液相色谱仪日常维护

日常分析的注意点,1：液相系统维护流程图,吸滤头,单向阀,柱塞密封圈,线路过滤器,手动进样器,检测器,日常维护,材料：不锈钢烧结，孔径10um故障：堵塞表现：管路中不断有气泡生成措施：用520的稀硝酸，超声波清洗，再用蒸馏水清洗注意点：吸滤头拆下时不必将塑料管剪断,吸滤头,日常维护,单向阀,LC-10ATvp泵：串联式往复泵,LC-10ADvp泵：并联式往复泵,日常维护,单向阀结构,流动相,单向阀原理,日常维护,故障1：宝石球粘附于垫片表现：泵无法吸液或排液，流路不通措施：1）用针筒抽出口单向阀以产生负压，使宝石球与垫片分开2）拆下单向阀，放入异丙醇或水中，用超声波清洗,单向阀,日常维护,故障2：宝石球或塑料垫片受污导致密封不好表现：系统压力波动大措施：拆下单向阀，放入异丙醇或水中，用超声波清洗,单向阀,日常维护,故障：密封圈磨损而导致密封不良现象：系统压力波动大或漏夜措施：更换密封圈注意点：更换密封圈拆卸泵头前，柱塞杆复位（PSET）,柱塞密封圈,日常维护,故障：堵塞现象：系统压力波动大或压力偏高措施：5稀硝酸，超声波清洗判断依据：关闭排液阀，断开出口管路，设定流速1mL/min，如压力3kgf/cm2，则可能堵塞。,线路过滤器,排液阀,压力传感器,线路过滤器,流动相,日常维护,紫外检测器,参比池,样品池,光线,光电倍增管,日常维护,故障：样品池受污表现：样品池和参比池能量相差较大检查方法：设定250nm波长，通甲醇或水，查看SMPLEN和REFEN，如两者相差较大，则样品池受污。措施：用针筒注入异丙醇，清洗样品池；如污染严重，拆开样品池，将透镜等放入异丙醇中超声波清洗。,紫外检测器,日常维护,更换氘灯（紫外检测器）,判断氘灯能量：设定220nm波长，检查参比池能量，如能量低于800，需更换氘灯。操作注意点：不要用手直接接触氘灯表面,2：手动进样器的样品注入,日常维护,操作注意点：1）插针应插到底2）进样应使用液相色谱专用平头进样针3）清洗应使用专用针口清洗器,手动进样器,定子,转子,塑料箍,弹簧,不锈钢套,3：有机溶剂的优与劣,什么时候需要“HPLC”级有机溶剂,1.等浓度洗脱法的微量分析用光谱进行判断2.梯度洗脱法分析,3.1等浓度洗脱法的微量分析,优级,噪声,噪声,目的成分,目的成分,HPLC级,优级,HPLC级,测试波长上的噪声水平与流动相的吸光度成正比,乙腈,3.2梯度洗脱法分析,需要“HPLC”级有机溶剂理由：即使没有注入被测样品，因流动相的不纯物质，造成出峰。,梯度洗脱法的注意点,1.流动相使用HPLC级有机溶剂。2.查看空白实验的数据。3.遵守分析周期。（最初的分析数据不采用）,4:谈谈缓冲液,4:谈谈缓冲液,选择缓冲液的步骤1.确定最佳分离状态时的流动相pH2.选择具有与流动相的pH相近的pKa的缓冲液（即使浓度稀也具有较强能力的缓冲液）3.确认检测波长下缓冲液是否有大的吸收（在波长210nm附近进行检测时，不能用醋酸和柠檬酸的缓冲液）,代表性弱酸的pKa,pK1pK2pK3醋酸4.87柠檬酸3.134.766.40磷酸2.167.2112.32,5:关于脱气,脱气的目的,1.防止由气泡的产生引起的故障2.防止由溶解（在液体中的）气体量的变动引起的检测不稳定程度1）示差折射率检测器*使折射率变化2）UV检测器（200nm以下）*溶解氧气有吸收3）荧光检测器*溶解氧气有消光作用,脱气的方法,1.吸气器法*可以抑制制做流动相时产生的气泡*只是暂时的脱气法*不能解决因溶解气体造成的问题2.He清除法3.使用氟树脂膜的减压脱气法,He清除法,调压阀,排气阀,往送液泵,流动相,过滤器,使用氟树脂膜的减压脱气法,氟树脂膜,真空室,往送液泵,真空泵,控制器,流动相,6:予处理柱和防护柱,予处理柱和防护柱的位置,予处理柱,防护柱,泵,进样器,分析柱,予处理柱的作用,用于免除流动相的影响例如1.在离子色谱分析中，免除多价离子的不良影响。2.在梯度洗脱分析中，使鬼峰后移，不影响目的成分的分析。3.防止硅胶载体的溶解。（使用碱性或含有胺的流动相时）,防护柱的作用,代替分析柱捕集样品中的杂质，容易更换，降低成本。,7:关于ODS柱补修,峰的变形,根部变宽,有肩或分叉,峰产生有肩或分叉的原因,1.柱子劣化（进口处产生不均匀的空隙