实验6-a-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测_第1页
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文档简介

实验6a-淀粉酶固定化及淀粉水解试验,第2部分:酶的应用,实验目的:1。固定化a-淀粉酶制备2。淀粉水解测定,知识审查:1, 在果汁生产中_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 2、在洗涤剂中添加_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _可以更有效地去除顽强的污渍。 常用酶制剂有四类:_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。1,酶制剂的概念和种类,(a)酶制剂,含有酶的产品,定义:多酶精制,酶制剂的蛋白酶和脂肪酶,种类:a,液体酶制剂,特定胃肠疾病治疗剂胃蛋白酶,b,固体酶制剂,2,酶生产,提取,定义:使用特定技术从动植物或微生物的组织、细胞中直接提取酶,优点:简单,在动植物或微生物资源丰富的地区具有利用价值,例如可以从屠宰场提取家畜和胰腺;水果加工厂可以从菠萝皮中提取菠萝蛋白酶。缺点:必须有足够的原料,广泛应用受到限制。发酵法一般方法,定义:通过微生物发酵获得所需酶。如果是细胞外酶,可以直接从发酵液中提取。如果是细胞内的酶,就可以通过粉碎细胞来获得。易于培养,快速繁殖,大规模生产。优点:提取方法:说明在食品、化学、纤维、医药等领域广泛使用酶制剂,使用酶制剂有很多优点,你能思考并提出几点建议吗?催化效率、低能耗、低污染等。酶制剂的使用有缺陷吗?3,酶制剂的优点,4 .酶在应用过程中存在的问题,天然酶一般对强酸、强酸、高温和有机溶剂等条件非常敏感,容易失活,溶液中的酶难以回收,不能重复使用,增加生产成本。反应后酶混合在产品中,影响产品质量,难以广泛应用于工业生产。关于酶的特性,如何应用于生产实践?固定化酶:以水溶性酶为物理或化学方法固定在特定介质上,不溶于水,具有酶活性的制剂。1,一般对强酸、碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感,容易失活;2、溶液中的酶难以回收,不能再利用,增加生产成本;3、反应后可混入产品,影响产品质量。(难以分离),4,酶制剂的缺点,1,固定化酶技术。将酶固定在特定空间的技术(如固定在不溶于水的载体上)。2,固定化酶技术的优点:(1)酶与反应物接触,与产物分离;(2)固定在载体上的东西不能重复使用。(b)固定化酶,酶和固定化酶直接使用的优缺点,第三,酶的固定化方法,第一,物理吸附方法:将酶吸附在固体吸附剂表面的方法,固体吸附剂大部分是活性炭,多孔玻璃等,第二,嵌入方法:将酶包裹在多孔载体上,嵌入晶格或微胶囊,第三,化学结合法:酶,物理吸附法,交联法,嵌入法,酶固定化法,共价键法,实验原理:本实验以吸附方式将a-淀粉酶固定在石英砂上,特定浓度的淀粉溶液经过固定化酶柱后,淀粉可以水解成糊状,用淀粉指示剂溶液进行试验,流出物质红色表示水解物糊精生成,这里使用的是对5-淀粉酶的a-淀粉酶,其作用最佳温度为50 。设备和用品:5ml塑料注射器50ml燃烧器自行车用阀门和夹子注射器机架管和微型离心管3个,实验材料:1,固定化a-淀粉酶:将5mga-淀粉酶从烧杯溶解到4ml蒸馏水。酶不纯,可能有不溶性。再放入5g石英砂,随时搅拌,30分钟后,一个下端附有气门,放入用夹子密封的注射器(石英砂的体积约为4ml)。用10倍体积的蒸馏水清洗这个注射器,流速为1ml/min。2,可溶性淀粉溶液:将100毫升可溶性淀粉溶解在100毫升热水中,搅拌均匀。3,5mmol/LKI-I2溶液:0.127g碘和0.83g碘化钾。将100毫升蒸馏水完全溶解后装进瓶子。未满足的玻璃淀粉酶去除,步骤:1。将注入固定酶的注射器放在注射器架上,用滴眼液滴下淀粉溶液,以0.3ml/min的流速通过热。5毫升流出后,接受0.5毫升流出液,加入12滴KI-I2溶液,观察颜色。用水稀释一倍后观察颜色。2 .实验后,用热体积的10倍的蒸馏水清洗这根柱子,放在4冰箱里,几天后再重复,看是否有相同的结果。课后练习,1 .如何证明清洗固定酶柱的流出液中没有淀粉酶?高温淀粉酶的可能用途是什么?在试管中加入1ml可溶性淀粉,添加几滴淀粉酶柱出水,保温几分钟后用碘检查。如果还是蓝色的话,流出液中没有淀粉酶。在高温下,淀粉能快速水解,酶在高温下不活动,因此可以在需要高温加热的同时,在需要水解淀粉的某些反应中使用。1,研究结果表明,用固定酶技术处理污染物质是有希望的。在大肠杆菌中获得的磷酸三酯酶固定在尼龙膜上制成的制剂,可用于分解土壤中残留的有机磷农药,与利用微生物分解相比,适宜的()a,温度b,PHC,水分D,营养,D,2,现在每天化学工厂大量生产的酶大部分是a,化学合成b,动物内c,植物内d,微生物内d,d,3。酶的固定方法中不包括()。a .将酶吸附在固体表面,b .将酶相互连接,c .将酶嵌入微电

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