翻译-多残方法测定蔬菜样品中农药含量的气相串联质谱分析

气相色谱-串联质谱法多残留法测定蔬菜样品中农药含量关键词：气相色谱农药残留多残留法蔬菜本文综述了：气相色谱-串联质谱(气相色谱-串联质谱法)检测、定量和确证30多种新鲜蔬菜中农药残留的方法。最佳的电离模式是电子碰撞(电子电离-质谱/质谱)或化学电离(化学电离-质谱-质谱技术)，用于在单一环境中操作不同类型的农药。农药残留物是用二氯甲烷从蔬菜中提取的。采用顶空进样法直接进样10ul，无需预处理，回收率可达70-119%，两次不同回收率研究中所有化合物的相对标准偏差为16.9%。该化合物的最低检测限为30纳克/千克-6微克/千克。该方法适用于温室蔬菜中常规农药的分析(西班牙阿尔梅里亚)简介：由于农药广泛应用于农作物，检测食品中的农药是一个重要问题。控制食品中的农药残留，尤其是新鲜蔬菜中的农药残留，越来越受到生产者的关注。消费者和政府都要对潜在的风险负责。许多政府和国际组织已经建立了食品中农药残留的最高限量。正确使用农药是可以理解的，因此应该定期检测食品中的农药残留。因此，有必要建立监测程序来保护消费者和评估食品质量。蔬菜中存在的干扰植物可能会掩盖用于监测农药残留的目标化合物的信号。这种分析方法更难分析蔬菜中农药的大浓度差，更难的是蔬菜基质成分与农药之间的大浓度差。气相色谱选择性检测器显示了其测定农药残留的能力，但前提是要提供清晰的结果，甚至通过质谱(质谱)定量测定农药残留，这是实验室的必要工具。然而，使用气相色谱-串联质谱(气相色谱-质谱-质谱法)来测定蔬菜中的农药残留更为普遍。它在复杂分析中可以达到高灵敏度和高选择性，并且不丧失识别功能。许多实验室已经开始以适当的价格接受离子阱串联质谱，这是由于它使用了电子冲击和化学电离，从而对大多数农药具有大的可检测带。另一方面，对于样品预处理，大多数常规分析实验室倾向于使用有机溶剂萃取法从蔬菜中提取农药，因为这些化合物具有广泛的极性，并且它们的操作简单、快速且回收率高。然而，他们通常需要一个清理步骤来减少错误。这个过程浪费时间和金钱，增加了实验的不确定性。该清洁步骤将包括潜在峰的重叠和仪器的频繁清洁。当然，使用特定技术来减少样品基质进入色谱柱和检测器，如顶空进样和选择性质谱/质谱方法，可以避免必要的清洗步骤，使该方法更适合于农药残留的常规实验室分析。本实验描述了气相色谱串联质谱法使用不同的电子碰撞(EI-MS/MS)和化学电离(CI-MS-MS)方法来检测和测定新鲜蔬菜中的30多种农药。该方法已成功应用于约8000个新鲜植物样品的检测(西班牙阿尔梅里亚)。实验试剂：农药标准品和咖啡因(内标，IS)由埃伦斯托弗博士(德国)纯化。二氯甲烷、环己烷、丙酮和甲醇(用于农药残留分析)来自Scharlau(西班牙)。现有的解决方法是将农药在丙酮中浓缩至75-550毫克/升，并储存在-30的低温环境中。目前使用的方法是用适量的环己烷稀释，并储存在-4的无水硫酸钠中分析使用。仪器：土星2000气相色谱-质谱(瓦里安美国)气相色谱仪(型号CP- 3800)配有8200自动进样器(100微升注射器)、分流温度程序注射器1079、质量注射模式和电子流量控制(EFC)系统。将一个未使用的由熔融硅制成的毛细管柱(2米0.25毫米(美国)作为备用柱连接到一个db5毫秒(30米0.25毫米内径0.25微米)的分析柱。在离子阱电极上添加硅铬合金涂层以减少化学反应。质谱仪通过串联质谱使用电子干扰和干扰模式进行选择和启用。根据我们的实验条件，专门建立了目标组分的质谱库。