学习_第九章甾体类化合物

.,第八章甾体类化合物,.,C17侧链,.,一、结构及分类,第一节概述,.,甾醇类,C21甾类,+C3,+CH3COOH,甲型强心苷,乙型强心苷,生物合成途径,.,甾醇,甾体皂苷元,.,甾体类化合物的颜色反应原理：甾核强酸（无水条件）脱水双键转位形成共体系多烯阳碳离子盐系列颜色1、Liebermann-Burchard反应LB反应黄紫红（褪去）：三萜AC2O浓H2SO4最后污绿：甾体2、Salkowski反应氯仿浓硫酸反应CHCL3层绿色荧光H2SO4红或兰色,.,3、Tschugaev反应冰HAC乙酰氯反应因结构不同显不同颜色4、Rosen-Heimer反应三氯乙酸反应CCL3COOH加热60显红紫红色（甾体皂苷）加热100显红紫红色（三萜）5、Kahlenberg反应SbCL5反应紫色,.,第二节强心苷类,一、概述1、定义存在天然界的一类具有强心作用的甾体苷类2、临床应用2030种西地兰去乙酰基毛花毛地黄苷丙（C）狄戈辛异羟基洋地黄毒苷强心灵黄荚次苷甲、乙及单乙酰黄荚次苷混合物3、应用毒毛旋花子箭毒，非洲土著各族用海葱埃及古罗马时用以治疗水肿蟾酥强心、解毒、消肿，六神丸的主要原料,.,二、结构与分类,甲型(强心甾烯类)乙型(蟾酥甾烯类),甲型强心苷元以强心甾为母核命名，17位多为构型；乙型强心苷元以海葱甾或蟾酥甾为母核。,.,（一）苷元部分,1、母核分类甲型强心苷（五元不饱和内酯）20（22）五元内酯；/内酯乙型强心苷（六元不饱和内酯）20；22六元内酯；，内酯,.,2、四环稠和,一般甾核顺/反反反强心甾核顺/反反顺A/B多数順式（5H）如：洋地黄毒苷少数反式（5H）如：乌本苷,.,3、取代基性质及构象C3OH多数体（順式）；少数体（反式）命名冠以表（epi）字C14OH（）取代C13CH3（）取代；C10CH3（）取代（CH2OH、CHO、-COOH）,.,4、命名,洋地黄毒苷元3、14二OH，5强心甾20（22）烯,.,海葱苷元3、14二OH，海葱甾4、20、22三烯,.,（二）糖部分（C3OH与糖结合）,种类OH糖6去氧糖甲醚D毛地黄糖6去氧糖D鸡纳糖去氧糖2、6去氧糖D毛地黄毒糖2、6去氧糖甲醚D加拿大麻糖,.,（三）糖与苷元连接方式,型苷元（2、6去氧糖）x（Dglc）y型苷元（6去氧糖）（Dglc）y多型苷元（Dglc）y实例：毛地黄叶含30多种强心苷苷元R1R2毛地黄毒苷元HH羟基毛地黄毒苷元HOH异羟基毛地黄毒苷元OHH双羟基毛地黄毒苷元OHOH,.,.,三、理化性质,（一）理化性质1、形状苷多为无色结晶或无定形粉末C-17位为构型者味苦，构型者不苦但无强心作用。对粘膜有刺激性2、溶解性苷可溶于水，丙酮、及醇等极性溶剂，略溶于EtOAC、含醇CHCL3，几乎不溶于醚、苯、石油醚等非极性溶剂。苷元难溶于极性溶剂，易溶于CHCL3、EtOAC等。