DNA双链断裂修复蛋白在宫颈癌和CIN组织中的表达.doc

一课资料网/DNA双链断裂修复蛋白在宫颈癌和CIN组织中的表达 作者：庄亮，于世英，黄晓园，熊慧华，李伟，曹阳，冷彦【摘要】 目的 研究DNA双链断裂修复蛋白（Ku80、DNAPKcs和ATM）在宫颈癌和宫颈上皮内瘤样病变（CIN）组织中的表达情况，探讨3种蛋白在宫颈癌发生发展中的作用及相互关系。方法 应用免疫组化SP法检测41例宫颈癌组织和15例CIN组织中Ku80，DNAPKcs和ATM蛋白的表达情况。结果 Ku80、DNAPKcs和ATM蛋白在宫颈癌患者中的阳性率分别为70.7、68.3和19.5，在CIN患者中的阳性率分别为80.0、73.3和33.3；3种蛋白在宫颈癌组织中的表达均低于CIN组织，但差异无统计学意义（P0.05）。3种蛋白的表达在不同年龄、病理类型、分化程度和临床分期的宫颈癌患者中差异无统计学意义（P0.05）。Spearman等级相关分析，在56例患者中，Ku80与DNAPKcs的表达呈正相关（r0.583，P0.000）；Ku80与ATM的表达亦呈正相关（r0.274，P0.041）。结论 3种蛋白可能未在宫颈癌的发生发展中起主要作用；Ku80与DNAPKcs及与ATM之间存在密切关系。 【关键词】 Ku80；DNAPKcs；ATM；宫颈癌；宫颈上皮内瘤样病变 放射线主要是通过导致DNA双链断裂（DNA doublestrand break，DSB）起到杀死肿瘤细胞的作用，但细胞都有不同程度的DSB修复能力，修复方式有两种：以DNA依赖蛋白激酶（DNAdependent protein kinase，DNAPK，包括Ku80/Ku70异二聚体和DNAPK催化亚单位DNAPKcs）为主的非同源性末端连接（DNA nonhomologous endjoining，NHEJ）和以ATM（Ataxiatelangiectasia mutated）为主的同源重组（homologous recombination）修复1。本实验将检测Ku80、DNAPKcs和ATM蛋白在宫颈癌组织和宫颈上皮内瘤样病变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）中的表达，研究3种DSB修复蛋白在宫颈恶性病变及癌前病变中的表达差异及相互关系，探讨其在宫颈癌发生发展过程中的作用，为临床治疗提供依据。 1 材料与方法 1.1 一般资料 随机选取我院1998年3月1999年12月确诊的宫颈癌患者41例，其中鳞癌35例，腺癌5例，腺鳞癌1例；按FIGO分期、a、b、a、b、期分别为2例、6例、8例、2例、23例和0例；年龄2478岁，中位年龄50岁。同时随机选取我院2002年确诊的CIN患者15例，年龄2669岁，中位年龄46岁。上述患者病理检查前均未接受放化疗。 1.2 免疫组化检测蛋白表达 Ku80（稀释度1250）、DNAPKcs（稀释度1200）及ATM（稀释度120）单抗均为美国Neomarkers公司产品；SP试剂盒、显色剂DAB购自北京中山公司。免疫组化染色按SP试剂盒说明书进行，PBS代替一抗作阴性对照，已知阳性片作阳性对照。DNAPKcs和Ku80蛋白表达于胞核；ATM主要表达于胞核，部分表达于胞浆。根据着色程度分别记0分、1分、2分、3分。阳性细胞10%记0分，10%24%记1分，25%49%记2分，50%记3分。综合判定取着色强度和阳性细胞百分数分值之积：0分为阴性，记为（-）；1分以上为阳性，其中1、2分记为（+），3、4分记为（+），6、9分记为（+）。 1.3 统计学方法 SPSS11.5软件进行2检验及Spearman等级相关分析，P0.05）。HR途径修复蛋白ATM在这两种宫颈病变中表达均比较低，虽在CIN患者中的表达率高于宫颈癌，但差异亦无统计学意义（P0.05），见表1。 2.2 各蛋白的表达与宫颈癌患者临床病理特征的关系 Ku80、DNAPKcs和ATM的表达与宫颈癌患者的年龄（以中位年龄50岁为界）、组织病理学类型（将腺癌和腺鳞癌合并）、分化程度和临床分期（将期、a期合并，b期、a期和b期合并）均无相关性（P0.05），见表2。 2.3 各DSB修复蛋白在宫颈病变组织中的表达存在相互联系 由于41例宫颈癌患者与15例CIN患者中3种蛋白的表达差异无统计学意义，故将这56例宫颈病变患者的蛋白表达合并分析：Ku80表达情况为:表1 Ku80、DNAPKcs和ATM在宫颈癌和CIN组织中的表达表2 Ku80、DNAPKcs和ATM的表达与41例宫颈癌患者临床病理特征的比较将各蛋白的表达水平做Spearman等级相关分析发现，Ku80与DNAPKcs的表达呈正相关，相关系数r0.583，P0.000；Ku80与ATM的表达亦呈正相关，相关系数r0.274，P0.041；ATM与DNAPKcs间相关系数r0.254，但P0.059，提示两者无相关。说明Ku80与其它两种蛋白在表达上存在着密切的关系。一课资料网-学习资料下载网站https:/www.ekdoc