HLAB27检测及其临床应用1.ppt

HLA-B27和强直性脊柱炎，1，强制性脊椎炎AS，强制性脊椎炎(AS)主要是以脊椎、中轴骨和四肢的大关节、椎间盘纤维环及其附近的结缔组织纤维化和骨化及关节强直为特征的慢性炎症。病变特点是从骶髂关节到脊椎关节逐步上升，导致骨强直。病理变化，本病早期病理变化为腱，韧带骨附着点炎，也有一定程度的滑膜炎，常以骶髂关节最早发病，后关节粘连，纤维性和骨强直，组织学为关节囊，腱，韧带慢性炎症，淋巴细胞，血浆细胞浸润，这些炎症细胞较小天花板关节炎是强直性脊柱炎的病理表现之一，也是最早的病理表现之一。天花板关节炎早期的病理变化包括软骨下的肉芽肿组织形成、组织学上可见的滑膜增生和淋巴细胞聚集、淋巴滤泡形成和IgG、IgA、IgM的plasma，随着骨侵蚀和软骨的破坏，逐渐被退行性纤维软骨取代AS的检查、体检影像检查最初出现天花板关节炎，可以按疾病选择x线、CT、MRI检查。化验室有ESR、CRP、PLT和血清IGA增加，风湿因子阴性90%患者HLA-B27阳性，HLA-B27检查和临床应用，HLA和HLA-B27MHC，HLA，HLA-B27HLA.基因MHC分子，HLA分子.抗原HLA:人类白细胞抗原(HumanLeukocyteAntigen)、8、HLA抗原是人类主要组织相容性复合体(MajorHistocompatibityComplex，MHC)的表达产物，主要是免疫系统中的细胞根据HLA抗原结构，功能和组织分布可分为三类。分子是HLA-A、-B、-C系列抗原，广泛分布在组织的核细胞表面，包括血小板和网状红细胞，成熟红细胞一般不含HLA抗原；分子是HLA-D/DR、-DP、-DQ系列抗原，主要在b细胞和抗原呈递细胞中表达，两种抗原都与移植有关，其中类抗原更为重要；分子是补体成分。HLA-B27基因属于型MHC基因，基本上在含有身体所有细胞核的细胞中表达。特别是淋巴细胞表面的丰富含量在20多年前就已经表明HLA-B27抗原的表达与强直性脊柱炎有很高的相关性，90%以上的强直性脊柱炎患者HLA-B27抗原呈阳性表达，只有5-10%的一般人群呈阳性，而强直性脊柱炎因为其症状与很多疾病相似，所以很难确诊。因此HLA-B27的检测在疾病的诊断中，HLA-B27相关疾病，11，HLA-B27相关疾病：强直性脊柱炎，患病率：0.3%，20-30岁，男女比例10336901，家庭倾向；主要违规：中轴关节(骶髂关节、脊柱骨突、脊椎侧软组织)可能伴有周围关节和关节外症状，严重时脊柱畸形和关节强直B27检查可以用作有相关症状或高危军人AS早期筛查方法！AS不是RA的特殊类型！12，HLA-B27和AS，13，HLA-B27和AS，14，健康人的HLA-B27阳性率和AS流行率各地区，不同种族的差异HLA-B27和强直性脊柱炎发病相关性很强的两个错误认识需要纠正：HLA-B27阳性不模糊！HLA-B27与AS的关联机制，链不平衡理论分子模拟理论关节源肽假说其他：t细胞受体库假说superantigen假说B27修正因子假说Cys67模型，15，张口香。医学回顾，2012，18 (4) :58-501，HLA基因座的等位基因与实际疾病易感基因密切相关，而HLA基因本身不是引起疾病的实际基因，而是遗传标记。B27抗原和部分G(-)细菌之间存在类似的分子结构，发生分子模拟或交叉反应，身体免疫系统将B27作为病原体抗原免疫反应，对身体造成免疫损伤。认为关节源肽只存在于关节组织，HLA-B27特异性地提出，正常情况下，转移水平低，反应t细胞耐药；如果某些具有同种结构蛋白的病毒或细菌被感染，具有敏感耐受性的t细胞会识别出低级先进的关节性肽，并通过自身免疫反应损伤组织。AS的发病原因尚未完全查明，大部分学者将其与基因、感染、免疫、环境因素等有关。HLA-B27检测方法，抗原级别微细胞毒性流式细胞术基因级别PCR-SSP，17，微细胞毒性法(MLCT)，原则：如果受试者淋巴细胞表面表达有相应的HLA-B27抗原，则与B27抗体结合激活补体，对细胞膜的破坏和细胞根据死细胞对整个细胞的比例，可以判断受试者淋巴细胞表面是否有HLA-B27抗原，以及与抗体的反应强度。优点：操作简便，无需特殊设备，可进行一般实验室。缺点：标本保存不能超过8小时。感染改变细胞膜表面B27分子的数量或结构，影响MLCT的结果，容易产生假阴性。18，J. kirvskari，et al.britishjournal loveeurogy，1997，36336363601185-189，流式细胞术，使用HLA-B27单克隆抗体的细胞表面b227优点：通过电子自动仪表检查减少人类因素的影响，重复性高，结果判断准确，目前作为比较理想的方法，目前使用HLA-B27作为FCM检查进行AS诊断的常规检查方法。缺点：设备昂贵，目前只在大型医院使用，荧光容易淬火。19、LeveringWH、et etal。J。CytometryBClinCytom、2003、54 (1) 333628-38。设计PCR-SSP，设计基因序列特异性引物SSP，在标本中特异性扩增HLA-B27基因片段，用琼脂凝胶电泳分析PCR扩增产物，如果出现目的带，将HLA-B27标记为阳性。优点：通过基因水平的检查，直接放大HLA-B27原油电子，灵敏度高，特异性强。缺点：需要很长时间，需要电泳。需要特定的实验机构和严格的实验条件，临床上实施这项检查有困难。，20，oleupo。tissue antisens，1994，43(4)33605253-256，总结HLA-B27阳性人口也必须预防，即使不太紧张。首先要在平时的生