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文档简介
呼吸道传染病原料介绍,www.MeridianLifeS,ISO9001Certified&GMPCompliant,传染性疾病原体病毒,如:爱滋,肝炎,风疹细菌,如:链球菌,结核杆菌真菌,如:白色念珠菌属,曲霉菌多细胞寄生虫,如:恶性疟原虫异常蛋白,如:朊病毒传染病是由如细菌,病毒,真菌或寄生虫等致病微生物而引起的疾病,它可以通过直接接触雾化的液滴或感染的皮肤,食入受污染的食物和水,性接触或通过专门的做为载体的宿主(如蚊虫)等多种不同的途径传播。总体而言,传染病导致的死亡占全球死亡人数(2010年统计为6800万)总数的四分之一到三分之一。自1973年以来有近二十余种古老的传染病,包括结核病,疟疾,霍乱,再度出现或在一定地理区域传播,它们当中更多的是由更具有毒力和耐药性的致病微生物引起。此外,自1973年以来有超过30种以上以前未知的传染病病原体已被确定并且至今尚缺乏治愈的治疗手段,其中包括艾滋病毒,埃博拉病毒,丙型肝炎病毒和立百病毒。,病毒的一般结构,1.遗传物质的核心部分单链/双链DNA或RNA2.蛋白质外壳或衣壳-保护病毒基因部分不为外环境不利因素灭活核心+衣壳=核衣壳-是很多病毒与宿主细胞的特异性受体接合的重要因素由大量的亚单位:壳粒所组成3.许多动物病毒颗粒外周有脂蛋形成的外膜,人类病毒的例子:各种肝炎病毒,爱滋病病毒,流感病毒,风疹病毒,疱疹病毒,天然抗原,各类天然抗原:是指灭活的病毒颗粒或从病毒颗粒中提取的蛋白质。迈迪安公司2000年收购的ViralAntigen具有30多年制备病毒抗原的经验。天然抗原的优点:能够保持蛋白质三维结构不变能够保持蛋白质表达及糖化修饰不变因此而产生的抗体在检测临床标本中表现出极的高特异性和灵敏度天然抗原最能体现病原体所造成的真实病理情况。,天然抗原的特点:低温运输,低温保存避免反复冻融易于凝聚,使用前充分混匀,细胞培养,原始病毒感染,观察细胞病变效应(CPE)的发生,收获经病毒感染的细胞,提取病毒抗原,A,B,CorporateConfidentialInformation,天然抗原生产流程,5,细胞系VeroHFFRhK-4P3HR1LLC-MK2HeLaCHOSf9,细胞病变效应(CPE):在宿主细胞中产生的由于病毒感染造成的结构变化。CPE发生的原因:由病毒感染造成细胞溶解(变性)以及宿主细胞死亡而没有产生细胞裂解,但没有细胞再生。,提取病毒抗原Toxo,EBV,CMV,etc.,盐/缓冲液提纯,离子交换和/或亲和柱层析纯化,收集纯化抗原,病毒灭活,根据内部参考值调整抗原效价,质控检验/最终产品,CorporateConfidentialInformation,天然抗原纯化工艺-A,6,提取病毒抗原Rotavirus,Mumps,Rubella,HAV,etc.,通过超声,冻融,低渗缓冲液等方法裂解感染细胞,超速离心,细胞碎片及病毒悬浮液,病毒灭活,根据内部参考值调整抗原效价,质控检验/最终产品,收集纯化抗原,CorporateConfidentialInformation,天然抗原纯化工艺-B,7,重组蛋白(抗原),重组蛋白是指从细胞培养重组DNA所表达出来的蛋白质。迈迪安公司具备通过大肠杆菌,酵母菌,昆虫细胞或哺乳动物细胞表达以克为计的开发和纯化重组蛋白质商业化生产规模的专业知识和丰富经验。,重组蛋白(抗原)制备过程举例,迈迪安公司所能提供的天然和重组抗原举例,天然抗原,CMV,CMVM,CMVext2,CMVgradeII,CMVgradeIIIEBV,EBVgp125HAVHSV-1/HSV-2RubellaGradeI,III,IVToxoplasmaVaricellaMumpsMeasles(Rubeola)RSVRotavirus,重组抗原,HepatitisBCoreHepatitisCNP(p22)HIV-gp41HIV-p24HIV-2gp36HSV-1gGHSV-2gGHSV1-gDHSV2-gDRubeola,迈迪安公司同时还为临床前试验和免疫研究提供活病毒。除此之外,迈迪安公司还提供包括制造病毒疫苗,攻击病毒的材料,病毒样颗粒(VLP),重组蛋白,常见呼吸道传染病腺病毒呼吸道合胞病毒流感病毒A,B(H1N1,H3N2,H5N1,NS1)副流感病毒(1,2,3)结核杆菌肺炎支原体肺炎衣原体链球菌嗜肺军团菌葡萄球菌SARS冠状病毒,呼吸道容易发生感染,是因为它在物理环境下直接接触,并暴露于空气中的微生物。