微生物农药第二节

第二节,微生物杀虫剂,杀虫微生物的类群,昆虫病原真菌类,1,昆虫病原细菌类,2,昆虫病原病毒类,3,一、杀虫真菌,在昆虫病原微生物中，真菌种类占到60%以上。据估计，世界上以记载的昆虫病原真菌约100属800余种，其中20余种被用于生物防治。,YourName/Co.Here?,藻状菌纲的虫霉目,半知菌纲中的丛梗孢目,白僵菌,绿僵菌,青霉,拟青霉,杀虫真菌的种类,代表性的杀虫真菌白僵菌,半知菌纲,丛梗孢目,丛梗孢科,白僵菌属,分类地位,被白僵菌侵染的昆虫虫体上长出白色菌丝体并变硬，在表面长出孢子层，因此称为白僵病或硬化病。,鞘翅目,鳞翅目,膜翅目,同翅目,直翅目,被侵染的昆虫：,YourName/Co.Here?,目前用于杀虫的白僵菌,卵孢白僵菌,球孢白僵菌,球孢白僵菌能侵染鞘翅目、鳞翅目、同翅目和直翅目以及螨类；,卵孢白僵菌主要侵染地下害虫的幼虫，如金龟子幼虫。,被白僵菌感染的家蚕,被白僵菌寄生僵死的剌蛾幼虫,感染虫体的病理过程,穿透寄主体壁进入血腔大量繁殖,孢子萌出芽管分泌酶,孢子侵入虫体,昆虫死亡,寄主细胞被破坏,白僵菌制剂的生产,固态发酵,液相发酵,白僵菌制剂的液体发酵生产是从原始菌种开始，经逐级扩大培养，最终进行液体深层发酵，含孢量及其他指标达到一定要求进行干燥及其他处理后，在包装或制成各种制剂。,液体发酵的产物是芽生孢子，芽生孢子生活力低下，不耐贮藏，难以应用于实际。通过改变培养基的配方，添加微量元素，选育合适菌株等手段进行深层发酵生产分生孢子。,固体发酵,调控温湿度发酵法,尼龙高压灭菌袋培养,窗纱式营养膜机械化生产,浅盘塑料袋0,液固双相发酵,即首先经几级液态发酵制得大量白僵菌芽生孢子或菌丝体，再接种于固态料上进行固态发酵，以获得分生孢子。然后经旋风分离收集纯孢粉，含孢量可达110111.21011个g该工艺生产周期短，培养后期的杂菌污染小，并降低了生产成本，但发酵后期仍为半敞开式培养。,液固双相发酵的工艺流程1.原始菌种。2.斜面3.液体菌体4.种子罐种子5.发酵6.干燥及包装7仓储和运输,二、杀虫细菌,芽孢杆菌属,肠杆菌属,假单孢杆菌属,(一)芽孢杆菌类群,金龟子芽孢杆菌,缓死芽孢杆菌,苏云金芽孢杆菌,球形芽孢杆菌,专性寄生,兼性寄生,(二)代表性杀虫细菌苏云金芽孢杆菌,苏云金芽孢杆菌特点:,G+,短杆状,周生鞭毛,芽孢和伴胞晶体,按杀虫范围分为以下几种致病型：专一鳞翅目如：柏林纳亚种专一双翅目如：以色列亚种专一鞘翅目如:拟步行甲亚种对鳞翅目和双翅目在昆虫中尚无毒性,(1)内毒素,苏云金芽孢杆菌的杀虫机理,内毒素是所有苏云金芽孢杆菌品系所共有的毒素，是由伴孢晶体产生原毒素分子。,最终导致昆虫停止进食而死亡。,昆虫摄入苏云金芽孢杆菌,伴孢晶体在昆虫的碱性肠液中溶解,原毒素被肠道蛋白酶降解、激活,成熟的毒素结合到肠道上皮细胞质膜的特殊受体上,插入膜中形成小孔,细胞膜透性增大，导致肠道细胞肿大，裂解,外毒素的毒效只发生在幼虫蜕皮或变态时期，造成幼虫畸形或不能正常蛹化。其作用机制不明确，可能是干扰了同发育有关的某些激素的合成。,（2）外毒素,外毒素是苏云金芽孢杆菌中的几个变种在营养体生长的旺盛期产生的一种低分子量，高热稳定性的胞外毒素。,苏云金芽孢杆菌菌剂的生产,液剂,粉剂,可湿性粉剂,使用方法,喷雾,喷粉,剂型,生产工艺流程,菌种,茄形瓶活化,种子罐培养,发酵罐培养,浓缩,干燥,质检,30培养72h,接种量1,菌种选育毒力高发酵性能好的优良菌种，冷冻干燥或沙土管保存，使用前将保存的菌种接种到茄形瓶，30，培养72h。经检验无杂菌、菌苔丰满、表面灰白色、无噬菌斑、90%以上芽孢囊破碎，放入冰箱保存一周后即可使用。加无菌水制成菌悬液，水浴75处理15min,即可接种。,营养物质的选择能被菌体很好的利用价格便宜来源广泛营养物质：黄豆饼粉、棉籽饼粉和玉米浆将配置好的培养基进行灭菌，灭菌前注意将pH值调至7.48.0，灭菌后达到7.0。,培养条件温度苏云金芽孢杆菌的培养温度为30，在不同温度下培养所得的产物的毒性有很大差异，因此温度应严格控制。通气量在菌体指数生长期和芽孢生成期要保持足够的通气量，通气量不宜过大，否则芽孢生成数反而降低。另外，在发酵前期加大通气量效果比后期加大通气量更好。pH一般情况下，pH7.0时有利于苏云金芽孢杆菌的生长，但发酵过程中，乙酸会导致pH的下降，应引起注意。,浓缩和干燥发酵液离心后的糊状物质调整pH到3.54.5，加入金属盐和含油物以形成稳定的苏云金芽孢杆菌制剂，经喷雾干燥制备粉剂。,发酵在种子罐和发酵罐发酵过程中，根据罐的体积来确定投料量和接种量。温度、罐压、通气量、搅拌速率、培养时间等都要由反复的试验来确定。,菌种自身因素苏云金芽孢杆菌的不同亚种，甚至同一亚种不同菌株对害虫的毒性存在很大差异。剂型不同的苏云金芽孢杆菌制剂的剂型对不同种类的害虫的毒效也存在很大差异。,影响苏云金芽孢杆菌致病力的因素,目标昆虫的特性不同昆虫和同一昆虫的不同虫期，甚至同种昆虫的不同种群对苏云金芽孢杆菌制剂的敏感性也不同。环境因素日光直射、温度、湿度和降水等都对苏云金芽孢杆菌的致病力产生影响。（p66）,1960年，在美国注册为商品，应用于食物和饲料作物。