表面面积，而且拥有多的开放通道系统血小板通过激活、黏附、聚集、释放四大基本功能参与止血与血栓的基本病理生理过程血小板通过调节表面粘附及免疫受体的表达，刺激多种炎症介质和细胞因子的释放，辅助和调控炎症和免疫反应。血小板，炎症的启动子，参与多种疾病的发生和发展,血小板结构特点,无核，通过转录途径合成蛋白质3种颗粒：a-granules,lysosome,dencecoregranules膜系统粘附蛋白：FIB,FNT,vWF,P-seletin,GPba,vitronectin,thrombospondin生长因子：PDGF,TGF-B,EGF趋化因子：RANTES,PF4（CXCL4）,SDF-1(CXCL12),ENA78(CXCL5)细胞因子：IL-1B,CD40L,B-TG凝血因子：F，PAI-1,PL,PS,Figure1.Plateletadhesionmoleculesandsurfacereceptors.,血小板是炎症细胞和/或免疫细胞,血小板膜表面分子,P-selectin：P-选择素(CD62P)表达于活化的血小板，配体是PSGL-1PSGL-1与CD62P相互作用，使血小板聚集在白细胞周围，增加与内皮细胞的粘附P-选择素直接活化和上调白细胞CD11b/CD18（Mac-1），后者与纤维蛋白原GPb/a接合，促进白细胞与血小板的粘附及在血栓部位的聚集Integrins(abB3,Gpba):血小板内外膜的转运通道，配体有FIB，vWF，FIN，CD40L等血小板与内皮细胞结合的桥梁,CD40与CD40L,CD40：主要表达于B淋巴细胞、单核细胞、巨噬细胞、内皮细胞及血小板CD40L(CD154)：CD40的配体，一种膜转移蛋白，表达于活化的血小板膜表面，在结构上与TNF-a相关CD40与CD40L结合后数分钟至数小时，CD40L裂解形成相对分子质量为18103的蛋白，即可溶性CD40L(sCD40L，sCD154)目前认为，机体70%以上的CD40L来源于血小板,CD40L主要功能：诱导内皮、平滑肌和巨噬细胞分泌大量细胞因子（如IL-6，IL-8，TNF-a），并在细胞表面表达粘附分子，如ICAM-1（CD54)、VCAM-1（CD106)、MCP-1）等，调节白细胞在炎症部位信号途径诱导内皮、平滑肌和巨噬细胞表达TF，下调血栓调节蛋白（TM），使内皮细胞的凝血活性增强、纤溶活性减低，促进局部血栓形成sCD40L同样可通过CD40直接诱导血小板活化。具体机制:sCD40L具有KGD氨基酸序列，通过结合3-integrin，诱导GPIIb/IIIa胞浆区磷酸化触发血小板外向内的信号转导，促进血小板伸展和血栓形成,ICAM-2(细胞内黏附分子-2）配体：白细胞CD11a/CD18、DC-SIGNJAM-A血小板与白细胞结合的关键受体Toll-likeresceptors（TLRs)表达在多种细胞，识别病原菌,天然免疫受体配体：LPS与CD40L、TNF-a释放增加以及血小板减少有关趋化因子受体7-转移膜蛋白血小板有3种：CCR1,CCR3,CCR4参与血小板聚集和激活,可溶性免疫介质,趋化因子功能:吸引免疫细胞到免疫应答局部,参与免疫调节和免疫病理反应;主要分为2个趋化因子亚家族:Cys-X-Cys（CXC）和Cys-Cys（CC)血小板因子4(PF4，CXCL4)：诱导单核细胞产生促炎症细胞素MCP-1和IL-8,趋向炎症部位中和肝素，保护凝血酶RANTES(CC）SDF-1局部炎症和AS,细胞因子IL-1血小板微粒(plateletmicroparticles,PMPs)血小板激活后产生许多促凝活性的微小膜碎片，具有完整血小板的标记和功能PMPs含TF，可能具有更强的止血、凝血及诱发血栓形成的作用,血小板作为炎症细胞与疾病的关系,激活的血小板与不同的细胞发生反应受体间的直接作用；自分泌；旁分泌直接参与多种炎症过程血小板激活状态动脉粥样硬化心血管疾病再狭窄脓毒症血栓炎症性肠病凝血关节炎血小板诱导和启动血管事件的加重抗血小板治疗有效,血小板与内皮细胞,正常情况下，血小板不与完整的血管内皮细胞相互作用；相反，内皮控制血小板的再激活（COX2、PGI2、前列腺素合成）受损的内皮细胞促使血小板发生黏附血小板在向内皮黏附的过程中激活并释放潜在的炎性和促有丝分裂物质，发生趋化、黏附和内皮细胞溶解如Gpba受体吸附和上调血小板上CD62P和CD40L，导致CD40L依赖的内皮细胞活性,Figure2.Platelet-endotheliumadhesionActivatedendotheliumsurfaceexpressesP-selectin.PlateletsurfacereceptorsGPIbandPSGL-1interactwithendothelialP-selectinandmediateplateletrolling.Subsequentfirmadhesionismediatedthrough3integrins.,血小板与白细胞,血小板和白细胞聚集通过激活白细胞黏附受体或桥梁作用，黏附到血管内皮细胞血小板进一步趋化和吸引白细胞，使之牢固结合于血管壁血小板、白细胞和内皮细胞相互作用，引发炎性级联扩大包括自分泌、旁分泌和黏附受体的直接作用,血小板黏附和激活a颗粒快速释放P-selectin到胞膜白细胞通过P-selectin/PSGL-1牢固结合血小板单核细胞通过Mac-1结合到血小板（血小板上Mac-1受体：Gpba,JAM-2/3,CD40L,FIB）细胞内激活NF-kB激活提高单核和中性粒细胞的黏附凝血细胞因子释放（IL-1,IL-8,MCP-1,TNF-a）其他：u-PAR,TREM等,Figure3.InteractionsofplateletswithdifferentleukocytesubtypesregulatevascularinflammationAmultitudeofmolecularmechanismsandplatelet-derivedcomponentsmediateandregulateplatelet-inducedleukocyteinfiltrationincludingchemokinedepositionandmononuclearandendothelialcellactivation.,Figure4.Adherentplateletsrecruitandinflamemonocytes.Adherentand/oractivatedplateletsmainlyinteractwithmonocyticPSGL-1viaP-selectinandwithmonocyticMac-1(M2)viaIIb3(andfibrinogenbridging)orGP-Ib.Thereby,plateletsinitiatemonocytesecretionofchemokines,cytokines,andprocoagulatorytissuefactor,upregulateandactivateadhesionreceptorsandproteases,andinducemonocytedifferentiationintomacrophages.Thus,platelet-monocyteinteractionprovidesanatherogenicmilieuatthevascularwallthatsupportsplaqueformation.,血小板与内皮前体细胞(EPCs),EPCs来源于骨髓，表达CD34，CD133EPCs可分化为EC，修复血管分化为SMC、泡沫细胞，动脉硬化和狭窄EPCs并不表达黏附受体，而是通过血小板结合于受损的血管（趋化作用和提供接触表面）血小板可引导循环中的EPCs到动脉血栓表面（通过SDF-1）Blockantibody支持上述观点AndrasEM,ArteriosclerThrombVascBiol2008;28:5-,Figure6.HypotheticalmodelofatherogenesistriggeredbyplateletsActivatedplateletsrollalongtheendothelialmonolayerviaGPIb/P-selectinorPSGL-1/P-selectin.Thereafter,plateletsfirmlyadheretovascularendotheliumvia3integrins,releaseproinflammatorycompounds(IL-1,CD40L),andinduceaproatherogenicphenotypeofECs(chemotaxis,MCP-1;adhesion,ICAM-1).Subsequently,adherentplateletsrecruitcirculatingleukocytes,bindthem,andinflamethembyreceptorinteractionsandparacrinepathways,therebyinitiatingleukocytetransmigrationandfoamcellformation.Thus,plateletsprovidetheinflammatorybasisforplaqueformationbeforephysicallyoccludingthevesselbythrombosisuponplaquerupture.,我们的工作,1.血小板与炎症性疾病(AS)血小板活性在AS增高血小板NO系统与AS进程相关心血管事件的发生和血小板激活有关血栓与止血学,2003JAAMP，2004中华血液学杂志,2005,3中华老年杂志,2009,7Blood,2004,ASH,Abstract,2.血小板介导机体获得性