此外，还可以访问其他质谱库提供的地图。使用的载气是氦气。断路器(美国汉密尔顿海滩)、聚四氟乙烯树脂2100(瑞士Kinematica)和旋转蒸发器R-114(瑞士佛罗里达州比奇)用于处理蔬菜样品。样品收集和储存：新鲜蔬菜按照79/700/CEE指令进行取样和运输，然后在4下储存，24小时内用于提取和分析，以避免稳定性问题。提取过程：切碎两公斤蔬菜样品。准确称取50克放入烧杯中，用105毫升二氯甲苯萃取2分钟。加入80g无水硫酸钠。静置2分钟，然后用12厘米布氏漏斗过滤，再用滤纸和无水硫酸钠过滤。滤液收集在圆底烧瓶中。溶剂在旋转蒸发器上干燥(水在35-40下洗涤)。将干燥的物质用5 ml环己烷再溶解。取1毫升样品，放入2毫升样品瓶中，加入50微升标准溶液(20毫克/千克)。用正己烷将体积固定在2ml，以备后用仪器条件：打开进样口，用夹心进样技术将10ul样品注入气相色谱。在0.5分钟时关闭，然后在3.5分钟时再次打开。载气压力设定为8磅/平方英寸(保持26分钟)，以2磅/平方英寸/分钟从8磅/平方英寸降低到6磅/平方英寸(保持13分钟)，然后以3磅/平方英寸/分钟增加到9磅/平方英寸(保持15.1分钟)。注射器的温度设定为以100/分钟的速度从70(保持0.5分钟)升至300(保持100/分钟)。校正柱温，以50/分钟的速度从70(保持3.5分钟)升至150，然后以5/分钟的速度升至180(保持5分钟)，然后以4/分钟的速度升至205(保持5分钟)，最后以4/分钟的速度升至300(保持5分钟)。质谱仪必须每周校准一次。使用非共振波模式分析所有化合物。根据分析物设置电离模式。两种模式电压均设置为1700伏倍增器补偿，200；各种传输线的温度分别为200、50和280。自动增益控制开启。对于设置为30uA的CI模式发射电流，自动增益控制电离扫描时间为100微秒，自动增益控制目标值为2000，独立窗口5。在EI模式下，这些值分别为80uA、1500usec和5000。在酶联模式下，这些值是80剂量、1500 psec和独立窗口3。通过特定的质谱/质谱分析每种分析物。表1列出了每种样品的特定质谱。结果和讨论气相色谱串联质谱法的工具变量对气相色谱条件进行了优化，以监控各种农药。第一个标准混合物用不同的温度和气流程序进行测试。为了提高灵敏度，使用了10ul常规注射器。将有机塞插入注射部分，以减少通过分析柱和检测器的药物量。对于质谱检测器，自动增益控制通常使用目标离子填充离子阱来优化灵敏度。优化到2000的配置项模式和5000的配置项模式。更大的值是存储的目标离子信号之间的静电相互作用在每种情况下都可能发生。通常，母离子被选择为具有最高分子量的最高强度。所有化合物都是以非共振波的形式选择的(碰撞诱导解离，CID)。通过优化其他母离子的化学发光参数产生的质谱在10%和30%之间。在大多数情况下，选择定量来获得峰值，但某些成分提取(七苯磷)或一组主要离子(-硫丹)产生的峰值除外。图1是-硫丹的一系列串联质谱图。图2是黄瓜样品中所有成分的曲线图。图3是置信区间和指数模式下的甲胺磷响应值对比图。提取变量二氯甲烷萃取是一种有效而简单的方法，对大多数化合物有很好的回收率。对于蔬菜等脏样品，建议首先通过清洗步骤进行分析，尤其是使用大容量进样。这是必要的，因为存在的干扰物质可能与目标分析物一起洗脱并污染分析系统。然而，干扰问题可以通过有机分离小柱和每周更换防御柱来解决。这样，样品处理将更简单、更快速、更便宜。它可以每天做一些样品分析，这对常规分析实验室非常重要。