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文档简介
高中生物实验综述实验1观察了细胞中的脱氧核糖核酸和核糖核酸的分布1.实验原理:用甲基绿和吡罗昔康的混合染料对细胞进行染色,可以显示细胞中的脱氧核糖核酸和核糖核酸的分布。甲基绿和吡罗昔康对脱氧核糖核酸和核糖核酸有不同的亲和力:甲基绿脱氧核糖核酸绿色皮尔洛红色核糖核酸红色2.分布:真核生物的DNA主要分布在细胞核中;线粒体和叶绿体也含有少量的脱氧核糖核酸;核糖核酸主要分布在细胞质中。3.结果表明,细胞的细胞核为绿色,细胞质为红色。4.实验结论:DNA主要分布在细胞核中;核糖核酸主要分布在细胞质中。5.实验过程:(1)取口腔上皮细胞切片:在载玻片上滴一滴0.9%氯化钠溶液;(2)漱口后,用消毒牙签刮去口腔内壁,放入载玻片的液滴中数次。(3)将载玻片在酒精灯上烘干,并盖上载玻片;(2)水解:将载玻片放入装有质量分数为8%的30毫升盐酸的小烧杯中;(2)向烧杯中加入30的温水;(3)将小烧杯放入大烧杯中,保温5分钟;(3)清洗涂片:用缓慢流动的蒸馏水清洗载玻片10秒;(4)染色:1)用吸水纸从载玻片上吸水;(2)滴加两滴混合染液,染色5分钟;(3)吸收多余的染液,盖上盖玻片;(5)观察:先低后高;6.几种液体在实验中的作用:(1)0.9%氯化钠溶液:保持口腔上皮的正常形态。8%盐酸:改变细胞膜的通透性等。(2)染色质中的DNA与蛋白质分离。蒸馏水:配制染液;冲洗载玻片。(2)现在需要配制和使用混合染液;(3)本实验不应使用深色材料,以免颜色对实验造成干扰。实验2,材料识别一、实验原理:还原糖荧光素试剂砖红色沉淀(水浴加热)脂肪族苏丹橙色(点滴观察或切片显微镜观察)脂肪族苏丹四号红色蛋白质缩二脲试剂紫色反应(不加热)1.还原糖的检测(1)选材:还原糖含量高,白色或近白色,如苹果、梨、白萝卜。(2)试剂:目前使用的荧光素试剂(液体A:0.1克/毫升氢氧化钠溶液,液体B:0.05克/毫升硫酸铜溶液)。(3)步骤:试管内取样溶液2mL加入新制备的斐林试剂1mL(斐林试剂甲、乙混合均匀后加入)水浴加热约2分钟观察颜色变化(白色浅蓝色砖红色)操作方法问题注释解释1.准备组织样本溶液。(去皮、切块、研磨和过滤)苹果或梨的组织液必须暂时准备好。由于苹果中多酚氧化酶的含量很高,组织液很容易被氧化成褐色,从而掩盖了产生的颜色。2.取一个试管,将2mL组织样本溶液注入试管。3.将1毫升新制备的荧光素试剂注入试管并振荡。组成菲林试剂的甲液和乙液应分开制备和储存,甲液和乙液应在使用前均匀混合形成菲林试剂。不要在苹果组织样品溶液中加入液体A和液体B进行检测。菲林试剂非常不稳定。当液体A和液体B混合储存时,生成的氢氧化铜在70 90分解成黑色氧化铜和水;当液体A和液体B分别加入时,它们可以与组织状液体反应,并且不产生羟基氧化铜。4.将试管放入装有50-650温水的大烧杯中,加热约2分钟,观察溶液的颜色:浅蓝色棕色砖红色(沉淀)最好用试管夹夹住试管的上部,这样试管的底部就不会碰到烧杯的底部,试管口也不会朝向实验者。试管也可以直接用酒精灯加热。防止试管中的溶液冲出试管并造成烫伤;缩短实验时间。模拟尿糖的检测1.取样:正常人尿液和糖尿病患者尿液2.检测方法:斐林试剂(水浴加热)或班克罗夫特试剂或尿糖试纸3.结果:糖尿病患者尿液中出现砖红色沉淀,而正常尿液中没有。4.分析:糖尿病患者尿液中含有还原糖,与菲林试剂反应生成砖红色沉淀,而正常人尿液中不含还原糖,因此无反应。2、脂肪检测(1)材料选择:脂肪含量越高,组织越好,如花生子叶。(2)步骤:切片(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片的中心染色(在切片上滴2-3滴苏丹红染料溶液2-3分钟后吸去染料溶液用50%体积的酒精洗去浮色吸去多余的酒精)制作一个包装(在材料切片上滴1 2滴清水盖上盖玻片)显微镜检查(光的显微镜观察显微镜观察橙色脂肪颗粒的显微镜观察)操作方法问题注释解释花生种子被浸泡、去皮,一些子叶切片被切掉。