,.,毛地黄毒苷乌本苷特例：亲脂性苷毛地黄毒苷（含3个糖，共有5个OH）难溶于水（1：100000）易溶于CHCL3(1:40)亲水性苷乌本苷（含1个糖，有8个OH）易溶于水(1:75)，难溶于CHCL3,.,3、碱水解反应,（1）酰基水解NaHCO2、KHCO2只作用于去氧糖上的酰基Ca（OH）2、Ba（OH）2作用于去氧糖上的酰基、苷元上的酰基（2）内酯环碱解1强碱水解内酯开环H环合,.,（2）强碱/醇溶液使20（22）转位，并使分子异构化活性亚甲基异构化物（）异构化物（）甲型强心苷的活性亚甲基产物可产生显色反应,.,乙型强心苷在醇性苛性碱中，内酯环开裂生成酯，再脱水生成异构化物,4、脱水反应叔醇易脱水,C5OH、C14OHH脱水苷元,.,5、苷键水解1、酸催化水解（1）温和酸水解适于型强心苷型强心苷0.020.05MOL/L苷元x（去氧HCL/稀醇30糖）双糖（此法只能切断去氧糖苷键，OH糖苷键不能断裂）（2）强烈酸水解适于型、型强心苷强心苷35HCL脱水苷元x（单糖）（此法因酸度高，加热时间长，有时需要加压，所以苷元易脱水）,.,（3）HCLMe2CO法（Mannich水解）铃兰毒苷HCL/Me2CO（室温2周）毒毛旋花子苷元氯代Lrha丙酮化合物2、酶催化水解只断裂Dglc苷键型、型强心苷酶解次生苷Dglc型强心苷酶解苷元Dglc例如：型紫花毛地黄苷A紫花苷酶毛地黄毒苷Dglc型紫花毛地黄苷B紫花苷酶羟基毛地黄毒苷Dglc型乌沙苷酶解乌沙苷元L鼠李糖蜗牛消化酶（混和酶）可水解强心苷所有的苷键,.,（三）显色反应,一作用于不饱和内酯环的反应只适应于甲型强心苷1、legal反应（亚硝酰铁氰化钠）深红或蓝色2、kedde反应（3、5二硝基苯甲酸）深红3、raymaond反应（间二硝基苯）紫红蓝色4、Baljet反应（苦味酸）橙橙红色（注：以上反应均需在醇性NaOH溶液中进行，因此，应先排除遇碱变红的反应：蒽醌以、查耳酮、橙酮等成分）,.,二作用于去氧糖的反应,1、kellerkiliani（K.K）反应（试管反应）FeCL3-冰HAC反应只适于游离去氧糖或去氧糖苷现象：HAC层显蓝绿色；界面显红色（对结合在型强心苷中的去氧糖和乙酰化的去氧糖不反应）2、对二甲氨基苯甲醛反应（纸片反应）喷试剂后90加热30显红色（分子重排后的缩合反应）3、占吨氰醇反应（xanthydrol）适于任何去氧糖苷样品试剂水浴3红色4、过碘酸-对硝基苯胺反应（显色剂）样品喷过碘酸试剂10后再喷对硝基苯胺试剂深黄色喷5NaOH/MeOH绿色,.,四、强心苷的波谱特征,（一）UV甲型强心苷内酯220nm（log4.34）乙型强心苷，内酯295300nm（log3.95）（二）IRVCO峰可区别甲型、乙型不同苷元1、甲型强心苷VCO18001700cm1有两个VCO正常VCO1756cm1；非正常Vco1783cm12、乙型强心苷Vco比甲型强心苷低40cm1也有正常和非正常峰之分VCO乙型小于甲型（因乙型六元环共轭体系长）,.,五、提取分离,（一）提取原生苷7080EtOH提（防止酶解）次生苷利用酶解后再提（二）纯化1、溶剂法种子pet脱脂后醇提醇提后回收溶剂pet、C6H6等萃取叶子醇提水沉法去叶绿素,.,2、铅盐法适于在40EtOH中加铅盐沉淀，可沉去皂苷、鞣质等杂质，而强心苷无损失。（低于此浓度，强心苷损失，高于此浓度，杂质沉淀差）3、吸附法活性炭吸附叶绿素等亲脂性杂质4、Al2O3吸附皂苷、多糖等水溶性杂质,.,（三）分离,1、两相溶剂萃取法利用分配系数不同进行分离（溶剂分布法）CHCL3MeOHH2O毛花毛地黄苷A1：2251：20不溶毛花毛地黄苷B1：5501：20不溶毛花毛地黄苷C1：20001：20溶CHCL3：MeOH：H2O（5：1：5）总苷1000倍混和溶剂萃取CHCL3层A、B水层C,