药物分析第十二章 喹啉与青蒿素类抗疟药物的分析ppt课件

.,复习：吩噻嗪类药物的分析,基本结构,基本性质,鉴别,硫氮杂蒽母核10-碱性侧链2-卤素,碱性;易氧化;与金属离子络合；紫外吸收,生物碱沉淀剂氧化与鈀离子络合卤素取代基氯化物,含量测定,酸碱滴定法UV鈀离子比色法HPLC,.,第十二章喹啉与青蒿素类抗疟药物的分析,.,第一节喹啉类药物的分析,一、基本结构与主要化学性质1.结构：本类药物均有吡啶与苯稠合而成的喹啉杂环,硫酸奎宁,喹啉环,奎宁环喹核碱,难溶于水,2,.,二盐酸奎宁易溶于水,.,硫酸奎宁,硫酸奎尼丁,奎宁和奎尼丁的分子式相同，但立体结构不同，因此旋光性、碱性、溶解度也不同。,.,磷酸哌喹,磷酸氯喹,.,2.主要化学性质（1）碱性奎宁碱性：脂环氮(pKa8.8)喹啉环系芳香氮(pKa4.2，不能与硫酸成盐)（2）旋光性硫酸奎宁（左旋体）硫酸奎尼丁（右旋体）二盐酸奎宁（左旋体）,.,（3）紫外吸收光谱喹啉环（4）荧光特性硫酸奎宁和二盐酸奎宁在稀硫酸中显蓝色荧光,.,二、鉴别试验（一）绿奎宁反应奎宁为6位含氧喹啉衍生物，可以发生绿奎宁反应。6含氧喹啉氯水氨水二醌基亚胺的铵盐ChP采用此法鉴别硫酸奎宁和二盐酸奎宁,（溴水）,.,二醌亚胺盐,绿/翠绿色产物,CH3O,.,（二）光谱特征1.紫外吸收光谱磷酸氯喹盐酸溶液（0.01mol/L）max：222nm、257nm、329nm、343nm2.荧光光谱特征硫酸奎宁和二盐酸奎宁在稀硫酸中显蓝色荧光,3.红外吸收光谱特征,.,（三）无机酸盐SO42-+Ba2-BaSO4Cl-+Ag-AgCl,硫酸奎宁,.,三、有关物质检查（一）硫酸奎宁中有关物质检查1.酸度控制药物中的酸性杂质用pH计测定,pH为5.76.6。2.氯仿乙醇中的不溶物控制药物在制备过程中引入的醇中不溶性杂质或无机盐类3.其他金鸡钠碱控制其他的生物碱TLC（ChP）：主成分自身对照法HPLC（BP）：峰面积归一化法,.,（二）磷酸咯萘啶中有关物质的检查1.酸度2.水中不溶物3.氯化物：生产工艺带入4.甲醛5.四氢吡咯,.,四、含量测定,（一）硫酸奎宁非水滴定法测定硫酸奎宁的含量（ChP、USP）HPLC测定硫酸奎宁片的含量（USP）,.,a.硫酸奎宁奎宁为二元碱，其中喹核氮的碱性较强，可与硫酸生成盐；而喹啉环的碱性极弱，不能与硫酸成盐，而保持游离状态。硫酸是二元酸，但在非水介质中，只显示一元酸解离为HSO4-，即只供给一个H+，所以硫酸盐类药物在冰醋酸中，只能滴定至硫酸氢盐，因此可以用高氯酸滴定液直接滴定。,反应的摩尔比？,.,SO42-,H+,H+,H+,H+,HSO4-,H+,H+,H+,H+,ClO4-,ClO4-,ClO4-,+3HClO4,.,牢记：lmol的硫酸奎宁消耗3mol的高氯酸,(C20H24N2O2H+)2SO4+3HClO4(C20H24N2O22H+)2ClO4-+(C20H24N2O22H+)HSO4-ClO4-,ChP和USP都采用此法测定硫酸奎宁的含量。,.,b.硫酸奎宁片,硫酸奎宁片剂碱化处理，生成奎宁游离碱，然后再用高氯酸标准溶液直接滴定。,.,ClO4-,ClO4-,ClO4-,ClO4-,H+,H+,H+,H+,2分子游离奎宁,.,1mol硫酸奎宁生成2mol奎宁1mol奎宁消耗2mol高氯酸1mol的硫酸奎宁消耗4mol的高氯酸,片剂分析的滴定度与原料药分析的滴定度不同。,.,五、体内药物分析-自学HPLC法测定人体血液中的氯喹P322,.,重点内容,基本结构,基本性质,鉴别,喹啉环碱性侧链,碱性;荧光特性旋光性；共轭,绿奎宁反应紫外荧光无机酸盐,含量测定,酸碱滴定1:31:4,.,第二节青蒿素类药物的分析,2011年9月，中国女药学家屠呦呦因创制新型抗疟药-青蒿素和双氢青蒿素的贡献，获得被誉为诺贝尔奖“风向标”的拉斯克奖。这是中国生物医学界迄今为止获得的世界级最高级大奖。