切片放在载玻片上的水滴中,切片中的水用吸水纸吸走。干种子需要浸泡3-4小时,可以缩短新花生的浸泡时间。因为浸泡时间短,不容易切片。浸泡时间过长,组织柔软,切片不易成型。切片应该尽可能薄,以便于观察。将2-3滴苏丹红或苏丹红染液滴在子叶片上,染色1分钟。染色时间不应太长。用吸水纸吸收纸张周围的染料溶液,用50%的酒精洗去浮色并吸收酒精。酒精被用来洗掉浮色,但不是浮色,浮色会影响橙色脂肪滴的观察。同时,酒精是一种脂溶性溶剂,可以将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。用吸水纸吸收纸张周围的酒精,滴12滴蒸馏水,并盖上盖玻片。当盖玻片被盖住时,滴入干净的水可以防止产生气泡。低倍镜下可见花生子叶片最薄的部分,细胞内可见染成橙色或红色的圆形小颗粒。这部电影不应该放太久。随着时间的推移,油滴会溶解在乙醇中。3、蛋白质检测(1)试剂:缩二脲试剂(液体A:0.1克/毫升氢氧化钠溶液,液体B:0.01克/毫升硫酸铜溶液)(2)步骤:向试管中加入2毫升样品溶液加入1毫升缩二脲试剂A,摇匀加入4滴缩二脲试剂B,摇匀观察操作方法问题注释解释准备组织样本溶液。(浸泡、去皮、研磨和过滤。)大豆浸泡1到2天,然后很容易磨成浆。也可以购买新鲜豆浆,以节省实验时间。身份。向试管中加入约2ml样品溶液,加入缩二脲试剂a,摇匀;加入34滴缩二脲试剂B溶液,摇匀,溶液变成紫色。液体A和液体B也应分开制备和储存。在鉴定过程中,液体a加在液体b之前。硫酸铜溶液不能再添加了。首先加入氢氧化钠溶液,为Cu2与蛋白质反应提供碱性环境。混合装载或同时添加液体A和液体B将导致Cu2变成Cu2(羟基)2沉淀并失效。否则,硫酸铜的蓝色将覆盖反应的真实颜色。蛋清可以代替豆浆。蛋清应该先稀释。如果稀释不够,在实验中蛋清会粘在试管壁上,与缩二脲试剂反应后会粘在试管内壁上,使反应不容易彻底,试管也不容易清洗。附录:淀粉的检测和观察从试管中取出2ml待测组织样品溶液,向试管中加入2滴碘溶液,观察颜色变化。不要滴太多碘溶液。为了不影响颜色观察4.测试站点提示:(1)什么是常见的还原糖和非还原糖?葡萄糖、果糖和麦芽糖是还原糖。淀粉、蔗糖和纤维素都是非还原性的(2)获得还原糖植物组织的条件?含糖量高,呈白色或近白色,如苹果、梨、白菜叶、白萝卜等。(3)为什么研磨时要加入石英砂?不添加石英砂对实验有什么影响?为了使研磨更加彻底。不添加石英砂会降低组织样品溶液中的还原糖,使溶液在鉴定过程中颜色变化不明显。(4)如何使用荧光素试剂甲和乙?混合的目的是什么?你为什么要用斐林试剂A和斐林试剂B直接反应生成酒石酸络合铜离子,酒石酸络合铜离子和可溶性还原糖在加热条件下反应生成砖红色沉淀。由于酒石酸具有一定的还原性,荧光素试剂A和荧光素试剂B会自发缓慢地生成氧化亚铜沉淀,氧化亚铜为砖红色沉淀,给实验带来误解。因此,斐林试剂目前普遍可用。(5)在还原糖中加入菲林试剂后,溶液的颜色变化顺序为:浅蓝棕砖红(6)为什么花生仁切片要薄?只有非常薄的切片才能透光,并用于显微镜观察。(7)当旋转精细准焦螺旋时,如果花生片中的一些细胞总是清晰的,而另一部分是模糊的,一般的原因是什么?切片不均匀。(8)乙醇在脂肪鉴定中的作用?洗掉浮色。(9)缩二脲试剂A和B在使用前是否混合?先加入液体的目的。如何通过对比看到颜色的变化?不能混合;首先加入液体A的目的是使溶液呈碱性;首先留出一些大豆组织样本液体用于比较。实验3观察到叶绿体和细胞质流动1.材料:新鲜苔藓叶、黑藻类叶或菠菜叶,口腔上皮细胞的临时负载2.原理:当在显微镜下观察时,叶绿体是绿色、球形或椭圆形的。用janus绿染料溶液染色的口腔上皮细胞中的线粒体变成蓝绿色,细胞质几乎无色。知识总结:通过取材和制作薄膜进行低功率观察和高功率观察测试站点提示:(1)为什么苔藓的小叶可以直接用来代替菠菜的叶子?因为苔藓有非常薄的小叶,只有一层细胞,而菠菜的叶子有许多层细胞。(2)在采集菠菜叶的下表皮时,为什么要采集叶肉?除保卫细胞外,表皮细胞通常不含叶绿体,而叶肉细胞含有更多的叶绿体。(3)如何加快黑藻细胞质的流动?