吴博 毕业PPT.ppt

小麦K型雄性不育系育性恢复基因的CDNA-AFLP分析，应答者：农艺学高级12-2导师：詹，综述，背景：小麦是我国第三大粮食作物。随着全球人口的急剧增加，对小麦的需求也在增加。因此，培育高产小麦新品种已成为小麦育种的迫切要求。杂种优势的利用可以大大提高小麦单位面积产量，充分挖掘小麦产量的遗传潜力。这是未来突破小麦单产瓶颈的重要手段。经过几十年的不断探索，小麦杂种优势多途径利用的现状已经形成，在理论和技术上取得了很大的研究进展。目前，利用cDNAAFLP技术分析小麦二倍体花粉期小麦K型不育系豫麦3号及其相应保持系和两个近等基因系恢复基因的基因表达谱，分析小麦杂种优势利用的主要途径、次要目的和意义，从而预测细胞信号转导、传递、基因转录和调控中育性恢复的分子机制。三份实验材料，恢复系的两个近等基因系NILR-1和NILR-2，保持系豫麦3号和不育系K豫麦3号。结果和分析1。用120对P/M引物组合研究了二倍体花粉期不育系、保持系和恢复系近等基因系的基因表达变化。聚丙烯酰胺凝胶电泳共观察到10757条清晰条带。22对引物可扩增出近等基因系NILR-1、NILR-2和不育系豫麦3号及其保持系之间的53条差异带。结果与分析，1。NILR一号；2.NILR-2；3.豫麦3号；4.圭麦3 1。nilr-1；2.NILR-2；3.尤马3；4.k型雌株系豫麦3图1中近等基因系、不育系和保持系的cDNA-AFLP电泳结果扩增了品系、不育系和保持系，结果和分析，分子标记(DL2000)；消极控制；128。在部分差异TDFs恢复后进行二次聚合酶链反应。聚合酶链反应。金属标记(德国实验室2000)；n .消极控制；1 28。2个NDPCROFDIFFERENCETDFs的部分。图2部分差异TDFS恢复后二次聚合酶链反应的电泳结果。图22 NDPCROFPARTSOFFERENCETDFS。结果和分析。2.对35个成功回收和纯化的特异性片段进行测序。Blast Retrieval显示，有23个片段与已知基因同源，3个片段编码未知功能蛋白，9个片段与已知基因或序列不同源，可能是尚未发现的新基因。35个TDFs中，25个仅出现在近等基因系中，10个仅出现在保持系和不育系中，1个出现在所有材料中，但在近等基因系中高表达。结果表明，小麦K型不育性的育性恢复受恢复基因、抑制基因及其他次要效应的控制。结果与分析，3。在BLAST法可确定特定功能的35个TDFs中，有转录因子、应激反应、细胞和组织代谢、转录促进、表达调节、混合功能、未知功能和非同源性类型。这表明小麦K型不育的育性恢复过程需要多种酶的参与，育性恢复的机制包括复杂的信号途径和生理生化代谢途径。结论和讨论1。本研究表明，小麦K型不育系育性恢复基因的遗传机制是一个受多种生理生化过程调控的综合复杂的过程。2.本研究的结果也表明了cDNA-AFLP技术在靶基因研究中的有效性。前人对小麦K型不育系花药发育的生理生化机制进行了广泛的研究。其中，本实验获得了与花药组织中吲哚乙酸和脯氨酸含量密切相关的两个差异表达片段P1M3-1和P1M3-3。它们的序列分别是吲哚乙酸氨基转移酶和脯氨酰tRNA合成酶，在花药发