,.,含过氧基团的新型倍半萜内酯,一、结构与理化性质1.结构,青蒿素,双氢青蒿素,.,青蒿琥酯,蒿甲醚,.,2.化学性质（1）氧化性（2）旋光性（3）水解性（4）UV：末端吸收,青蒿素,.,二、鉴别试验（一）呈色反应1.过氧桥的氧化反应（KI-淀粉）2.羟肟酸铁反应-内酯3.香草醛-硫酸反应：萜类,（1)取本品约5mg,加无水乙醇0.5ml溶解后,加碘化钾试液0.4ml，稀硫酸2.5ml与淀粉指示液4滴，立即显紫色。(2)取本品约5mg,加无水乙醇0.5ml溶解后，加盐酸羟胺试液0.5ml与氢氧化钠试液0.25ml,置水浴中微沸，放冷后，加盐酸2滴和三氯化铁试液1滴，立即显深紫红色。取本品约50mg，加三氯甲烷lml使溶解，取34滴置白瓷板上，待三氯甲烷挥发后，加2%香草醛硫酸溶液1滴，显红色。,青蒿素,青蒿琥酯,.,（二）光谱法IR（三）色谱法TLCHPLC：210nm,.,三、杂质检查青蒿素有关物质检查（TLC，ChP2010）,取出，晾干，喷以含2%香草醛的20%硫酸乙醇溶液，在85加热1020分钟至斑点清晰，要求：对照品溶液应显青蒿素与双氢青蒿素各自的清晰斑点。供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液（1）主斑点比较，不得更深；与对照溶液（2）的主斑点比较，深于对照溶液（2）主斑点的斑点不得多于1个。,.,四、含量测定,双氢青蒿素片的含量测定分解后的UV法测定法精密量取对照品溶液与供试品溶液各1ml，分别置10ml量瓶中，各精密加入乙醇1ml，摇匀，加2%氢氧化钠溶液至刻度，摇匀，置60恒温水浴中反应30分钟，取出冷至室温，以2%氢氧化钠溶液-乙醇（4:1）为空白，照分光光度法（附录A），在238nm的波长处分别测定吸收度，计算，即得。,.,分解后的紫外吸收图谱,.,HPLC法测定青蒿琥酯的含量,用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾1.36g，加水1000ml使溶解，用磷酸调pH值至3.0（42:58)为流动相；柱温30；检测波长为210nm。取双氢青蒿素对照品4mg，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，作为双氢青蒿素对照品溶液；另取本品40mg，置10ml量瓶中，加双氢青蒿素对照品溶液lml,加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，取401注人液相色谱仪，双氢青蒿素呈现两个色谱峰，青蒿琥酯峰与相邻的双氢青蒿素峰的分离度应符合要求。测定法取本品约25mg,精密称定，置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取201，注人液相色谱仪，记录色谱图。另取青蒿琥酯对照品同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。,.,重点内容,基本结构,基本性质,鉴别,倍半萜过氧桥内酯,氧化性;易水解旋光性；无共轭,碘化钾-淀粉羟肟酸铁反应香草醛-硫酸,含量测定,水解后UV法HPLC,.,习题,用溶剂提取后非水溶液滴定法测定硫酸奎宁片的含量时，Imol的硫酸奎宁可消耗高氯酸的摩尔数是A.l/2molB.1molC.2molD.3molE.4mol答案：E,.,非水溶液滴定法测定硫酸奎宁原料药的含量时，Imol的硫酸奎宁可消耗高氯酸的摩尔数是A.1/2molB.1molC.2molD.3molE.4mol答案：D,.,具有绿奎宁反应的药物是A硫酸奎宁B盐酸吗啡C磷酸可待因D盐酸麻黄碱E硫酸阿托品答案：A,.,青蒿素采用的鉴别方法是A碘化钾试液淀粉反应B硫酸乙醇反应CUVD茚三酮反应E以上均不是,能在稀硫酸溶液中显蓝色荧光的喹啉类的药物有A硫酸奎宁B磷酸氯喹C磷酸哌喹D磷酸咯萘啶E二盐酸奎宁答