最佳温度是多少?照明,提高水温,切一些叶子;大约25。(4)黑藻细胞哪一部分的细胞质流动最明显?静脉附近的细胞。(5)如果视野中细胞内细胞质的流动方向是顺时针方向,载玻片中细胞内细胞质的实际流动方向是什么?还是顺时针方向。(6)普通细胞的细胞质不流动,只有黑藻等少数植物的细胞质流动吗?不,活细胞的细胞质是液体。(7)如果观察到植物根毛细胞的胞质流动,应如何调节显微镜视野的亮度?视野应该适当变暗,反射镜的平面镜可以用来照亮或缩小光圈。(8)强光下叶绿体的光方向有什么变化?叶绿体有一个小的受光区域,一侧面向光源。实验4:观察有丝分裂1.材料:洋葱根尖(洋葱、大蒜)2.步骤:(1)洋葱根尖的培养(2)包装件的生产3.实验原理:(1)龙胆紫溶液能使染色体变黑(2)有丝分裂不同阶段细胞染色体的形态和行为变化不同。根据不同时期染色体的变化,可以用高倍显微镜对该时期的细胞进行鉴定。生产工艺:解离、漂洗、染色、压片1.分离质量分数为15%的:药液:盐酸和体积分数为95%的乙醇(1 : 1混合溶液)。时间: 3 5分钟。目的:分离细胞。2.用清水冲洗:约10分钟。目的:洗去药液,防止过度解离,便于染色。3.用质量浓度为0.01克/毫升或0.02克/毫升的龙胆紫溶液(或醋酸品红溶液)对:染色3-5分钟目的对:号染色体进行染色观察。4.载玻片:将根尖放在载玻片上,加入一滴清水,用镊子压碎根尖,盖上盖玻片,在盖玻片上加入另一片载玻片,然后用拇指轻轻按压载玻片。目的分散细胞,便于观察。过程平方法时间间隔目的分离从上午10点到下午2点,洋葱根尖被切成2-3毫米,立即放入装有盐酸和酒精混合溶液(1: 1)的玻璃盘中,并在温室下解离。3-5分钟组织中的细胞通过液体药物相互分离。冲洗根尖变软后,用镊子把它取出,放在装满清水的玻璃盘中冲洗。大约10分钟洗掉药液,防止过度分解。染色将根尖放入装有质量浓度为0.01克/毫升或0.02克/毫升的龙胆紫溶液(或醋酸品红溶液)的玻璃皿中进行染色。3-5分钟染料可以给染色体着色。生产者用镊子取出根尖,放在载玻片上,加入一滴清水,用镊子捏碎根尖,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片。然后,用拇指轻轻按压幻灯片。细胞被分散以方便观察。(3)观察1.首先,在低倍显微镜下发现顶端分生组织的细胞:细胞呈方形,排列紧密,部分细胞正在分裂。(矩形:细长区域)2.高倍镜下观察:中期分裂前、分裂后和分裂末间期。(注意不同阶段细胞的染色体形态和分布特征)。其中,间期细胞数量最多。测试站点提示:(1)为什么在培养根尖时需要经常换水?增加水中的氧气,以防止由厌氧呼吸引起的根腐病。(2)种植根尖时,应该选择老洋葱还是新洋葱?为什么?应该选择老洋葱,因为新洋葱仍处于休眠状态,不易生根。(3)为什么每个根只能使用根尖?什么时候是生根的最佳时机?为什么?因为顶端分生组织中的细胞可以经历有丝分裂;上午10时至下午2时;因为此时细胞分裂是活跃的。(4)解离和压片的目的分别是什么?为什么在压片过程中要添加另一张载玻片?解离是将细胞彼此分离,压片是将细胞彼此分离。增加了一个额外的载玻片,以确保均匀的应力并防止盖玻片被压碎。(5)如果观察到的组织细胞大多破碎不完整,原因是什么?压片过程中用力过大。(6)盐酸在解离过程中有什么作用?丙酮能被取代吗?细胞基质的分解和溶解;不,硝酸可以代替它。(7)为什么冲洗是必要的?洗去盐酸便于染色。(8)细胞中染色最深的结构是什么?染色最深的结构是染色质或染色体。(9)如果观察到的细胞的所有部分都是紫色的,原因是什么?染液浓度过高或染色时间过长。(10)为什么我们需要找到单独的生活区?这个部门的特点是什么?我能使用高倍率物镜找到分生区域吗?为什么?因为只有根尖分生区的细胞才能分裂细胞。分生区的特征是:细胞呈方形,排列紧密,部分细胞处于分裂状态;分生组织在高放大倍数下找不到,因为高放大倍数下观察到的实际范围很小,很难找到分生组织
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