确认方法识别目标样本保留时间窗口(RTW)定义为第二条校准线10与每种混合物的10个空白样品的标准偏差的平均保留时间(见表2)。量化目标离子仪器的校准是通过注入在三种不同浓度水平下提取的空白农药样品进行的(见表2)。通过测量相对于内标物的面积来研究农药响应值之间的线性关系。将内标与外标进行比较，并将原点(0.0)包含在线性回归曲线中，可以获得更好的定量结果。在所有情况下，基础峰值由数量决定。当R2 0.9校准曲线被认为有效时。对于所有农药，仪器响应值之间具有良好线性关系的反应浓度区间如表2所示，所有情况下的测定系数均为0.984。通过在两条不同的浓度曲线(n=10)下评估未污染黄瓜的农药回收率，研究了所提出方法的效率(见表3)。平均回收率数据和相对标准偏差(RSD%)也显示在表3中。回收率在70%到120%之间表明假设的方法是有效的。所有化合物都在有效时间间隔内。所有病例的相对标准偏差为16.9%。国际植物保护联盟建议将10个提取和取样的蔬菜空白样品的色谱信号作为鉴别和定量的方法。结果如表3所示。目标离子识别通过将样品的串联质谱与之前的参考光谱进行比较，确认之前在实际样品中鉴定的混合物。通过每天注射的空白黄瓜样品中农药浓度的第二个校准点获得并存储参考光谱。比较结果(拟合)被扩展到1000的最佳匹配(相同的光谱)。拟合值必须通过定义每个混合物的起始细节为拟合平均值-250的aFIT获得。拟合的平均值是通过将10个无污染的黄瓜样品注射到混合农药的第二条校准线上而获得的。表3列出了每种混合物的临界值。样品质量标准的常规分析为了确保常规分析结果的质量，还确定了一些质量标准。对于这一点，空白提取物，空白样品提取添加浓度的第二校准水平，校准曲线每天处理相同的样品组。空白提取避免了提取或试剂使用过程中污染可能导致的假阳性。没有信号检测应该在目标分析物的保留时间内。用空白样品校正提取程序的效率并帮助检测不当提取或仪器导致的问题。当测试样品具有确定的光谱时，可以获得分析样品的更好结果。当结果为阴性或低于第一个校准点时，样品添加回收率在60%-130%之间。校准曲线是要检查的浓度的线性工作范围，以避免矩阵效应或仪器问题导致的量化误差。表4汇总的数据为参数和标准的审批方法以及常规分析的质量标准。方法的使用近8，000种不同的新鲜蔬菜样品(绿豆、黄瓜、胡椒、番茄、茄子、西瓜、甜瓜、豌豆和骨髓)已在位于E1EJIDO(西班牙阿尔梅里亚)的农药残留实验室进行了分析。自动搜索和数据系统的识别菜单识别、量化和确认农药常规质量分析的标准。从2000年9月到2001年3月，这种方法被证明非常适用于控制几种新鲜温室蔬菜中的农药残留，即使其浓度低于欧盟和不同国家法律规定的最高残留水平(MRLS)。图4示出了实际样本的实际示例。表5分别根据蔬菜的类型和实际情况、西班牙立法和欧盟总结了所取得的成果。因为实际样品中所含农药的百分比很低，所以结果非常乐观。在农业研究领域，这可归因于农业工人对在农业中正确使用农药的认识的提高，以及过去两年中控制分析的增加。在胡椒粉中发现甲胺磷(10例)，其次是敌敌畏(8例)和氯菊酯(5例)，超过了欧盟的最大残留限量。在黄瓜中，28例西班牙MRL28检测到联苯菊酯。在茄子中，噻嗪酮(10例)和联苯菊酯(7例)超过了西班牙的MRL。结论成功研究了一种快速有效的单次进样鉴别、定量和确证方法。离子阱检测器的使用允许最佳模式的同时操作来电离每种农药。在使用气相色谱-串联质谱(气相色谱-质谱/质谱)检测30多种农药时，阿尔梅里亚(西班牙)证明了其避免大多数干扰的选择性。