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文档简介
.,1,课题2,多聚酶链式反应(PCR)扩增DNA片段,.,2,温故知新1,组成DNA分子的基本单位是什么?这些基本单位是如何连接成DNA分子的?DNA分子结构有什么特点?,.,3,脱氧核苷酸,脱氧核糖,含氮碱基,嘌呤,嘧啶,腺嘌呤(A),鸟嘌呤(G),胞嘧啶(C),胸腺嘧啶(T),.,4,.,5,.,6,脱氧核苷酸链结构简图,磷酸二酯键,.,7,5,5,3,3,.,8,DNA分子的复制需要哪些条件?,DNA分子的复制过程是怎样的?,温故知新2,.,9,DNA母链:提供复制的模板解旋酶:打开DNA双链4种脱氧核苷酸:合成子链的原料DNA聚合酶:催化合成DNA子链ATP:为复制过程提供能量引物:使DNA聚合酶从引物的3端开始连接脱氧核苷酸,DNA复制的条件,.,10,.,11,一、PCR原理:,PCR(多聚酶链式反应)技术是一种体外迅速扩增DNA片段的技术,它能以极少量的DNA为模板,在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。利用了DNA的热变性原理,通过控制温度来控制双链的解聚与结合。,.,12,DNA母链:提供复制的模板解旋酶:打开DNA双链4种脱氧核苷酸:合成子链的原料DNA聚合酶:催化合成DNA子链ATP:为复制过程提供能量引物:使DNA聚合酶从引物的3端开始连接脱氧核苷酸,PCR反应的条件,80100,耐热的DNA聚合酶,缓冲溶液:维持反应的pH值不变,.,13,二、PCR反应的过程,1、变性:,温度上升到90以上时,双链DNA解聚成为单链。,2、复性(退火):,温度下降到50左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。,3、延伸:,温度上升到72左右,溶液中的4种脱氧核苷酸在Taq
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