.,2、逆流分配法分离黄花夹竹桃苷A、B采用此法层析法3、亲脂性单糖苷和苷元吸附层析（硅胶）4、弱亲脂性强心苷（极性相近）DCCC法例如：RRR黄荚次苷ACHOHH黄荚次苷BCH3HH黄荚次苷CCH2OHHH黄荚次苷DCOOHHH极性：DCAB洗脱顺序BACD,.,强心苷的生理活性,1、C3O糖，可改变强心作用，单糖本身无强心作用2、甾体母核的立体结构与毒性的关系3、强心苷对动物肿瘤有抑制作用,.,第三节甾体皂苷,一、定义甾体皂苷(steroidalsaponins)是一类由含有27个碳原子的螺甾醇或呋甾醇与糖结合而成的寡糖苷。存在：大多存在于单子叶植物的百合科，石蒜科和薯蓣科等植物中。常用中药知母、天门冬、麦门冬、七叶一枝花等都含有大量甾体皂甙。用途：甾体皂甙元是合成甾体避孕药及激素类药物的原料。,.,二、化学结构分类,依据皂苷元骨架螺甾烷结构中C25的构型和环的环合状态，可将其分为以下四种类型。,.,螺甾烷醇类C25为S构型、FL型neo型,异螺甾烷醇类C25为R构型、FD型iso型,.,呋甾烷醇F环为开链衍生物,变形螺甾烷醇类F环为五元四氢呋喃环,.,二、理化性质1、与三萜相似1）性状甾体皂苷元有较好晶形2）溶解性皂苷元溶于Pet等亲脂性溶剂，难溶于水，皂苷极性加大，水溶性增强3）表面活性4）与金属沉淀中性皂苷：可与碱性醋酸铅沉淀2、皂苷与甾醇形成稳定的分子复合物（如胆甾醇）条件：1）3-OH甾醇3-OH或3-OH酰化不能反应2）A/B环反式或5位有双键更易于形成,.,3、显色反应E试剂（盐酸对二甲氨基）A试剂（Ehrlish)(茴香醛）螺甾不反应黄色呋甾红色黄色4、呋甾烷醇F环开裂的皂苷不产生溶血作用，且表面活性降低,.,五、甾体皂苷元的波谱特征,1、UVnm（200400）饱和甾体皂苷无吸收含单双键205225（900）含CO285（500）含不饱和酮基240（11000）含共轭二烯235,.,2、IR,指纹区可区别C25两种异构体25F（L螺甾烷）：B带（921cm-1）C带（900cm-1）25F（D异螺甾烷）：C带（900cm-1）B带（921cm-1）,.,3、MS,EIMS139（100基峰）115（m中强峰）126（w弱峰）或,.,4、NMR,1、高场4个CH3C18C19SC21C27d2、略低场C16H；C262H因与O相邻处在较低磁场3、其他CH2，CH在1.52.5之间呈堆积峰,.,5、药理活性1）抗炎作用2）抗肿瘤从云南白药平重楼中分离的甾体皂苷和对P388、1210、KB细胞具有显著的抑制作用。3）降低胆固醇、降血脂5）免疫调节6）心血管作用由黄山药中提取的甾体皂苷制成的地奥心血康胶囊防止心脑血管,.,三、提取分离基本与三萜皂苷相似，只是甾体皂苷一般不含羧基，呈中性，亲水性较弱。甲醇或乙醇提正丁醇萃取柱色谱（硅胶、sepLH-20、大孔树脂等）,.,中药化学成分预试验,一、预试验的分类：1、系统预试检查所有大类的成分2、分项预试根据需要，只检查一类或几类成分二、药材提取方法1、水提冷水可检查：aa、pro热水（60）单糖、多糖、有机酸、苷类、小分子酚类、鞣质、皂苷、aa、Pro等。,.,中药化学成分预试验,2、95%EtOH提：各类苷（香豆素、蒽醌、黄酮、）酚类、有机酸、萜类、甾体等成分酸醇提生物碱3、Pet提挥发油、油脂、萜、甾体三、实验方法：1、试