维生素C的定量测定—2,6-二氯酚靛酚滴定法

维生素c的定量分析-2，6-二氯酚靛滴定法实验的目的1.学习定量维生素c的原理和方法2.掌握微滴定技术实验原理维生素c是人类营养中最重要的维生素之一，缺乏时会引起坏血病，因此也被称为抗坏血病。事实证明，它在调节物质代谢方面起着重要作用，并在近年来增强身体对肿瘤的抵抗力，阻止化学致癌物的作用。维生素c是具有l系糖成分的不饱和多羟基化合物，属于水溶性维生素。植物的蓝色部分和橘子、草莓、山楂、辣椒等很多水果种类繁多。维生素c的还原性很强，在碱性溶液中加热，有氧化剂的话，容易被氧化破坏。维生素c在中性和微酸性环境中，将染料2，6-二氯酚靛还原为无色的圆形2，6-二氯酚，同时将维生素c氧化为脱氢维生素c。氧化型2，6-二氯苯酚靛红在酸性溶液中呈红色，在中性或碱性溶液中呈蓝色。当含有维生素c的酸性溶液滴定为2，6-2氯苯酚靛红时，维生素c在未完全氧化的情况下下落的2，6-2氯苯酚靛红立即还原为无色。但是，溶液中的维生素c全部氧化后，2，6-二氯酚靛红立即溶液呈红色。因此，溶液从无色变成微红后，溶液中的维生素c准确地全部氧化，成为适宜的终点，并计算了在适当的时候从2，6-2氯苯酚溶液的消耗中检查的物质中原型维生素c的含量。化学反应式如下：仪器，试剂(a)器具：研钵、天平、容量瓶(100毫升)、量筒、吸管、锥形瓶(50毫升)、微型滴定管、漏斗(b)材料、试剂1、新鲜蔬菜或新鲜水果2，1%草酸溶液1g草酸在100毫升蒸馏水中溶解3，2%草酸溶液2g草酸在100毫升蒸馏水中溶解4、标准维生素c溶液准确地将20毫克的纯维生素c粉制成1%草酸溶液，稀释到100毫升，然后将其中10毫升稀释到100毫升，就会产生0.02毫克/毫升的维生素c溶液。使用前临时配制。5，0.02% 2，6-二氯苯酚靛蓝色溶液50mg2，6-二氯苯酚靛玉红在约200毫升含有52毫克的NaHCO3热水中溶解，冷稀释后用250毫升过滤，装进棕色瓶子，保存在冰箱里。使用时用维生素c标准溶液修正浓度。实验阶段(a) 2，6-二氯苯酚靛蓝色溶液的校准：将5ml维生素c基准液和5ml1%草酸溶液放在50ml的锥形瓶中制成的2，6-2氯苯酚溶液从微量滴定法显示为粉红色，滴定终点15s保持不褪色，此时使用的染料体积相当于0.1mg维生素c，因此ml2，6-2氯苯酚靛蓝溶液相当于维生素c的mg数。(b)要拿新鲜蔬菜或水果(代表大、中、小部分洗净，去除不食用部分，切碎、搅拌均匀)，将约10克左右的体积2%草酸溶液倒入研究碗中，将同样体积的2%草酸溶液研磨成浆状，使菌液均匀。将均质浆料放入100毫升容量的瓶子中，用1%草酸溶液帮助转移，加入30%Zn(AC)2和15%K4Fe(CN)6溶液5毫升，使其脱色，然后用1%草酸稀释，用刻度充分摇晃，停止几分钟后过滤。(扔掉最初流出的几毫升溶液)(c)将5或10毫升的玻璃瓶吸入皮液管，立即用经校准的2，6-2氯苯酚溶液滴定，直到溶液浅粉色15s不褪色为止。记录使用的染料的ml数。为了避免其他物质的干扰，滴定过程不得超过2分钟。(此步骤并行2-3次)(a)计算维生素c含量(mg/100g样例)=(VT/W)100格式：v是用于滴定样品的染料的平均ml数t相当于维生素c的mg数w滴定样品稀释液中所含样品的g数注意事项1.整个滴定过程必须迅速进行，防止原维生素c氧化。适当的工艺一般不超过2分钟。滴定中使用的染料不能小于1ml或大于4ml，如果滴定结果不在此范围内，应增加样品量或稀释提取物。2.本实验应在干扰物反应慢的酸性条件下进行；3.提取物中含有其他还原性物质，可以与2，6-二氯苯酚靛红反应，但反应速度都比维生素c慢，因此在滴定开始时迅速加入染料，然后尽可能添加一滴，继续摇晃锥形瓶，直到粉色15s不褪色为止。4.提取物中色素过多时，敌情不容易看到颜色变化，必须脱色，可使用白色粘土、30%Zn(AC)2和15%K4Fe(CN)6溶液等，本实验为30%Zn(AC)2和15%K4Fe(CN)6溶液5.在生组织和组织提取物中，维生素c还以脱氢维生素c和结合维生素c的形式存在，它们同样具有维生素c的生理作用，但不能通过还原2，6-二氯苯酚靛