痰抗酸杆菌的荧光染色法

抗酸杆菌荧光染色检测法、抗酸杆菌荧光染色检测法，主要内容为1 .原理2 .操作步骤3 .舜宇EX30荧光显微镜的操作应用4 .质量控制，抗酸杆菌荧光染色原理，抗酸杆菌为无色半透明阴电荷和微弱固有荧光的微生物，荧光色素o为含自由氨基的黄碱性染料， 由于其离子具有阳电荷，金胺o可与带阴电荷的抗酸杆菌结合使荧光色素附着，遇到紫外线或青色，抗酸杆菌荧光染色检查操作程序，(1)涂层脱脂干燥、清洁、无油污、无损伤的新玻璃板用95%乙醇擦拭， 玻璃板的消光端用铅笔在里面左端的1/3标上实验编号和编号在生物安全柜内，小心地打开标本容器，用折断的竹签(需要事先准备)选择痰标本的脓样、奶酪样部分，在玻璃板右侧的2/3均匀地涂上1020mm卵圆形痰膜，自然干燥。抗酸杆菌荧光染色检查操作程序，(二)染色1 .将痰片放在染色架上，痰片间隔大于10mm，火焰固定(5秒内火焰4次通过玻璃片下)。 滴加0.1%金胺o染液，充满痰膜，保持染色15分钟。 染色时常保持痰膜被染色液复盖，必要时可加入染色液。抗酸杆菌荧光染色检查操作步骤；(二)染色3 .流水从玻璃板上端轻轻缓冲清洗，冲洗染色液后，倾斜玻璃板沥干残水4 .滴下脱色液(3%盐酸乙醇)，脱色3分钟痰膜无色5 .流水从玻璃板上端轻轻冲洗，脱色不彻底。 重复脱色操作，抗酸杆菌荧光染色检查操作顺序，(二)染色6 .切除残水滴加0.5%高锰酸钾复染液，染色保持14分钟(根据试剂说明书和经验)。 流水从玻璃板上端轻轻冲洗，冲洗再染液，沥干残水，等待自然干燥。抗酸杆菌荧光染色检查操作顺序、(三)显微镜检查和报告使用水银光源灯和LED光源的荧光显微镜，用10目镜、20物镜观察，发现疑似抗酸菌的棒状物，用40物镜确认。 在黑暗的背景下，抗酸杆菌呈黄色绿色荧光，棒状稍弯曲。 结果报告如下：1.连续观察抗酸杆菌阴性： 50个视野，未发现抗酸杆菌。抗酸杆菌荧光染色检查操作程序，(三)镜检和报告2 .抗酸杆菌(19根):19根抗酸杆菌/50视野(报告抗酸杆菌数)。 3 .抗酸杆菌阳性(1 ):1049只抗酸杆菌/50视野。 4 .抗酸杆菌阳性(2 ):19只抗酸杆菌/每个视野。 抗酸杆菌荧光染色检查操作程序，(3)镜检和报告5 .抗酸杆菌阳性(3 ):1099只抗酸杆菌/每视野。 6 .抗酸杆菌阳性(4 ):100只抗酸杆菌/每个视野。 镜检结果应立即记录在结核菌学实验室登记本和检查报告书中。 抗酸杆菌荧光染色检测操作程序，(四)痰片存放荧光染色痰涂片后，在存放过程中抗酸杆菌荧光随时间的推移而衰减，荧光染色标本片应尽快置于遮光环境中，于4冰箱中存放，一般可存放半年。 请注意，荧光染色的痰涂膜应避光并在低温下保管。 否则，阳性标本的荧光会衰减，检查时可能会变为假阴性.舜宇EX30显微镜荧光镜操作简单程序.1.在接通电源之前，确认荧光器组的调光手柄处于关闭状态2 .外接电源变压器的输出连接器(直流6V ) 将插入LED荧光灯组的电源插座，另一端直接插入电源插座3 .慢慢顺时针打开荧光器组件的调光手柄，不需要最大化4 .将荧光滤光器的箭头切换为Flourescence标识，将舜宇EX30显微镜荧光镜的5 .荧光染色后将干燥的痰片放入载物台，目镜10与物镜20协作寻找荧光物，在暗的背景中寻找荧光镜像，发现抗酸杆菌这样的荧光物时，用40个物镜进行确认。6 .镜检结束后，逆时针方向旋转荧光器单元的调光手柄，将其置于off位置，最后关闭电源插座的开关，或拔下显微镜变压器电源端子的插头。 (镜检后标本放入标本箱，4冰箱避光保存)、葫芦丝法与荧光法主要区别：、抗酸杆菌荧光染色检测质量控制，主要包括标本收集、试剂、涂片、染色操作、显微镜维护、镜检和结果登记及痰片保存。 1、标本收集：用密封的盖箱收集痰标本，容器应注明病名、检查日期和门诊号。 标本性质：深痰液，痰性状：脓样痰，干酪样痰，血性样痰，脓性粘液痰和水样痰。抗酸杆菌荧光染色检测的质量控制，2 .试剂：染色液外观无沉淀物，无浮游物(金胺o非常稳定，一般不产生沉淀物)，贮藏环境避光，避高温，每次使用后立即盖住，打瓶试剂的使用，一般在6个月内用完或扔掉3 .涂膜：取痰脓样、干酪样部分，玻璃板右侧2/3均匀涂1020mm痰膜，自然干燥，染色前应固定。 抗酸杆菌荧光染色检测的质量控制，4 .染色：初染15 min时染液不干燥，可加染液脱色符合要求，复染操作按试剂说明书和经验控制时间，时间过长荧光亮度消失。 初染、脱色、再染水洗后，切掉玻璃板剩馀的水。 5 .显微镜维护：防尘、防潮、防震、避免阳光直射，按照操作规范使用，定期清理灰尘。 为了延长光源灯的寿命，一般不要强化光源，使用后要立即切断光源灯的开关和变压器的电源。 抗酸杆菌荧光染色检查的质量控制，6 .镜检：镜片清晰，无霉菌，视野清