下呼吸道感染是全球发病和死亡的一个主要原因。,呼吸道传染病,临床上常见很多微生物可造成呼吸道感染,包括病毒,细菌,真菌和寄生虫,等众多的病原体。准确的鉴定致病微生物可以有效地治疗感染和控制其蔓延,因为每中微生物的治疗手段不同。比如抗生素对于细菌感染是特效,而对于病毒则无效。,现代发展起来的呼吸道感染诊断方法的诊断技术包括两类:即对于病毒抗原通过酶联免疫法(EIA)测定和核酸扩增测定法如聚合酶链反应(PCR)测定。常用的酶联免疫法包括免疫荧光(IFA)检测,酶联免疫吸附和横向免疫层析。然而,细胞培养,核酸扩增技术和免疫荧光技术都需要专门的实验室人员和专用的设备。在最佳的情况下,核酸扩增和免疫荧光检测结果大约2个小时可以得到,但这些诊断手段往往不能在现场提供即时诊断,从而导致诊断结果判断的进一步的延迟而患者不能得到有效的及时的治疗。与此相反,酶联免疫吸附和横向免疫层析受实验室条件及实验室人员的限制较小,并且可以提供快速的诊断结果。在现代诊断医学中原有的微生物物种的鉴别以及菌株之间交叉反应等难题已经得到很好的解决。对于微生物的独特免疫区的深入了解导致开发出了特异性和敏感性更高的抗原和抗体从而显著改善了更加特异和敏感的诊断试剂。,流感病毒,引起人类感染的流感病毒主要有三型(A,B和C型)。这三型可进一步分为为亚型和毒株株。每年出现的新的流感毒株是由于流感病毒的缓慢变异(称为抗原漂移,即小规模的基因变化)或快速变异或称抗原基因重配。抗原漂移造成每年的季节性流行而抗原基因重配则可造成产生新的毒株并引起暴发流行。甲型流感病毒是最常见的流感病毒,它可以感染人类,动物和鸟类。根据它们的表面糖蛋白即血凝素和神经氨酸酶的性质它分为不同的亚型。共有有18种不同的血凝素和11神经氨酸酶,它们有确切的血清学区别(即一个病毒亚型的抗体不识别其它的亚型)。流感诊断测试帮助鉴别流感病毒分型A和B以及A型流感病毒亚型2009年H1N1,H1,H3,H5,N1和N2。流感测试包括流感快速诊断测试(RIDTs),直接荧光抗体染色,病毒培养,和分子生物学方法。,流感的诊断取决于病毒流行的季节性,猪和禽流感毒株。传统的三价灭活流感疫苗包括人类A型流感病毒H1亚型和H3亚型,以及B型流感病毒。存在于鸟类和猪的潜在的暴发流行的毒株包括H5和H7型禽流感病毒。以下表中的抗体对于特定毒株的反应性已经被免疫沉淀或其他等效方法测试过,表中的百分比越高表示抗体的反应性越强。,腺病毒,腺病毒是DNA病毒家族中的一员,是造成儿童发热性疾病的一个重要原因。最常伴有咽炎等上呼吸道症状,但也可能导致肺炎和一些胃肠道、眼科、泌尿、神经系统传染病。大多数属于自限性疾病,但对于免疫功能低下的患者或少数健康的儿童和成人中也会造成致命感染。哺乳动物的腺病毒其特异性抗原表位(在六邻体的内部)是相同的,它们是参与宿主的免疫应答的主要抗原。大多数商用腺病毒EIA检测为直接检测该组特定的六邻体抗原,它们能够从鼻咽分泌物或粪便标本识别大部分的腺病毒血清型。,非典型肺炎-支原体,衣原体和军团菌,支原体肺炎是一种由肺炎支原体引起的呼吸道感染病。美国每年有近200万人因患支原体肺炎而接受治疗。支原体肺炎很容易传通过接触呼吸道液体进行传播,并且经常导致在人群中流行。肺炎支原体(肺支),肺炎衣原体(肺衣)和引起。这些细菌可引起爆发流行,并导致易感人群如儿童和老年人的严重并发症。,嗜肺军团菌一直被认为是引起肺炎的最常见原因之一。他们存活在淡水环境中,会引起人类呼吸道疾病(军团病)。军团病的症状包括了亚临床无症状感染到严重致命的肺炎。,军团菌属目前拥有50多个物种区分为70个不同的血清型。其中的一个物种,嗜肺军团菌是引起军团病的主要原因(占90%),而这其中70-80%的病例是由于感染I型血清型造成的。军团病可以从吸入含有军团菌或摄入军团菌污染的水中获得。人际传播不被认为具有风险。感染军团病的可能性取决于水源的污染程度,接触病原体的人的易感性,以及病原体接触的强度。,用EIA方法测定抗体是最常用的诊断肺炎衣原体感染的方法,lgA抗体被认为是初次感染及慢性和复发性感染的一个可靠的免疫学指标,与lgM抗体联合检测效果更好。,肺炎衣原体是一种常见的细菌,它是世界上引起肺炎的主要原因。大约50%的成年人在20岁之前会感染肺炎衣原体,并且在今后会重复感染。许多研究表明,肺炎衣原体的感染和其他炎
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